190502. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiszta hellebrin előállítására
1 190302 2 A találmány tárgya eljárás tiszta hellebrin előállítására, zsírtalanított heÚebrin-kivonat extrahálásával és.a tiszta hellebrinnek az extrakciós maradék etanol jelenlétében való melegítése útján végzett leválasztásával. A Helleborus-fajták gyökerei a szívre hatást gyakoroló hellebrin-gílkozidot tartalmaznak, amely a sztrofantusz- és szcilla-glikozidok között elfoglalt helyzete miatt fokozott gyógyászati érdeklődést kelt. Ismeretes, hogy a Helleborus niger-ből egy digitáliszhoz hasonlóan ható glikozid állítható elő, oly módon, hogy vizes Helleborus-kivonatokat szénnel kezelnek, a kapott terméket szerves oldószerekkel extrahálják és a kapott extraktumot további tisztításnak vetik alá (605 073 sz. Német szabadalmi leírás). A szénnel való kezelést megelőzheti egy ólommal végzett lecsapás is, ekkor az ólom feleslegét foszfáttal [Helv. Cilim. Acta, 26, 1353. old. (1943)], vagy szulfáttal [Farmacia (Bukarest), 407. o. (1959)] távolítják el. Ez az eljárás azonban nem kielégítő. Az adszorpcióval végzett leválasztás hátrányai egy újabb eljárás szerint elkerülhetők, amennyiben a Hefieborus-extraktumot fokozatosan, különböző oldószerekkel kezelik (101 577 sz. csehszlovák szabadalmi leírás). Ez az eljárás azonban nemcsak sok oldószert igényel, de az is kiderült, hogy az eljárás rendszerint nem vezet kristályosítható hellebrinhez. Helleborus-extraktumoknak alumíniumoxidon végzett kromatográfiás tisztítását is ismertették, ólommal végzett előzetes lecsapással kombinálva [Med. prom. SSR, 18, 12. o. (1964)], vagy e nélkül [Planta med., 9, 64. o. (1961)]. A hellebrin kitermelése azonban csupán 0,04%. Kedvezőbb kitermelések érhetők el kovasavgélen végzett kromatografálással [Z. Naturforschg., 20b, 707. o., (1965)], Acta Pharm. Jug., 17,29.0.(1967)]. Az alkalmazott kovasavgélek azonban finomszemcsések (szemcsenagyság 0,01-0,04 mm), amelyek csak mérsékelt átfolyási sebességet tesznek lehetővé. A kovasavgél-oszlopok kapacitása is általában csak fele az azonos nagyságú alumíniumoxid-oszlopokénak, így ez az elkülönítési módszer csak kismennyiségű hellebrin előállítására alkalmas. Az újabb eljárások durvább szemcséjű kovasavgélt alkalmaznak, amelyek szemcséje 0,15)10 mm (2 038 110 és 2 123 535 sz. Német Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi leírások). Ennél az eljárásnál olyan extraktumot alkalmaznak, amelyet például hellebrintartalmú drognak kloroform és etanol 2 : 1 arányú elegyével végzett extrahálásával kaptak, ennek során az említett extrahálószer igen nagy mennyisége szükséges és ezen túlmenően az extrakció igen hosszú időt, pl. 5 napot vesz igénybe. A találmányunk szerinti megoldással az említett hátrányok elkerülhetők, a találmányunk szerinti eljárást az jellemzi, hogy zsírtalanított hellebrintartalmú extraktumot víz és 1 -3 szénatomos alkanol elegyében vagy víz és aceton elegyében 1 -3 szénatomos alkalanolból és diklór-metánból, triklór-metánból, tetraklór-metánból vagy diklór-etánból álló keverékkel vagy acetonból és diklór-metánból, triklór-inetánhól, tetraklór-metánból vagy diklór-etánból álló keverékkel extrahálunk, majd a hellebrint tartalmazó klórozott szénhidrogén-fázist vákuumban bepároljuk és az így kapott szirupszerű maradékot etanolban