189770. lajstromszámú szabadalom • Tartósítószer élelmiszer és takarmány tartósítására
1 2 ként (II) képletfl 5-klór-2-metil44zotiazolin-3-ont és (III) képletű 2-metil-4-izotiazolin-3-ont 3:1 tömegarányban tartalmazó keverékek. Kvaterner óniumvegyületként előnyösen olyan (V) általános képletű kvaterner ammonium vegyületet alkalmazunk, amelynek képeiében R jelentése 40%-ban 12 szénatomos, 50%-ban 14 szénatomos és 10%-ban 16 szénatomos n-alkil-csoport. A kvaterner óniumvegyület és az izotiazolinon vegyület tömegaránya a keverékben 1:1-től 21:14g terjedő, előnyösen 9:1 körüli érték. A találmány szerinti szert egyszerű módon használhatjuk mikróbaellenes kezelésre. Takarmány esetén 50-250 rész takarmányra egy résztalálmány szerinti szert használunk. Élelmiszer esetén a szert célszerűen 1:500 - 1:2500 koncentrációjú vizes oldat formájában a mélyhűtés előtti utolsó termelési fázisban, például mosó-, öblítő-, porlasztási- vagy áztatóvízként használjuk. A találmány szerinti szert oly módon állítjuk elő, hogy az izotiazolinon vegyületet összekeverjük a kvaterner ammonium vegyülettel, célszerűen az előbbit az utóbbihoz. Előnyösen az összekeverést 25 és 45 °C közötti hőmérsékleten, légköri nyomáson végezzük. A találmányt az alábbi példákkal közelebbről ismertetjük. 1. példa Szubsztituensként két metilcsoprotot, benzilcsoportot és különböző lánchosszúságú n-alkilcsoportokat (40% 12 szénatomos, 50% 14 szénatomos, 10% 16 szénatomos) tartalmazó kvaterner ammóniumsót 9:1 tömegarányban összekeverünk a (II) képletű 5- -klór-2-metil4-izotiazolin-3-on és (III) képletű 2-metil44zotiazolin-3-on 3:1 tömarányú keverékével. Ezt a keveréket 1:100 aránban hal- vagy húsliszt nyerstömeghez hozzáadjuk, majd a kapott keveréket különböző salmonella törzsekkel, így Salmonella Eimsbüttellel, S. Iivingstone-nal és S. Montevideoval beoltjukXetrationáttal dúsított táptalajjal beborítjuk és 40 X-on inkubáljuk. 24 óra múlva a tenyészetet szelektív táptalajra (S.S. Agar, Wilson és Blair McConcey) átoltjuk, és Salmonella-fejlődésre vizsgáljuk. Néhány kísérleti mintát a kísérleti idő alatt ismételten megfertőzünk, hogy megállapítsuk az újbóli salmonellás fertőződés elleni rezisztenciát. Az első vizsgálati időszakban sem a hai-, sem pedig a húslisztben nem tapasztaltunk ismételt fertőzést és újbóli salmonellás megfertőződést. A mintákat 6, 8 és 12 hónap múlva ismételten megvizsgáljuk annak megállapítása végett, hogy az ezen tárolási idő után a beoltott salmonella törzsek ismét elkülöníthetők-é.. Valamenynyi minta esetén negatív eredményt kaptunk. így az e példa szerinti keverék a szokásos tárolási körülmények között azonnali védelmet biztosít salmonella fertőződés ellen, és hatása legalább 12 hónapon át tart. 2. példa Az 1. példa szerinti keveréket 1:1000 arányban mélyhűtésre szánt élelmiszerek mosó-, öblítő-, porlasztási- vagy áztatóvizéhez adjuk, minden esetben a mélyhűtési fázist megelőző utolsó gyártási lépésben. A következőkben a fagyasztott terméket előírásszerűén tároljuk és felolvasztás után salmonellás fertőződés megállapítása céljából bakteriológiai vizsgálatot végzünk. Sem rövid, sem pedig hosszabb tárolási idő után sem a termékben, sem az olvasztási vízben nem tapasztaltuk salmonellák vagy más patogén csírák jelenlétét. Ugyancsak negatív eredményt kaptunk abban az esetben, amikos egy kísérletben a terméket +5 °C-on végzett, rövid ideig tartó olvasztás után ismét mélyhűtöttük, majd a végleges felolvasztás után vizsgálatuk. 3. példa összehasonlítjuk a találmány szerinti készítmény hatását a 2 450 666 sz. NSZK-beli szabadalmi leírásben ismertetett készítményével. A készítmény kvaterner ammóniumsókból (amelyekben szubsztituensként metil-, etil-, benzil- és n-alkilcsoportok fordulnak elő, az utóbbiak 50%-ban 12, 30%-ban 14,17%-ban 16 és 3%-ban 18 szénatomosak) egy tömegrészt és két tömegrészt 20% szilárdanyagot tartalmazó, mintegy 600 molekulasúlyú vizes polietilénglikol diszperziót tartalmaz. A teszt- és referensanyagokból három ismétlésben szójabab-kivonattal hígított sorozatokat készítünk, amelyeket 1:100 arányban 24 órás baktériumtelepekből származó tesztbaktériumokkal, illetve 7-12 napos gomatenyészetről 7 ml ionmentes vízzel leöblített gombaszuszpenzióval oltunk. A bakteriad, illetve fungi cid hatást jellemző értékeket baktériumok esetén 37 °C-on 24 órás, gombák esetén 28—30 °C-on 48 órás. tenyésztési idő után vizuálisan határoztuk meg, és az eredményeket az I. táblázatban foglaltuk össze : I. táblázat Mikroorganizmus Találmány sz;erinti Referens szer (ppm) szer (ppm) Aspergillus 500 1000 niger Pseudomonas 25 70 aeruginosa Salmonella 9 20' typhosa Staphylococcus 7 20 aureus Escherichia 10 25 coli Az 1. táblázatból kitűnik, hogy a találmány szerinti szer hatása a 2 450 666 számú Német Szövetség Köztársaság-beli szabadalmi leírás szerinti készítményhez képest valamennyi megnevezett mikroorganizmussal szemben előnyösebb. A 2 450 666 sz. NSZK-beli szabadalmi leírás a találmányhoz legközelebb eső megoldást tartalmaz, de egyéb ismert tartósítószerekkel összehasonlítva a találmány szerinti készítmény szintén kitűnik előnyös tulajdonságaival. Az alábbi táblázatban alkalmazási paramétereket hasonlítunk össze. 189.770 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
