188983. lajstromszámú szabadalom • Eljárás formamidil-béta laktámok előállítására

188 983

b/ 6 |3-/2,22-triklór-etoxi-karbonilamino/~6 a -amino -penicillánsav-benzilészter előállítása.

5,15 g 19,16 mmól/ 6 /3—/2,2,2—triklór -etoxi - -karbonilamino/-6 a-/mctiltio/-penicillánsav-benzilésztert feloldunk 20 ml vízmentes dimetil-formamidban g és az oldatot keverés közben -40°C-ra hütjük. Ehhez az oldathoz 3,15 g /l egyenértéksúlynyi/ merkuri-acetátot, majd 0,17 g /1 egyenértéksúlynyi/ vízmentes ammóniát adunk 6 ml vízmentes dimetil-formamidban oldva. A kapott clegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni egy ^ óra leforgása alatt, majd 100 ml etil —acetát és 50 ml víz elegyébe öntjük. A szerves fázist elválasztjuk és négyszer^ mossuk vízzel, majd tömény konyhasóoldattal és nátrium-szulfáttal megszárítjuk. Bepárlás után 4,44 g 6 a - -amino penicillint kapunk halványsárga hab formájában. ^ g Kitermelés 89%. Ezt további tisztítás nélkül használjuk fel.

RfO,65 10% metanol tartalmú kfóroformban.

NMR spektrum; fi /CDC13/ 1.40 és 1.55 /6H, 2s,/Cll3/ ; l2Cj, 2.65 fill, széles. l>20 lecserélés. Nll2/, 4.55 /1H, s, -n

3- H/, 4.80 /2I1, s, CljCCIijO/, 5.25 /211,'s, fenil Cll20/,

5.45 /III, s, 5 -Hl, 6.45 /Hl, széles I)20 lecserélés, NII/,

7.45 /5H, s, fcnilek/. __

c/ 6 ß~\2,2/2 trjídór -etoxi- karbonilamino/ 6 a fornvámído -pcniciííánsay -bcnzilészter előállítása. 25

; % 4,40 g lè jtô nmiói/ 6 ß 122,2 »riklör - etoxi - -karbonifuiiiího/ 6 Ói ámínő penicilíánsav bénzilésztert O^C-op keverés közben 30 nit víztpcníes dikiór metánnal elcp/tiunk. X/. oÍ3Ítl>oz 6,95 ml /ÍÖ egychértéksulynyi/ vízmentes piridint cs 3,5 j ml /10 egyenértéksúlynyi/ ecet- 30 sav buiigyasaV Síihidr idet adunk. A kapott halványsárga oldatot 1 óra leforgása alatt szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, majd a megadott sorrendben 0,5 mólos sósavöídaftal /2xl00 ml/, vízzel, telített nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, vízzel és tömény konyhasóoldattal 35 "mossuk, majd végül náirium-s/uliáttal szárítjuk, bepárlás ' után nyers terméket kapunk, melyet 350 g sz.iíikagélcn kromatográfiásan tisztítunk. Az cluákíst 2% metanol-tartalmú kloroformmal végezve 3,03 g kívánt 6 «-formamido -penicillint kapunk. Kitermelés 65%.. Az anyag éterrel 40 triturálva kristályosítható. Olvadáspont 132 -134°C.

Rf =

0,45 10% metanol - tartalmú kloroformban.

ÍR spektrum: 7 max /KBr/ 3340, 3160, 1700, 1745 és 1670 cm'1;

NMR spektrum: fi /CDC[3/ 1.37 és 1.53/öli, 2s,/CH3/2C/. 45 452 /Hl, s, 3 II/, 4.72 1211, s, C13CCH20/,5.17 |21l, s, fenil aljú/, 5.66/lll.s, 5 II/, 6.75 /III, szeles, l>20 lecserélés, Nil/, 7.34 /5II, s, fcnilek/,7.70/111, széles, D20 Iccse télés, Nil/, 8.19 /111, s, N1 IC 110/

Elemanalízis a C, 9112o^l3^3képlet alapján: 50

számított C 43,5%', H 3,8%, N 8.0%. talált: C 43,6% II 4,1% N 7,85%.

d/ 6 ß amino 6 a formamido penicilíánsav -benzilészter előállítása. S5

1,44 g /2,75 mmól/ ö ß 12,2,2 -ttriklór -etoxi-karbonilamino/ 6 cv formamido penicilíánsav -bcnzilés/.lert feloldunk 45 ml tetraliidrofurán és 9 ml 1 mólos kálium dihidrogén foszfát elegyében. A kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten keverjük és 2 g, sósavas, majd vizes mosással frissen aktíváit cink port adunk hozzá. Az elegy pli ját 2 mólos sósavoldat hozzáadásával 4,5 értéken tartjuk. A reakció lefolyását vékonyrétegkromatográfiával követjük és kb. 4 óra múlva nem találunk kündulási anyagot. Ezután a cinket szűréssel eltávolítjuk es a szűr- gg

letet etil—acetát és víz között megosztjuk. A szerves fázist elválasztjuk és vízzel, majd tömény konyhasóoldattal mossuk cs nátrium -szulfáttal szárítjuk. Bepárlás után 0,66 g nyers terméket kapunk, halványsárga gumi formájában. Kitermelés 84%.