visszufolyatás alkalmazásával addig melegítjük, míg a maradék teljesen feloldódott és az első hellebrinkristályok leválása megindul. A találmány szerinti eljárással lehetővé válik, hogy az extrakciós lépésben a szerves oldószerek felhasznált mennyiségét, továbbá az eddigi nagy idő-ráfordítást csökkentsük, és ezen túlmenően a tiszta hellebrin előállítására eddig mindig szükséges kromatográfiás műveleti lépést is megtakaríthatjuk, ami ugyancsak jelentős anyag- és időráfordítást igényel. A találmány szerinti eljárás során a hellebrintartalmú extraktumot víz és 1-3 szénatomos alkanol elegyében, vagy víz és aceton elegyében halogénezett szénhidrogén és 1-3 szénatomos alkanol keverékével vagy halogénezett szénhidrogén és aceton keverékével végzett, folyadék-folyadék-extrakciónak vetjük alá. A víz és 1-3 szénatomos alkanol elegye, illetve a víz és aceton elegye - ami a hellebrintartalmú extraktumot tartalmazza a további extrahálás céljára 20— 40 térfogatrész, előnyösen 25-3- térfogatrész 1-3 szénatomos alkanolt vagy acetont tartalmaz. Az 1-3 szénatomos alkanol a megadott mennyiségben különböző 1-3 szénatomos alkanolok keverékéből is állhat. Amennyiben a hellebrintartalmú extraktumot a drognak más oldószerekkel végzett extrahálásával kaptuk, úgy ezeket vákuumban el kell távolítani és a hellebrintartalmú maradékot fel kell oldani a víz és 1-3 szénatomos alkanol elegyében, vagy a víz és aceton elegyében. 1-3 szénatomos alkanolokként különösen a metanol, etanol, propanol, izopropanol, előnyösen pedig az etanol jön számításba. A hellebrintartalom a víz és 1-3 szénatomos alkanol, illetve a víz és aceton elegyében 2-20 mg hellebrin, előnyösen pedig 4-10 mg hellebrin legyen 1 g extraktum-oldatra. Extrakciós folyadékként olyan keveréket alkalmazunk, amely diklór-metánból, triklór-metánból, tetraklór-metánból vagy diklór-etánból, (1,1-diklór-etánból vagy 1,2-diklór-etánból) és valamilyen 1-3 szénatomos alkanolból, illetve acetonból áll. Ebben a keverékben az. 1-3 szénatomos alkanol, illetve az aceton hányada 15-35 térfogatszázalék, különösen 20-30 térfogatszázalék. A halogénezett szénhidrogének mennyisége 85 és 65 térfogatszázalék, különösen 70 és 80 térfogatszázalék közötti, például 75 térfogatszázalék. A keverék állhat egyetlen egy alkanolból és az említett halogénezett szénhidrogéneknek csupán egyikéből, állhat azonban alkanolok elegyéből és diklór-metánból, triklór-metánból, tetraklór-metánból és diklór-etánból képezett elegyből is, illetve az említett halogénezett szénhidrogének közül csak kettőnek vagy háromnak a keverékéből is. Az 1-3 szénatomos alkanolokként à fentiekben már felsoroltak jönnek számításba. Extrakciós folyadékként előnyösen kloroform és etanol, vagy diklór-metán és etanol, tetraklór-metán és etanol vagy diklóretán és etanol keverékét (a halogénezett szénhidrogén és etanol aránya 65-75 térfogatarány : 35-25 térfogatarány) alkalmazzuk. Hellebrintartalmú kiindulási anyagokként különösen a következők jönnek számításba: a Helleborus niger gyökerei, de például a Helleborus foetidus, Helleborus ultifidus, Helleborus odorus, Helleborus orinctalis, Heileboris purpurascens és a Helleborus viridis is. Magát az extrakciót az erre alkalmas szokásos extraháló-berendezésben végezhetjük, amely folyama-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
