189127. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az arginin-vazopresszin antidiuretikus és/vagy vazopresszor hatását antagonizáló új oktapeptidszármazékok előállítására

1

.189 127

2

ecetsav-oldattal eluáljuk. Az így kapott termékek tisztaságát és azonosságát három különféle futtató eleggyel végzett vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálattal ellenőriztük [Kruszynski és munkatársai, J. Med. Chem., 23 (1980), 364], továbbá a fent leírt módon végzett aminosav-analízissel.

Boc-Phe- Val-Asn-Cys( Bzl)-Pro-D-Arg( Tos)-Gly (gyantához kötött)

1.562 g (1,0 mmól) glicint tartalmazó, gyantához kötött Boc-Gly-ből kiindulva, hat egymást követő ciklusban (védőcsoport-lehasítás, semlegesítés, kapcsolás) kapjuk a védett, gyantához kötött, A- jelü cím szerinti heptapeptidet (súlya: 2,522 g, 1,0 mmól).

Gyantához kötött

Boc-Phe-Asn-Cys( Bzl)-Pro-D-Arg(Tos)-Gly

1.562 g (1,0 mmól) gyantához kötött Boc-Glyből kiindulva, a szilárd fázisú szintézis módszerével kapjuk a védett, gyantához kötött, B-jelű cím szerinti heptapeptidet (súlya: 2,522 g, 1,0 mmól).

Gyantához kötött

Boc-Tyr( Me)-Phe- Val-Asn-Cys( Bzl)-Pro-DArg(Tos)-Gly

1,261 g (0,5 mmól) gyantához kötött, A-jelű heptapeptidet a szilárd fázisú szintézis egy ciklusában, karboxil-komponensként Boc-Tyr(Me)-t használva állítjuk elő a megfelelő, gyantához kötött, C-jelű cím szerinti tercier-butoxi-karbonil-oktapeptidet (súlya: 1,35 g, 0,5 mmól).

Gyantához kötött

Boc-Tyr( Et )-Phe- Val-Asn-Cys( Bzl )-Pro-D-Arg(Tos)-Gly

1,261 g (0,5 mmól), A-jelű heptapeptidből kiindulva, és karboxil-komponensként Boc-Tyr-(Et)-et használva a szilárd fázisú szintézis egy ciklusával állítjuk elő a gyantához kötött, D-jelű cím szerinti tercier-butoxi-karbonil-oktapeptidet (súlya:

1,357 g, 0,5 mmól).

Gyantához kötött

Boc- Tyr( Me ) -Phe- Val-Asn-Cys ( Bzl ) -Pro-Arg(Tos)-Gly

1,261 g (0,5 mmól) gyantához kötött, B-jelű heptapeptidet egy ciklusban [védőcsoport-lehasítás, semlegesítés, majd kapcsolás Boc-Tyr(Me)-vel] alakítjuk át a védett, gyantához kötött, E-jelü cím szerinti oktapeptiddé (súlya: 1,35 g, 0,5 mmól).

Gyantához kötött

ß-( S-benzil-merkapto)-$#-ciklopenta-metilénpropionil-Tyr( Et)-Phe- Val-Asn-Cys( Bzl)-Pro- Arg-(Tos)-Gly

1,261 g (0,5 mmól) gyantához kötött, B-jelű heptapeptidet a szilárd fázisú szintézis két ciklusában, karboxil-komponensként az első ciklusban Boc- Tyr(Et)-et, a második ciklusban pedig ß-(S-benzilmerkapto)-ß,ß-ciklopentametilön-propionsav-pnitro-fenil-észtert használva alakítjuk át és gyantához kötött cím szerinti acil-oktapep.iddé (súlya: 1,43 g, 0,5 mmól).

Boc-Tyr( Me)~Phe- Val-Asn-Cys( Bzl)-Pro-DArg(Tos)-Gly-NH2

1,35 g (0,5 mmól) védett, gyantához kötött, C- jelű oktapeptidet ammonolizálunk, majd a terméket meleg dimetil-formamiddal kivonatoljuk. A terméket az oldatból víz hozzáadásával csapjuk ki. A nyersterméket dimetil-formamid, etanol és dietil-éter elegyével újra kicsapjuk, ily módon fehérszínű, porszerű anyag formájában 0,581 g (hozam a gyanta kiindulási glicin-tartalmára számítva: 88,52%) tiszta, cím szerinti terméket kapunk, op.: 239-240°C;

[u]d = — 14,9° (c= 1, dimetil-formamid);

Rf(E) = 0,54, R,(D) = 0,73.

Aminosav-analízis: Tyr: 1,02; Phe: 0,98; Val: 1,02; Asp: 1,00; Cys(Bzl): 0,98; Pro: 1,01; Arg: 0,97; Gly: 1,00; NH3: 2,1.

Boc-Tyr(Et)-Phe- Val-Asn-Cys( Bzl)-Pro-DArg( Tos)-Gly-NH2

1,357 g (0,5 mmól) védett, gyantához kötött, D- jelü oktapeptidet a fent leírt módon kezelve 0,535 g (hozam a kiindulási gyanta glicin-tartalmára számítva: 80,69%) cím szerinti Boc-oktapeptid-amidot kapunk, op.: 211-213 °C;

[ct]p = - 16,4° (c = 1, dimetil-formamid);

R,(E) = 0,61; R,(D) = 0,83.

Aminosav-analízis: Tyr: 0,99; Phe: 1,00; Val: 1,01; Asp: 1,02; Cys(Bzl): 0,98; Pro: 1,00; Arg: 0.98; Gly 1,00; NH3: 2,13.

Boc-Tyr ( Me) - Phe- Val-Asn Cys ( Bzl)-Pro- Arg( Tos)-Gly-NH2

1,35 g (0,5 mmól) gyantához kötött, védett E- jelű oktapeptidet a fent leírt módon kezelve 0,597 g (hozam a gyanta kiindulási glicin-tartalmára számítva: 90,96%) megfelelő cím szerinti Boc-oktapeptid-amidot kapunk, op.: 216-217 °C (bomlik);

[a]p = —34,82° (c = 1, dimetil-formamid);

R,<E) = 0,54, R,(D) = 0,73.

Aminosav-analízis: Tyr: 0,99; Phe: 1,00; Val: 1,02; Asp: 1,01; Cys(Bzl): 0,98; Pro: 1,01; Arg: 0,98; Gly: 1,00; NH3: 2,09.

\

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

9