190747. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás reagenskészlet progeszteron kimutatására és meghatározására biológiai folyadékokból
1 190 747 2 mintákból keverés után 100—100 fú-t mérünk reagenscsövekbe, majd a minták progeszteron koncentrációját az 1. példa k—1. pontjainak megfelelően határozzuk meg. A tejminták nem specifikus reakciót adó összetevőit a standard sorhoz adott alacsony progeszteron tartalmú (ivarzó vagy ovariektomizált állatból származó) tejjel korrigáljuk. A leírt módszerrel 15 fd teljes tej progeszteron tartalmát határozzuk meg. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás progeszteron hormon kimutatására és/vagy kvantitatív meghatározására biológiai folyadékokból enzim-immun módszerrel, amelynél a meghatározandó haptén oldatához ismert mennyiségű antitestet és peroxidáz enzimnek a meghatározandó hapténnel előzőleg elkészített ismert mennyiségű konjugátumát adjuk, majd egy folyékony állapotú második antitesttel az első antitestet kicsapjuk és az ahhoz kötődött enzim aktivitását meghatározzuk, azzal jellemezve, hogy a meghatározandó progeszteron oldatához 1:20 és 1:35 közötti mólarányú bovin szérum albuminból és progeszteronból kovalens kapcsolással készült antigénnel immunizált nyúl szérumát, mint antitestet és RZ = 1,2—1,8 minőségű peroxidáz enzimnek a meghatározandó progeszteronnal előzőleg elkészített konjugátumát adjuk, majd a keveréket a vizsgálandó mintával legalább fél óra hosszat inkubáljuk és gyártási adagonként aptimalizált mennyiségű anti-nyúl birkaszérum és 5—10% polietilénglikol Keverékét adjuk hozzá, ezt követően a reakcióelegyet legalább 15 percig inkubáljuk, végül a kötött konjugátumot az oldattól elkülönítjük és az enzimaktivitást önmagában ismert módon meghatározzuk. 2. Reagenskészlet progeszteron meghatározására az 1. igénypont szerinti eljárással, azzal jellemezve, hogy az a) progeszteron és peroxidáz előhígított folyékony konjugátumából b) Iiofilizált anti-progeszteron szérumból, c) Iiofilizált anti-nyúl birka szérumból, d) Iiofilizált normál nyúlsavóból, e) szilárd alakú polietilénglikolból, f) a pufferek tízszeres töménységű törzsoldatából, g) a stabilizálószerrel kevert és kapszulázott kromogénből, h) a tablettázott peroxidáz szubsztrátból (előnyösen karbamidperoxidból), i) az enzimreakciót leállító kénsavoldatból, valamint j) a Iiofilizált standard sorozatból, továbbá adott esetben k) kis és nagy progeszteron koncentrációjú mintákból és l) a mérési sorozat grafikus értékeléséhez skálabeosztással ellátott diagram papírból, és m) a méréshez szükséges edényzetből áll. 5 10 15 20 25 Ábra nélkül 5
