189735. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dehidrogenázok kimutatására alkalmas diagnosztikai készlet előállítására
1 2 A találmány tárgya eljárás különösen emberi, állati és növényi eredetű folyadékokban kórosan magas koncentrációban jelenlévő dehidrogenázok kimutatására alkalmas diagnosztikai berendezés szubsztrátumot, lüdrogénátvivő vegyületet, redoxi-színezéket és puffer-rendszert tartalmazó anyagkeverékből áll. Az orvosi diagnózisok kiemelkedő egészségügyi szerepet játszanak. Ez különösen érvényes a megelőzési célra végzett vizsgálatok keretében megadott diganózisokra. Ezek között Íhár jelenleg is nagy jelentőségre tettek szert azok a diagnózisok, amelyek például rosszindulatú daganatok korai felismerését célozzák, mivel egy ilyen megbetegedés korai felismerése jelentősen megnöveli a terápiás eredmények kilátásait. Az emberekben, állatokban vagy növényekben végbemenő kóros elváltozások ezen élőlények sejten kívüli (extracelluláris) folyadékainak összetételét befolyásolhatják. így például sejtek kóros elváltozása során — rosszindulatú daganatok képződésekor is ez az eset áll fenn — dehidrogenázok jutnak a szérumba és más, sejten kívüli folyadékba. Minden egyes dehidrogenáz esetében található egy olyan, diagnosztikai szempontból értékelhető küszöbérték, amelyet már kórosnak kell tekinteni. Jelenleg már rendelkezésre állnak olyan kémiai diagnosztizálószerek, amelyek átcsapási pontja megfelel egy dehidrogenáz kóros küszöbértékének. Ennek az átcsapási pontnak a túllépése láthatóvá tehető például egy, a diganosztizálószerben jelenlévő redox-színezék segítségével, amely a kóros küszöbérték fennállásakor színtelenből színesbe csap át (változik). Egy olyan diagnosztizálószer, amely dehidrogenázok sejten kívüli folyadékokban jelenlévő, kórosan megnövekedett koncentrációjának kimutatását célozza, tartalmaz például egy savas pH értékre beállított anyagkeverék-;, amely az adott dehidrogenáznak megfelelő szubsztrátumból, egy hidrogénátvivő vegyületből és legalább egy redoxi-színezékből áll. Abból a célból, hogy ez a szer differenciáldiagnosztikára alkalmassá váljék — amelynek során e szer csak a kórosan megnövekedett dehidrogenáz-koncentrációkat mutatja ki — a fentebb említett pH értéknek meglehetősen alacsonynak, például 5,0-nál kevesebbnek kell lennie. Bizonyos típusú diganózisok — például testen belüli vizsgálatok esetében — kívánatos a diganosztizálószemek alkalmazás előtt egy hordozóra való felvitele. Ez érvényes például olyan nők diganosztizálása esetében, akiket a nemiszervek területén lévő karcin ómákra vonatkozóan kell felülvizsgálni. E célra a 2 443 741 számú, Német Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi leírás közli, hogy a diagnosztizálószert egy egészségügyi tamponra kell felvinni, és ebben az alakban kell bevezetni a vizsgálandó egyén hüvelyébe, ahol a diagnosztizál ószer a hüvelyváladékban jelenlévő dehidrogenázokkal reagálni képes. Ha a tampon a hüvelyből való eltávolítása után színeződést : mutat, akkor ez a vizsgálandó egyén szervezetében végbemenő kóros elváltozásra utal. A 2 443 741 számú Német Szövetségi Köztársaságbeli szabadalmi leírás többek között eljárást ismertet egy olyan diagnosztikai berendezés előállítására, amely egy tamponból és az erre felvitt anyagkeverékből áll. A berendezés a laktát-dehidrogenáz izoenzim■4 "és izoenzim-5 közös meghatározását célozza, és végeredményben nők alsó nemiszervi traktusában végbemenő kóros elváltozások felismerésére szolgál. Az ismertetett eljárás kivitele során energiagazdag fény kizárása mellett a savás pH-értékre beállított anyagkeveréket folyékony formában hozzák érintkezésbe a tamponnal. Ezután a tampon és az anyagkeverék kombinációját megszárítják, és egy energiadús fény számára átjárhatatlan burkolatba zárják. Az energiadús fény ebben a vontkozásban itt és a következőkben olyan fénytjelent (az ibolyántúli /UV/ fényt beleértve), amely a vörös fénynél energiában gazdagabb. A gyakorlatban kitűnt, hogy a diganosztikai berendezés bizonyos sajátságai különösen kívánatosak. A találmány célja tehát eljárás biztosítása olyan diganosztikai berendezés előállítására, amely alkalmazása előtt a lehető leghosszabb időn át tárolható, és e tárolás során hatóképessége lényegében nem változik, így például e berendezésnek, amennyiben redox-színezéket tartalmaz, nem szabad a tárolás során idő előtti elszíneződésre hajlamosnak lennie. Ezenkívül a diagnosztikai berendezésnek a vizsgálandó egyénben való lehető legrövidebb alkalmazási időtartam mellett nagy diagnosztikai biztonságot kell nyújtania. Törekedni kell arra, hogy abban az esetben, ha a diganosztizálószer testen belüli alkalmazása során színezőanyagot képez, akkor a színezéknek a hordozóhoz való kötődése a lehető legszilárdabb legyen, hogy a színezéknek például a vizsgált egyén hüvely-nyálkahártyájába való behatolását elkerüljük. És végül a diagnosztikai berendezés előállításához szükséges időráfordításnak rövidnek kell lennie. A találmány értelmében e feladatot egy hordozóból és egy anyagkeverékből álló diagnosztikai berendezés előállítására szolgáló, olyan eljárással oldjuk meg, amelynek során minden esetben az energiadús fény kizárása mellett a savas pH-értékre beállított anyagkeveréket folyékony formában hozzuk érintkezésbe a hordozóval, majd a hordozóból és anyagkeverékből álló kombinációt megszárítjuk, és egy energiadús fény számára átjárhatatlan burkolatba zárjuk. A hordozóból és anyagkeverékből álló, megszárított kombinációt levegő és nedvesség bejutásával szemben biztosítva zárjuk a burkolatba. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös kiviteli módja szerint úgy járunk el, hogy egy hordozót, amely egy redox-színezéket megkötni képes, valamint egy, a kimutatni kívánt dehidrogenáznak megfelelő szubsztrátumból, egy hidrogénátvivő vegyületből, legalább egy redox-színezékből és adott esetben egy pufferrendszerből álló anyagkeveréket alkalmazunk, aminek során az eljárást az jellemzi, hogy a hordozónak poláris csoportjai vannak, és az anyagkeveréket 5,0- nál alacsonyabb pH értékre állítjuk be. így egy olyan diagnosztikai berendezéshez jutunk, amely különösen alkalmas kórosan megnövekedett dehidrogenáz-koncentrációk kimutatását célzódifferenciál-diagnosztikához, és hosszú — például két évnél hosszabb - tárolhatóság mellett nagy diagnosztikai biztonságot szavatol. A találmány szerinti eljárás egyik különleges továbbfejlesztése során hordozóként cellulózrostokat tartalmazó tampont alkalmazunk. Az így előállított (diganosztikai berendezés kedvezően alkalmazható, mindenekelőtt testen belüli vizsgálatokra, így például nők nemiszerveinek területén lévő karcinómák felismerésére. Ez a diagnosztikai berendezés alkalmazása előtt több éven át tárolható, a vizsgálandó egyénben 189.735 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
