190607. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a vemhesség korai felismerésére
3 190607 4 A találmány tárgya a vemhesség korai felismerésére szolgáló új komplett mérési eljárás emlős állatok tej-, szérum vagy plazmaprogeszteron meghatározása útjár rádioimmunanalitikai módszerrel, specifikusan 125I-izotóp mérésére alkalmas hordozható kis méretű, egycsatornás impulzus amplitúdó analizátor alkalmazásával. Az emlős állatok, különösen a szarvasmarhák vemhességének megállapítására eddig ismertté vált eljárások egyrészt fizikális, másrészt laboratóriumi vizsgálatok. Fizikális vizsgálat például az allantoishólyag kitapintásával végzett vizsgálat, amely nagy gyakorlatot és óvatosságot igényel, mivel a nem körültekintően végzett vizsgálat a magzat károsodásához vezethet. E módszerrel csupán a 42. nap utáni vemhességet lehet teljes biztonsággal megállapítani. Ugyancsak fizikális vizsgálat a magzati ütődés érzékelésével történő vemhesség megállapítása, mely csak a 60. nap után lehetséges. A fizikális vizsgálatok közös hátránya, hogy az inszeminálás és a vemhesség megállapítása között viszonylag hosszú idő telik el, amely a nem vemhesült állatok késői kiszűrése miatt gazdaságtalan. A laboratóriumi vizsgálatok progeszteron meghatározáson alapulnak, ugyanis a vemhes állatok tejének progeszteron-tartalma jelentősen nagyobb a nem vemhesült állatok esetében mérhető értéknél. Ezek egyik csoportját képezik azok a vizsgálatok, ahol a progeszteron meghatározása extrakciós eljárásokkal van kombinálva. A J. Endocr. 45, 449 (1969)-ben leírtak szerint a szarvasmarháktól vett tejet meglúgosítják, a progeszteront petroléterrel extrahálják, majd a lipoidokat 70%-os vizes metanol-oldattal távolítják el. A progeszteron meghatározását a tisztított extraktumból, a „fehérjéhez kötődés” (competitive proteinbinding assay: C.P.B.) elvén alapuló eljárással végzik. A J. Clin. Endocr. 32, 619 (1971)-ben leírt módszer szerint a petroléterrel végzett extrakció után az extraktumot szárazra párolva a progeszteron mennyiségét RIA-val határozzák meg. Ezen extrakcióval kombinált módszerek hátránya, hogy az extrakció művelete és az ezt követő tisztítások miatt az eljárás hosszadalmas, nem gazdaságos és nagyobb mintaszámmal végzendő sorozatvizsgálathoz (pl. 50— 200 vizsgálat/nap) nem alkalmas. A progeszteron meghatározáson alapuló vizsgálatok egy másik csoportját kepezik azok, amelyek direkt a progeszteron meghatározáson alapulnak. A mérések egy része C.P.B. technikával történik; a J. Endocr. 49, 407—419 (1971 )-ben leírt módszerrel a plazma progeszteron tartalmát mérik, a Vet. Rec. 96, 34-38 (1975)-ben leírt módszer szerint pedig a tej progeszteron tartalmát mérik. Mindkét C.P.B. elven alapuló módszer közös hátránya, hogy alacsonyabb érzékenységű, mint a RIA módszer. A tisztán progeszteron meghatározáson alapuló meghatározások másik részében a progeszteron meghatározás radioimmunanalitikai módszerrel (RIA-val) történik. A Br. Vet. J. 132, 445—464 (1976) olyan módszert ismertet, amelyben a tej progeszteron tartalmát RIA módszerrel mérik és triciált tracer-t alkalmaznak. A módszer hátránya, hogy szcintillációs folyadékra van szükség, amelynek egyes komponensei csak körülményesen, devzáért szerezhetők be, az eljárás kivitelezése bonyolult, 1; ssú, több lépésből áll. Találmányunk kidolgozásánál azt a célt tűztük ki, h rgy olyan komplett mérési eljárást dolgozzunk ki emlős á latok korai vemhességének felismerésére, az ideális évenkénti ellés megközelítésére, amely az állattenyésztésben a helyszínen, bármilyen körülmények között elvégezhető legyen, a mérésre használt készülék egyszerű, kisméri tű, hordozható legyen, ne igényeljen szakértelmet, egy v zsgálat egyetlen gombnyomással elvégezhető legyen, a mintavétel és a mérés egy és ugyanazon helyen történjek, a vizsgálat gyorsan és gazdaságosan végrehajtható k gyen. A találmány értelmében a kitűzött célt azáltal valósítjuk meg, hogy új komplett mérési eljárást dolgoztunk ki e nlős állatok tej-, szérum- vagy plazmaprogeszteron megh itározására, amely szerint a vizsgálat radioimmunanalitikii módszerrel történik, amikoris 1251-dal jelzett tracer-t hisználunk és ennek sugárzását speciálisan 1251 mérésére a kalmas kis méretű hordozható detektorral, nagyfeszültségű tápegységgel, valamint vezérlő elektronikával egybeé n'tett egycsatornás amplitúdó analizátor célkészülékkel nléijük, miáltal a vemhesség korai stádiumban nagy biztonsággal megállapítható. A 1251-dal végzett jelzés előnyösebb a triciált tracer a kalmazásánál, mivel a gamma-sugárzás mérésére egyszeníbb eljárások alkalmazhatók, mint a szcintillációs folyadékot is igénylő triciált minták mérésénél. Gamma-sugárzás mérésére eddig például az alábbi k.'reskedelmi forgalomban levő készülékeket alkalmazt; k. „LKB Mini Gamma counter 1275”, amelynek hátrrnya, hogy devizaigényes műszer, nem hordozható és a kezeléshez nagy szakértelem kell. A Gamma Művek által készített NK 350A és NK 350B, amelyek hátránya, hogy ó omvédelem szükséges hozzájuk, nagy a súlyuk, magasfokú szakértelmet igényel a kezelésük, a beállításuk és az üzemeltetésük egyaránt, nem alkalmazhatók a mintavétel h -lyszínén. Ismeretes még az NZ 322, melynek súlya 81 kg és az NK 310, amelynek súlya 300 kg, ezek tekinti ttel nagy súlyukra, szintén nem hordozhatók, valamint szintén szakértelmet igényelnek. Valamennyi, a keresk ideiemben kapható általános méréstechnikai célokat Szolgáló készülék éppen az univerzális felhasználás biztosítása érdekében kellő szakértelemmel rendelkező kezelő által beállítható nagyfeszültséggel, diszkriminációs színtikkel, differenciál, integrál kapcsolóval, mérési idővel stb. készül, így kezelésük, ellenőrzésük bizonyos mérésti chnikai ismereteket is feltételez. Ezen ismeretekkel n:m rendelkező ember az értékes és érzékeny készülék iket nem tudja kezelni. Ezen készülékeknél további poblémát jelenthet a detektor beszerzése és a mérőkészülékekhez illesztése. Az ilyen típusú készülékek alkalmazása esetén a mérés és a mintavétel egymástól sokszor távoleső helyen, elkülönítetten történik. Ennek 2c az oka, hogy egyrészt biztosítani kell a megfelelő szakembereket, akik viszont éppen a készülék univerzális volta és gazdasági megfontolások miatt nemcsak ezt az egyfajta mérést, hanem számtalan egyéb mérést is el kell végezzenek, másrészt a készülékek rendkívül nagy mérete és különösen nagy súlyuk lehetetlenné teszi az esetenként 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
