188861. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új lipofil muranil- peptidek előállítására
1 188 861 2 majd nedvesség kizárása mellett 1,82 ml (6 mmól) palmitinsav-kloridot adunk hozzá, 5 ml metilénkloridban oldva, ennek során a hőmérsékletet 15 és 20 °C között tartjuk. Szobahőmérsékleten való 20 órás állás után a reakcióelegyet 2 ml metanollal elegyítjük és fél órás keverés után szárazra pároljuk. A maradékot kloroformmal felvesszük, a piridint és a DNAP-ot hideg, In hidrogén - klorid - oldattal végzett extrahálással, a részben még jelenlevő palmitinsavat pedig híg kálium - hidrogén - karbonát - oldattal végzett óvatos kezeléssel eltávolítjuk. A kloroformos oldatot nátrium-szulfáttal végzett szárítás után bepároljuk, két térfogatrész dimetil - formamiddal elegyítjük, majd a benzilcsoportokat 30 óra alatt palládiumozott szén (10 %os) katalizátor jelenlétében hidrogénezve lehasítjuk. A katalizátort leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot petrolétencl végzett többszörös digerálás után kétszer desztillált vízzel felvesszük (1-2 %-os oldat) és szokásos módon először pufferolt nátrium - klorid - oldattal szemben pH = 7-nél, majd vízzel szemben dializáljuk, és Millipore-szűrőn (0,45 p) végzett szűrés után liofilizáljuk. A kapott N - acetil - muramii - L - alanil - D - izoglutamil - L - alanil - 2 - ( 1 ’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid - nátriumsó azonos a 13. példa szerint előállított vegyülettel. 19. példa • 0,693 g (1 mmól) 1,2 - dipalmitoil - sn - glicero - 3 - foszforsav - dinátriumsóból, 1,332 g (2 mmól) N - acetil - la - O - benzil - 4,6 - O - izopropilidén- muramii - L - alanil - D - izoglutaminil - L - alanil- etanol - amidből és 0,908 g (3 mmól) 2,4,6 - triizopropil - benzol - szulfokloridból álló keveréket - amelynek minden komponense nagymértékben szárított - , 25 ml vízmentes piridinben oldunk, és a reakciókeveréket nedvesség kizárása és keverés közben rövid ideig 35 — 40 °C-ra melegítjük. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten való 5 órás állás után 5 ml vízzel elegyítjük, majd további fél órás állás után szárazra pároljuk. Feldolgozás és a védőcsoportoknak a 17. példa szciinti eltávolítása után N - acetil - muramii - L - alanil - D - izoglutaminil - L - alanil - 2 - ( 1 ’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero- 3’ - foszforil) - etil - amid - nátriumsót kapunk, amely azonos a 13. példa szerint előállított vegyülettel. 20. példa 0,89 g (1 mmól) D - izoglutaminil - L - alanin - 2 - (l’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid és 3,5 mmól N - etil - morfolin 25 ml, 65 : 25 : 4 arányú kloroform - metanol - víz oldószereleggyel készített oldatához 1,5 mmól N - acetil - muramii - L - alanin - N - hidroxi - szukcinimid - észter 5 ml dimetil-acetamiddal készített oldatát csepegtetjük. Szobahőmérsékleten végzett 8 órás keverés után a reakció befejeződik. A reakcióelegyet 130 ml vízzel elegyítjük. A kloroformot és a metanol egy részét a csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A vizes oldatot teflonból készített Miilipore-szürő (pórusnagyság 5 gm) szűrjük. A szűrletet keverés közben egy Amicon ulíraszűrő cellában diaszürési eljárás keretében Amicon YM 10 membránon keresztül először vízzel, (400 ml) majd 0,1 mólos nátrium - foszfát - puffer 0,1 mólos nátrium - klorid - oldattal, pH = 7 (200 ml), és végül vízzel (850 ml) szemben dializáljuk. A belső dializátumot egy Millipore-szűrőn (pórusnagyság 0,45 gm) szűrjük és fagyasztva szárítjuk, így N - acetil - muramii - L - alanil - D - izoglutaminil - L - aíanin - 2 - (1 ’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid - nátriumsó - hidrátot kapunk, amely fizikai állandóit tekintve meg - egye - zik a 13. példa szerint előállított vegyületével. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletü muramil-peptidek - a képletben X jelentése karbonilcsoport, R, jelentése rövidszénláncú alkilcsoport vagy fenilcsoport, R3 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, Rj jelentése rövidszénláncú alkilcsoport, Aj jelentése aminocsoport és A2 (II) általános képletű csoportot képvisel, ahol T jelentése HN = vagy — O—, Y jelentése rövidszénláncú alkiléncsoport vagy (lile) általános képletü csoport, amelyben Y, és Y2 egymástól függetlenül rövidszénláncú alkiléncsoportot képvisel, mimellett Y2 és Y2 együtt több mint 2 szénatomot tartalmaz, és Z jelentése olyan 1,2 - dihidroxi - etil - vagy 2 - hidroxi - etil - csoport, amelyekben legalább az egyik hidroxilcsoport egy, adott esetben egyszeresen vagy kétszeresen telítetlen, 12-22 szénatomos alifás karbonsavval észterezett vagy egy, adott esetben egyszeresen vagy kétszeresen telítetlen, 10-22 szénatomos alifás alkohollal éterezett — és ezek fém- vagy ammóniumsói előállítására, azzal jellemezve, hogy a) valamely (VII) általános képletű vegyületet — , ahol X, Rí és R3 jelentése a fenti és Rg, R10 és Ru hidrogénatomot vagy egy könnyen lehasítható vcdÖcsoportot jelent - vagy ennek reakcióképes karbonsavszármazékát egy (VIII) általános képletíí vegyülettel - ahol Rs, A, és A2 jelentése a fenti - vagy ennek származékával kondenzálunk és a jelenlevő védőcsoporto(ka)t lehasítjuk, vagy b) valamely (IX) általános képletű vegyületet — ahol X, R,, R3 és R5 jelentése a fenti és R9, R,0 és Rn hidrogénatomot vagy könnyen lehasítható védőcsoportot jelent — vagy reakcióképes karbonsavszármazékát egy (X) általános képletű vegyülettel - ahol A, és A2 jelentése a fenti — kondenzálunk és jelenlevő védőcsoporto(ka)t lehasítjuk, vagy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 17
