189548. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-4696 antibiotikum-komplex és egyes komponenseinek előállítására

1

189 548

2

1075, 1062, 1028, 1012,987,965,949,878,840,816, 769, 708 cm

Az A-4696 antibiotikum E, komponense hidroklorid alakjában fehér kristályos vegyidet, amely oldódik vízben, hidroxiles és poláris oldószerekben és nem oldható egyes oldószerekben, amilyen az éter, kloroform, benzol, acélon, alifás szénhidrogének, klórozott szénhidrogének stb. Vizes oldatban a kb. 4-kb. 9 pH-tartományban stabil, kb. 27 °C-ig terjedő hőmérsékleteken.

Az A-4696 abntibiotikum E, komponense hidrokloridjának mikroelemzése a következő közelítő elem-összetételt mutatja (a fennmaradó mennyiséget oxigén teszi ki): C 50,71; H 4,70; N 9,01; Cl 1,84.

Az A-4696 antibiotikum E, komponense hidrokloridjának UV abszorpciós maximuma vízben 279 nm-nél jelentkezik ; E]*m = 39,9.

Az A-4696 antibiotikum E, komponense E, hidrokloridjának IV abszorpciós spektrumát, KBrban, a 6. ábrán mutatjuk be. A megfigyelt megkülönböztethető abszorpciós maximumok a 4000-700 cm 1 tartományban a következők: 3394 széles, 2933, 1657, 1636, 1610, 1589, 1538, 1511, 1505, 1453, 1424, 1393, 1369, 1328, 1320, 1291, 1232, 1212, 1178, 1120, 1075, 1061, 1031, 1018,986,973, 904, 878, 847, 813, 770, 752, 738, 714 cm-'.

Azt állapítottuk meg, hogy az A-4696 antibiotikum B,, B2, B3, CIu, C3 vagy E, komponense hidrokloridjának antibiotikus aktivitása lényegében ugyanakkora Bac. subtilis-szel szemben, mint az A-4696 antibiotikumé (ennek leírását a 4 115 552 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás tartalmazza).

A szakember számára ismert módszereket alkalmazva előállíthatjuk az A-4696 antibiotikum B,, B2, B3, Cl;1, C3 és E, komponense gyógyászatilag elfogadható sóit ásványi savak, például sósav, hidrogénbromid, szulfonsav, foszforsav és hasonlók felhasználásával. Ezeknek a savaknak az antibiotikumokkal alkotott sói például oly módon állíthatók elő, hogy az antibiotikum mint szabad bázis oldatát a kívánt savval megsavanyítjuk és a sót acetonnak az oldathoz való hozzáadásával kicsapjuk. A sók egyes esetekben előállíthatók ioncserélő oszlopon végzett ioncserével is. Az antibiotikumsók előállítására más ismert módszerek is alkalmazhatók.

Az A-4696 antibiotikum új komponensei gátló hatást fejtenek ki sok, emberre, állatokra és növényekre patogén mikroorganizmus növekedésére, ezért felhasználhatók ilyen szervezetek növekedésének megszüntetésében. Azokat a koncentrációkat, amelyekben az A-4696 antibiotikum B,, B2, B3, Cla, C3 és E, komponense, hidroklorid alakban, gátolja egyes jellegzetes mikroorganizmusok növekedését, számszerűen az 1. és 2. táblázatban mutatjuk be. A gátló koncentrációkat agar-higitásos módszerrel határoztuk meg és minimális gátló koncentrációként (MIC, mikrogramm/ml) fejezzük ki.

Az agar-higitásos próbában a kísérleti organizmust agar lemezekre szélesztjük vagy azzal agar lemezeket oltunk be, amelyek az A-4696 antibiotikum komponensek hidrokloridját tartalmazzák, különböző koncentrációkban. A próbalemezeket

48 órán ál 37 °C-on inkubáljuk és az MIC-l úgy határozzuk meg, mint a legalacsonyabb antibiotikum-koncentrációt, amely a kísérleti mikroorganizmus növekedését gátolja.

Az eredmények a következők :

7. táblázat

MIC-agarhígításos módszer

Kísérleti organizmus Aktaplanin komponens, (baktérium) pg/ml

B,

b2

b3

Cu

Staph, epi Hitchens1

32

8

2

2

Staph, epi. Dutt.

0,25

0,25

0,06

0,13

Staph, epi Bennet

16

4

2

1

Staph, aureus 4283

16

4

1

1

Staph, aureus 3055

4

2

1

1

Staph, aureus 3132

16

4

2

2

Staph, aureus H 25

4

2

2

1

Staph, aureus 3134

8

4

2

2

Staph, aureus 3123

8

4

1

2

Staph, aureus H 535

8

4

2

2

Staph, aureus 3131

8

4

2

1

Streptoc. D 282 csoport

2

2

0,5

0,5

Streptoc. D 238 csoport

2

2

0,5

0,5

Streptoc. D SS992 csoport

2

1

0,5

0,5

Streptoc. D 9901 csoport

2

2

0,5

0,5

Streptoc. D 9913 csoport

2

2

0,5

0,5

Streptoc. D 9933 csoport

2

2

0,5

0,5

Streptoc. D Guze csoport

2

1

0,5

0,5

Streptoc. D 12753F csoport

2

2 •

0,5

0,5

Streptoc. viridans 99432

0,5

1

0,25

0,5

Streptoc. viridans 9961

1

1

0,5

0,5

Streptoc. pyogenes C203

0,5

0,5

0,25

0,5

Streptoc. pyogenes DS663-72

0,5

0,5

0,5

0,5

Streptoc. pyogenes DS664-72

0,5

0,5

0.5

0,5

Streptoc. pneumoniae Park 1.

0,5

0,5

0.5

0,5

Streptoc. pneumoniae Type 14

0,5

0,5

0.5

0,5

Staph, aureus 3074

32

8

4

8

Streptoc. faecalis X66

1

1

0,5-nél

2 kisebb

A következő mikroorganizmusokra vonatkozó MIC érték valamennyi komponens esetében 128- nál nagyobb:

Proteus morganii PR 15 Salmonella typhosa SA 12 Klebsiella pneumoniae KL 14 Enterobacter aerogenes EB 17 Serratia marcescens SE3 Escherichia coli EC 14

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

5