189174. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 8-fluor-5(fluor-fenil)-2-([4'-hidroxi- 4'-(p-fluor-fenil)-butil]-2,3,4,4a,5,9b-hexahidro- 1H-pirido[4,3-b-]-indol-származékok előállítására
1 189 174 2 2- táblázat Az alábbi táblázatban összehasonlítjuk néhány, az 1. táblázatban is megadott VII általános képletű vegyület ED50-értékét a 4 001 263 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett megfelelő 5-helyettesített, 5-aril-l,2,3,4-tetrahidro-pirido[4,3-b]indol-származékok megfelelő értékeivel. Először mindig a korábban leírt vegyületek ED50-értékét adjuk meg (a) és alatta a jelen találmány szerinti vegyületekét (b). A vizsgálandó vegyületeket általában intraperitoneálisan adtuk be az állatoknak, illetve ahol más úton, ott ezt külön jelöljük. A mérések időtartama 48 óra volt. X, Y R EDS0 (mg/kg) r 1 1 óra 5 óra 24 óra 48 óra H H 4-hidroxi-4-fenil-butil-csoport (a) 3,2-10 3,2-10 10 (b) 0,032-0,1 0,032-0,1 0,1-0,32-F p-F 4-hidroxi-4-(p-fluor-feniI)-butil(a) 0,1-0,32 0,1-3,2 1,0-3,2 3,2-1,0 csoport (b) 0,032-0,1 0,032-0,1 0,032-0,1 0,1-0,32 (a)* 1-3,2 0,32-1,0 1,0-3,2-(b)* 0,32-1,0 0,1-0,32 0,1-0,32-F p-F 3-(p-fluor-benzoil)-propilcsoport (a) 3,2-10 10-(b) 1,0 1,0 1,0-F o-F 4-hidroxi-4-(p-fluor-fenil)-butil(a) 0,32-1 1-3,2 10-csoport (b) 0,1 0,32 kb. 0,1 kb. 0,1-(b)* 1 1 1 * Per os adagolás 3. táblázat A Vili szerkezeti képletű vegyület szétválasztott aß- es yŐ-diasztereomerjei és szétválasztott a-, ß-, y-, és Ö-enanliornerjei mikrogramm/kg egységben kifejezett KDjo-érlékc. Vegyület Md EDi0 (mikrogramm./kg) 1 óra 5 óra 24 óra u ß y 6 32 100 32 100 32 100 (a diaszlereomerek keveréke) uß-32 100 32-100 a + 32.2 ’ 120 32-100 32-100 ß- 33.0 ° 1000 1000 1000 Y ö 32 100 32-100 Y + 3,1 " 180 32-100 32-100 6-2.7" 1000 560 320^ 1000 V. táblázat A Vili szerkezeti képletű vegyiilelnek az 1. példában leírt módim, szintetikus úton előállított és tisztított u- . ß-, y-, és A-enantiomerjei mg kg egységben kifejezeti ED50-értékei. A mérések időtartama: 72 óra. A Vili s/erke/eti képletű vegyület enamioinerje Mo -E135,1 (mg kg) 1 óra 5 óra 24 óra 48 óra 72 óra « t 30.1 ” 0.023 0,014 0.033 kb. 1 10 ß 33.7 ° 10 5,7 10 10 10 7 1 1.7” 0.178 0.045 0.018 kb. 1 1 <s 2.7 ° 10 5.7 10 10 10 4. példa A 3 H-spiroper idolnak a dopamin-receptorokhoz való kötődésének gátlása Kísérleti módszerek és eredmények Kimutatták, hogy összefüggés van a gyógyszereknek a dopamint kötő helyekkel szemben mutatott affinitása és a feltehetően a dopamin-recepto-25 rok által befolyásolt magatartási jelenségekre gyakorolt farmakológiai hatásuk között, lásd például Búrt és munkatársai. Molecular Pharmacol., 12, 800-812 (1976) és az ott mennyiségi mérésére kitü- 30 nő módszert dolgoztak ki Leyson és munkatársai (Biochem. Pharmacol., 27, 307-316, [1978]), akik sugárzó izotóppal jelzett ligandumként (megkötött anyagként) 3H-spiroperidolt (spiperont) használtak. Az alkalmazott eljárás a következő: 35 250-300 g testsúlyú, Spragus-Dawley CD hím patkányok (Charles River Laboratories, Wilmington, MA) fejét levágjuk, és agyukat egy jéghideg üveglapon azonnal felboncoljuk, eltávolítjuk a corpus atriatumot (súlya körülbelül 100 mg/agy). 4Û A szövetet negyvenszeres (1 gramm szövetre 40 ml) 7,7-es pH-jú, jéghideg 50 millimólos TRIS.HCL [trisz-(hidroximetil)-amino-metán-hidroklorid]oldattal homogenizáljuk. A homogenizátumot 50,000 g gyorsulással (20,000 ford/perc) 10 percig 40 centrifugáljuk, majd az üledéket ugyanilyen menynyiségü friss pufferoldattal felszuszpendálva újra centrifugáljuk. Az így kapott üledéket óvatosan felszuszpendáljuk kilencvenszeres térfogatú, hideg, frissen (1 hétnél nem régebben) készített, 7,6-os 50 pH-jú 50 millimólos TRIS-pufferoldatban, amely a TRIS-en kívül a következő további összetevőket tartalmazza: 120 millimól nátrium-klorid, (7,014 g/liter), 5 millimól kálium-klorid (0,3728 g/liter), a millimól kálcium-klorid (0,222 g/liter), 1 millimól 55 magnézium-klorid (0,204 g/liter), 0,1% aszkorbinsav (1 mg/ml) és 10 pmól pargilin. (100 ml pufferoldatra 100 pl pargilin-törzsoldatot használunk; a törzsoldat: 15 mg pargilin, 10 ml kétszer desztillált víz). Az aszkorbinsav-oldatot és a pargilin-oldatot 60 minden nap frissen kell készíteni. A szövet-szuszpenziót a szöveti monoaminoxidáz enzim inaktiválásának biztosítása céljából 5 percre 37 “C hőmérsékletű vízfürdőbe tesszük, majd a felhasználásig bejegelve tároljuk. Az inkubációs elegy összetétele 65 a következő 0,02 ml inhibitor-oldat, 1,0 ml szövet-7