Rr=0,30 10% metanol-tartalmú kloroformban.

Ez az anyag ebben a formában nem stabil. Átalakíthatjuk azonban kristályos toluol-p-szulfonát-sóvá úgy, hogy etil-acetátos oldatát elkeverjük sztöichiomctrikus menynyiségű toluol -p-szulfonsavval, etil-acetátos szuszpenzió formájában. Ily módon 0,44 g/1,25 mmól/ nem tiszta szabad bázisból 0,44 g 6 ß amino - származékot kapunk toluol-p -szulfonát formájában. Kitermelés 67%>. Ezt a sót fel kell oldani d* matanolban vagy d6 -dimctil-szulfoxidban az NMR spektrum meghatározása céljából, amikor is elég könnyen bomlás következik be. Ha azonban ezt a sót cxs/ikátorban állni hagyjuk 1 hétig, a szabad bázis megfelelő tiszta formában kinyerhető.

Rf mint fent.

NMR spektrum:6/CDCl3/ 1.45 és 1.70 /6il, 2s,/CII3/2'C|;

2.60 /2ÍI, széles, 1)2Ó lecserélés, NH2/; 4.60 /Ül, s, 3- II/; 5.30 12H, s, fenil C il20/; 5.70 /Ki, s, 5 -lí/, 7.05 /III, széles, I)20 lecserélés, NHCIIO/, 7.50 /5H, s, feniíck/,8.35 /III, s, NlltTlÖ/.

32. pekla

6 a fpnuamido 6 ß || 1) 2 /4 hidroxifenil/ 2 (3 [ 4 hidroxi 2 /fendaiuino/ pirimidin 3 il] ureido)üívfamido j| penicilíánsav nátrinmsójának előállítása.

0,20 g 6 ß [ D--2 -amino-2-/4 hidroxifcnil/-acctamido] 6 a formamido pcnicillánsavat 20 ml vízben s/.uszpcndáhmk es a pl!-t 7,5-rc állítjuk be tricíilamlh hozzáadásával. A kapott oldatot 0-5°C-ra hűtjük,keverjük és részletekben 0,114 g 4 hidroxi-2 /fcnilamino/ pirimidin 5 íl aminokarbonil kloridot adunk hozzá és közben a pli-l trietil amin hozzáadásával 7 és 7,5 közötti értéken tartjuk, A rpakcióciegyet fél óráig keverjük

0- 5°C-on majd csökkentett nyomáson betöményitjúk. A vizes maradékot kétszer 25 ml etil acctáttal mossuk, majd dictil éterrel mossuk, és 5 mólos sósavoldattal 25 ml etil acetát jelenlétében 2 pll-ra savanyítjuk. A kapott csapadékot szűréssel összegyűjtjük, vízzel, ctíl-acetáttal és dictil éterrel mossuk, majd 10 ml vízben szuszpcndáljuk, amely 0,018 g nátrium- hidrogén-karbonátot tartalmaz. Ezt a szuszpcnziöt leszűrjük és a szűrletet liofilizáljuk. így 0,15 g cím szerinti vegyületet kapunk.

IR spektrum: y max /K Br/ 3700-3200,1770,1660,1610 1593, 1540, 1518, 1499, 1444, 1390, 1350 sh, 1265 sk és 1217 cm -l ;

NMR spektrum: 5 [ I)20/ /CD3/2SO/CD3OD; 2:1:1 :] 0.95 és 1.29 /6H, 2s, C/CH3/2/, 4.05 /111,s, 3-H/, 5.26 /1H, s, CI1CO/, 5.50, /III, s, 5 11/, 6.64 6.90 és 7.00-7.50 /9H, 2m, fenil es C61I4/, 7.90 /1 H,s, pirimidin-H/, /302 /III, s. C1IO/.

MIC //ug/ml/ P. mirabilis 889 5.0

33. pokla

6 ß { 2 \ /4 etil 2,3 Jioxopiperazin t il/ karbonilamino] 2 13,4 dihidroxi fenil/ aeetamido ) - 6 a formamido penicilhinsai nátrinmsójának előállítása.

Mitibishu WH-105 -n megkötött szubtilizin alkaláz enzimet vízzel alaposan kimosva eltávolítjuk a felül elhelyezkedő puffer nyomait. A nedves gyantán

27