189590. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
1 . 189 590 2 kítható vagy pedig további tisztítás nélkül felhasználható. Előállíthatok továbbá az (Va) általános képletű vegyületek savaddíciós sói is, például úgy, hogy valamely (Va) általános képletű vegyületet egy alkalmas savval semlegesítünk 7,0 alatti pH-ra, előnyösen 2 és 6 közötti pH-ra. Az e célra alkalmazható savak közé tartozik például a sósav, kénsav, foszforsav, szulfaminsav, hidrogén-bromid, ecetsav, borostyánkősav, maleinsav, fumársav, metánszulfonsav, benzol-szulfonsav, Reinecke-féle azobenzol-szulfonsav vagy a pikrinsav. A találmányt közelebbről a következő referenciapéldákkal és kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. Szakember számára nyilvánvaló, hogy a példákban említett konkrét vegyületek helyett alkalmazhatók a megfelelő sztereoizomerek. 1. referenciapélda 5-0-(3' ,4' ,6'-tri-O-Acetil-2'-oxiimino-ß-D-gliikopiranozil)-N.N'-bisz- ( benziloxi-karbonil) -aktinamin előállítása ( D reakcióvázlat) 8,4 g (24 millimól) 3,4,6-tri-0-acetil-2-nitrozó-2- dezoxi-a-D-glükopiranozil-klorid és 11,4 g (24 millimol) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamin 180 ml dimetil-formamiddal készült oldatát szobahőmérsékleten 2 napon át keverjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson közel 50 *C-on eltávolítjuk. A maradékot ezután 1,5 kg szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, 20 ml-es frakciókat szedve. Eluálószerként kloroform és metanol 9:1 arányú elegyét használva először 150 frakciót, ezután eluálószerként kloroform és metanol 98 : 2 arányú elegyét használva 850 frakciót szedünk. A frakciókat futtatószerként kloroform és metanol 95:5 arányú elegyét használva vékonyréteg-kromatográfiás elemzésnek vetjük alá, majd a második olyan frakciócsoportot, amely egyetlen foltot ad, vagyis 717-747. frakciókat kombináljuk. A kapott elegyet vákuumban szárazra pároljuk, 0,5 g (2,5%) menynyiségben a cim szerinti vegyületet kapva. PMR (CDClj): ő 2,04 (s, 9H, —CO—CH,), 3,05 (s, 6H, N—CH3), 3,3-4,6 (m, 10H, OCH, NCH), 5,13 (s, 4H, C6H5CH20), 5,5 (d, 1H), C-3', J = 4 Hz), 5,74 (s, 1H, anomerszerű) és 7,32 (s, 10H, fenil). Szénmágneses rezonanciaspektroszkópia (továbbiakban: CMR; D6-aceton): ő 170,7, 169,8, 169,4 (3-CHjCO), 157,6, 156,9 (OÇON), 150,3 (C=NUH), 138,1 (fenilcsoport 1-es szénatomja), 119.1, 128,3 (fenilcsoport 2-6-os szénatomjai), 96,0 (C-r), 91,9 (C-5 vagy C-5'), 73,6, 70,5, 70,1, 67,7, 64.1, 60,5, 59,7, 59,5 (C—O és C—N), 67,3 (fenil- CH20), 31,7 (2 CHjN), 20,8 és 20,6 (3-CHjCO). Tömegspektrum [a tetra-trimetilszílil-származékra (továbbiakban: tetra-TMS-származék)]: 1063 m/e. la. referenciapélda 5-0-(3',4',6'-tri-0-Acetil-2'-oxiimino-2'-dezoxi-a- D-glükopiranozil)-N,N'-bisz-( benziloxi-karbonil)akt inamin előállítása (E reakcióvázlat) 28,36 g (83 millimól) 3,4,6-tri-0-acetil-2-nitrozó- 2-dezoxi-a-D-glükopiranozil-klorid és 48,56 g (102 millimól N ,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamin oldatát 24 órán át keverjük, miután nem észlelhető reagálatlan piranozil-klorid. Az oldatot 45 *C-on bepároljuk, majd a maradékot 150 ml, 1,5% metanolt tartalmazó kloroformban oldjuk. A kapott oldatot ezután felvisszük egy 7 literes, nedves szilikagéllel töltött oszlopra, majd az oszlopot 1,5% metanolt tartalmazó kloroformmal eluáljuk. Miután közel 22 liter eluálószert elhasználtunk, kis mennyiségű ß-izomer terméket (1,0 g), majd összesen 0,92 g a- és ß-izomert tartalmazó frakciók távoznak. Ezt követően hagyja el az oszlopot 23,12 g (36%) mennyiségben a tiszta cím szerinti vegyület. Az eíuálás után a lehető legrövidebb időn belül mindegyik terméktartalmú frakcióhoz vízmentes trímetil-amint, mégpedig 1 ml eluálószerre vonatkoztatva 0,05 ml-t adunk. A trimetil-aminnal végzett kezelés után a frakciókat összeöntjük, majd 40-50 *C-on bepároljuk. Az eluálás pontos menetét a következőkben adjuk meg: Az eluálószer össztérfogata Súly Termék X metanol kloroformban 23,5-24,9 1 1,0 g ß-anomer 1,5 24,9-25,9 1 0,92 g a- + ß-anomer 1,5 25,9-27.7 1 2,10 g a-anomer a-anomer 1.5 27,7-36,8 1 20,92 g változtatás 4-re 36,8-39,2 1 1,94 g a-anomer + melléktermék 4 39,2-48,0 1 9,27 g melléktermék 4 Cirkuláris dikroizmus (továbbiakban CD; CHjOH): (0)TMx mp = 18 600 ± 1300. PMR (CDClj): ő 2,02 (9H, s), 3,03 (6H, s), 5,08 (4H, s), 6,20 (1H, s) és 7,32 (10H, s). CMR (D„-aceton): 8 170,8, 170,0, 169,8, 157,7, 157,0, 149,3, 137,9, 129,1, 128,3, 92,1, 85,9, 74,4, 70,4, 69,8, 69,3, 68,6, 67,3, 62,5, 60,6, 31,4, 31,1 és 20,6 p.p.m. Tömegspektrum a tetra-TSM-származékra : 1063 (M+), 1048 (M-15), 929, 928, 792, 689, 673, 645, 600 és 342. 2. referenciapélda 5-0-(3'4'-di-0-Acetil-2'-dezoxi-2'-oxiimino-D- arabmopiranozil)-N,N'-bisz- ( benziloxi-karbonil) - akt inamin előállítása ( F reakcióvázlat) 7,2 g (27,1 millimól) 3,4-di-0-acetil-2-dezoxi-2- nitrozo-ß-D-arabinopiranozil-klorid 75 ml dimetilformamiddal készült oldatához hozzáadjuk 11,86 g (25,0 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)aktinamin 50 ml dimetil-formamiddal készült oldatát, majd az így kapott reakcióelegyet nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten 19,5 órán át ke5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
