189757. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiai tulajdonságú peptidek előállítására
1 189 757 2 A találmány tárgya eljárás pszichofarmakológiai tulajdonságú, új peptidek, és hatóanyag ént a fenti peptideket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására . Közelebbről, a találmány szerinti eljárással előállított peptidek a vazopresszin és oxitodn fragmen- 8einek tekinthetők. Az oxitodn és a vazopresszin olyan peptidek, amelyek hormonális hatásuk mellett neuropeptidként ismertek, és mint ilyenek, többek között a memóriafolyamatokat befolyásolják. A találmány szerinti eljárással előállított peptidek nem rendelkeznek az oxitodn és vazopresszin hormon-tulajdonságaival, viszont azoknál magyobb és spedfikusabb hatást fejtenek ki a memóriafolyamatokra . A találmány tárgya tehát eljárás az (I) általános képletű peptidek — a képletben R jelentése (a) képletű vagy (b) általános képletű csoport, A jelentése Arg vagy Leu aminosavmaradék és Y jelentése hidroxilcsoport vagy Gly-OH csoport —, valamint savamidjaik és savaddíciós sóik előállítására. Az (I) általános képletű peptideket és peptidszármazékokat a peptidkémiában szokásosan használt eljárásokkal állíthatjuk elő. Az előállítás egyik hagyományos módja az, hogy a kívánt aminosavakat kondenzádós reakdóban összekapcsoljuk, a kapcsolást vagy homogén fázisban, vagy úgynevezett szilárd fázist alkalmazva haj fjük végre. A homogén fázisú kondenzádót a következőképpen folytatjuk le : a) szabad karboxilcsoportot tartalmazó, többi reakdóképes csoportján védett aminosavat vagy pepiidet kondenzálószer jelenlétében szabad aminocsoportot tartalmazó, egyéb reakdóképes csoportján védett aminosawal vagy pepiiddel kondenzálunk. b) egy aktivált karboxilcsoportot és adott esetben védett egyéb reakdóképes csoportot tartalmazó aminosavat vagy pepiidet szabad aminocsoportot és adott esetben védett egyéb reakdóképes csoportot tartalmazó aminosawal vagy pepiiddel kondenzálunk, vagy c) szabad karboxilcsoportot és védett egyéb reakdóképes csoportot tartalmazó aminosavat vagy peptidet aktivált aminocsoportot és adott esetben védett egyéb reakdóképes csoportot tartalmazó aminosawal vagy pepiiddel kondenzálunk. A karboxil csoport aktiválását többek között annak savhalogeniddé, aziddá, anhidriddé, imidazoliddá vagy aktív észterré — például N-hidroxi-szukdnimid-, N-hidroxi-benztriazol- vagy p-nitro-fenil-észterré - alakításával végezhetjük el. Az aminocsoportot foszfit-amiddá alakítva vagy foszforazo-eljárást alkalmazva aktiválhatjuk A fenti kondenzádós eljárások közül a leggyakrabban a karbodiimides eljárást, az azidos eljárást, a vegyes anhidrides eljárást és az aktivált észteres eljárást alkalmazzuk a [The Peptides, I.kötet, 1965 (Academic Press), E. Schröder és K. Lübke] irodalmi helyen leírtak szerint. Az (I) általános képletű vegyületeket a Merrifield-féle szilárd fázisú eljárással [J. Amer. Chem. Soc. 85,2149 (1963)] is előállíthatjuk. A fenti eljárás szerint a paptid amin osa vjainak kapcsolása a C-terminális végen kezdődik. Erre a célra olyan szilárd hordozó szükséges, amelyhez a fenti csoportok hozzákapcsolhatók. A hordozó többek között reakdóképes klőr-metil-csoportokat tartalmazó benzol-divinil-benzol kopolimer, vagy hidroxi-metil csoporttal vagy benzil-aminnal reakdóképessé tett polimer hordozó lehet. Abban az esetben, ha klór mietil -csoportokat tartalmazó hordozót használunk, az első a-amino-védett aminosavat észterkötéssel kötjük a hordozóhoz. Az olyan (I) általános képletű vegyületek előállítása során, amelyek képletében Y Gly-OH csoportot jelent, a reakdóban először is Rt -NH-CHj -C0-0-CH2 -szilárd hordozó keletkezik, a fenti képletben Rí valamely a-aminó-véd őcsoportot jelen t. Az Rj védőcsoport eltávolítása után a következő a-amino-csoportján védett aminosavat kapcsoljuk kondenzádós reakdóban, majd az a-amino-védőcsoport eltávolítása után a következő aminosavat kapcsoljuk, és így tovább. A legtöbb esetben előnyös, ha az a-amino-védett aminosavak jelentős feleslegben vannak jelen a reakdóközegben, amely reakdóközeg a szilárd hordozó mellett például metilén-kloridot vagy me ül én-ki őri d és dimetil-formamid elegyet is tartalmaz. A kívánt aminosav-szekvencia szintézisének befejeztével a pepiidet például hidrogén-(luoridos vagy trifluor-metánszulfonsavas kezeléssel lehasítjuk a hordozóról. A pepiidet rövidszénláncú alkohollal — előnyösen metanollal vagy etanollal - végzett átészterezéssel is leválaszthatjuk a hordozóról, a reakdó terméke ebben az esetben a pepiid rövidszénláncú alkil-észtere. Ammóniával végzett hasítás reakdótermékeként pedig amidot kapunk. Azokat a reakdóképes csoportokat, amelyek nem vesznek részt a kondenzádós reakdóban, olyan cső portokkal célszerű védeni, amelyeket például hidrolízissel vagy redukdóval könnyen eltávolíthatunk. Ennek megfelelően a karboxilcsoportot célszerűen pádéul metanollal, etanollal, terder butanollal, benzil-alkohollal vagy p-nitro-benzil-alkohollá* végzett észté réz éssel védjük. Az aminocsoport kielégítő védését rendszerint savas csoportokkal, például alifás, aromás, aralifás vagy heterodklusos karbonsavakból - így ecetsavból, ben zoesavból vagy piridinkarbonsavból - szárma zó csoportokkal,szénsavból származó csoportokkal - például etoxi-karbonil-, benzil-oxi-karbonil-, terc-butoxi-karbonil-, vagy p-metoxi-benzil-oxi-karbonil-csoporttal —, szulfonsavból származó csoportokkal — például benzolszulfonil- vagy p-toluol-szulfonil•csoporttal - valósítjuk meg. de egyéb csoportokat- például helyettesített vagy nem helyettesített arilvagy aralldl-csoportokat, így benzil- vagy trifenil-metil-csoportot, vagy orto-nitro-fenil-szulfenil- vagy 2- -benzoil-1 -metil-vinil-csoportot - is használhatunk. Az arginin guanidinocsoportját is tanácsos védeni, szokásos védőcsoport például a nltro- vagy a 4-metoxi-benzolszulfonil-csoport. Noha a fentebb említett aminosavkondenzádós reakdókban aminosavként használhatunk dsztint is, előnyösebben elsősorban tiolcsoportján védett dszteint használunk. A. dsztein SH-csoportját a szokásos védőcsoportokkal - például acetamido-metil- vagy tritilcsoporttal - í^édhetjük. Miután a kívánt aminosavszekvendát - cisztinil csoport helyett dszteinilcsoporttal - kialakítottuk, a peptidben lévő dszteinil-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
