189637. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az angiotenzin átalakító enzim működését gátló prolin-származékok előállítására
1 2 vagy további, a (III) általános képletű vegyületekkel szinergizmust nem mutató, gyógyászatiig hatásos anyagot is tartalmazhatnak. E további hatóanyag pl. valamely diuretikum (pl.bendrofluazide, chlorothiazide, hydrochlorothiazide, furosemide, amiloride vagy chlorthalidone) vagy más hipotenzív szer (pl. d-adrenerg blokkoló anyag, mint pl. atenolol vagy propranolol) lehet. A hatóanyagot orális adagolás esetén előnyösen 10-100 mg hatóanyagtartalmú tabletták vagy kapszulák alakjában készíthetjük ki. Intravénás adagolás esetében előnyösen 0,1-1 súly/tf% hatóanyagtartalmú steril vizes oldatokat állíthatunk elő. Eljárásunk további részleteit az alábbi példákban ismertetjük anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk. A példákban az alábbi általános módszereket alkalmazzuk: Kromatográfia 1) Az oszlopkromatografálást szilikagélen (Merdc Art. 7734) vagy Sephadexen (Sephadex) végezzük el, feltéve, hogy mást nem közlünk. 2) A „Flash kromatografálást szilikagélen (Merck Art .9385) hajtjuk végre. 3) A közepesnyomású folyadék kromatografálást (MPL) Gilson Model 302 szivattyú, Model 111 UV detektor és Kipp + Zouen BD8 többsávú regisztráló felhasználásával végezzük el. Szerkezet igazolás Az (I) általános képletű végtermékeket proton mágneses rezonancia spektroszkópia (Varian EM 390, Bruker HX90E vagy JEOL FX 90Q készülék felhasználásával) és tömegspektroszkópia(KRATOS MS 902 elekciós impakt spektrumra vagy vákuum génerátor 1212 elektron impakt/kémiai izonizációs módszer) alapján jellemezzük. A gyors atom bombázásos spektrumokat (FAB) módosított KRATOS MS9 készülékkel vesszük fel. A spektrumok minden esetben igazolják a feltételezett szerkezetet. A spektrumok részleteit a 12. példában mutatjuk be. Az összes többi esetben hasonlóképpen megfelelő adatokat kapunk. Izomerek _ Az összes vegyület a -COR^u csoportot hordozó szénatomon aszimmetria-centrumot tartalmaz. Az -R4 és -COR10 szubsztituenseket hordozó szénatomokon rögzített konfigurációjú aszimmetriacentrumok vannak. A kapott vegyületeket a -COR^u aszimmetria-centrum vonatkozásában minden esetben izomer-keverék alakjában izoláljuk feltéve, hogy mást nem közlünk. Az izomerek szétválasztása során azt találtuk, hogy mindkét izomer ACE-gátló hatással rendelkezik, az egyik izomer azonban általában aktívabb, mint a másik izomer. A leírásban szereplő aminosavak L-konfigurációcijúak (kivéve az R4 helyén hidrogénatomot tartalmazó vegyületeket, melyek esetében az optikailag inaktív glicinről van szó). 1 1. példa 2,1 g L-alanil-L-prolin-tercier butil-észter és 2,0 g tercier buti! 4-oxo4-fenil-but-transz-2-enoát 30 ml diklór-eiánnal képezett oldalát szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot szilikagél-oszlopon történő kromatografálással és 3 : 1 térfogatarányú diklórmetán-etilacetát eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Olaj alakjában N-/1-tercier butoxikarbonil-3- ■oxo-3-fenil-propil)-L-alanil-L-prolin-terder butilésztert kapunk. Kitermelés: 0,8 g. A kiindulási anyagként felhasznált tercier butil4-oxo4-fenil-but-transz-2-enoátot a következőképpen állíthatjuk elő. 5 g 4-oxo4-fenil-but-transz-2-én-sav és 0,1 ml tömény kénsav 100 ml diklór-metánnal képezett oldatán szobahőmérsékleten, vízmentes körülmények között, 20 percig izobutilént buborékoltatunk át, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 4 napon át állni hagyjuk és ezután 100 ml telített vizes nátrium-karbonát-oldatba öntjük. A szerves fázist elválasztjuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagél-oszlopon történő kromatografálással és 1 : 1 térfogatarányú diklór-metán-petroléter (fp.: 40—60°C) eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Olaj alakjában 5,4 g tercier butil4-oxo4- -fenil-but-transz-2-enoátot kapunk. 2. példa Az 1. példában ismertetett eljárást azzal a változtatással végezzük el, hogy kiindulási anyagként etil4-oxo4-fenil-but-transz-2-enoátot és L-alanil-L-prolin-etilészter-hidrokloridot (a hidroklorid semlegesítése céljából 1 mólekvivalens trietil-aminnal együtt) alkalmazunk és oldószerként diklór-metánt használunk. Olaj alakjában N-/l-etoxikarbonil-3- -oxo-3-fenil-propil/-L-alanil-L-prolin-etilésztert kapunk. A kitermelés az 1. példához hasonló. 3. példa A 2. példában ismertetett eljárást azzal a változtatással végezzük el, hogy kiindulási anyagként az etilészterek helyett a két megfelelő benzilésztert alkalmazzuk. Olaj alakjában N-/1-benziloxikarbonil-3-oxo- 3 -fenil -propil/ -L-alanil -L-prolin-benzil -észtert kapunk. A kitermelést az 1. példához hasonló. 4. példa 1,9 g etil4-oxo4-fenil-but-transz-2-enoát, 1,74 g L-alanil-L-prolin és 1,4 ml trietil-amin 30 ml dimetil-formamiddal képezett oldatát szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd a reakcióelegyet 30°C-nál alacsonyabb hőmérsékleten vákuumban szárazrapároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással és 9 : 1 térfogatarányú diklórmetán-etanol eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Olaj alakjában 0,4 g N-/1-etoxikarbonil-3- -oxo-3-fenil-propil/-L-alanil-L-prolint kapunk. 5. példa 0,65 g az 1. példa szerint előállított N-/1-tercier but oxi -karbonil -3-oxo-3-feníl -propil/-L-alanil-L-prolin-tercier butilészter és 20 ml trifluor-ecetsav elegyét szobahőmérsékleten 2 órán át állni hagyjuk, majd a trifluor-ecetsavat vákuumban 35°C-nál alacsonyabb hőmérsékleten eltávolítjuk. A maradékhoz 15 ml diklór-metánt és 15 ml toluolt adunk, majd az elegyet vákuumban 35°C-nál alacsonyabb hőmérsékleten szárazra poroljuk. A maradékot 189 637 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
