188861. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új lipofil muranil- peptidek előállítására

188 86!

2

1

nil - 2 - (1\2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid,

N - acetil - muramii - L - pirolil - D - izoglutaminil - L - alanil - 2 - (1\2’ - dipalmitoil - sn - glicero- 3’ - foszforil) - etil - amid,

N - benzoil - normuramil - L - a - aminobutiril- D - izoglutaminil - 2 - (l’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid,

N - benzoil - normuramil - L - a - aminobutiril- D - izoglutaminil - L - alanil - 2 - (l’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid,

N - acetil - muramii - L - treonil - D - izoglutaminil - 2 - (1\2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid,

N - acetil - muramii - L - treonil - D - izoglutaminil - L - alanil - 2 - (V,T - dipalmitoil - sn - glicero- 3’ - foszforil) - etil - amid.

13. példa

1,5 mmól N - acetil - muramii - L - alanil - D - izoglutaminil - L - alanin - N - hidroxi - szukcinimid

- észter 5 ml dimetil-acetamiddal készített oldatát szobahőmérsékleten cseppenként adjuk 0,692 g (I mmól) 2 - (F,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid és 3,5 mmól N-etil-morfolin 25 ml, 65 : 25 : 4 arányú, kloroform - metanol - víz- eleggyel készített oldatához. Szobahőmérsékleten (körülbelül 22 °C-on) 8 órán keresztül végzett keverés után a reakció befejeződött, ekkor a reakcióelegyhez 130 ml vizet adunk.

A szerves oldószerek csökkentett nyomáson végzett eltávolítása után a kapott vizes oldatot, amely még kevés metanolt is tartalmazhat, teflonból készült Millipore-szűrőn (5 pm) átszűrjük. A kevert szűrletet Amicon ultraszűrő cellában Amicon YM 10 membránon (gyártó: Amico Corporation, Dánvers, Massachusetts, USA, a membrán poliszacharid, amelynek kizárási határa 10 000 Dalton molekulasúlynál van) keresztül dializáljuk, egymás után 400 ml vízzel, 200 ml vizes 0,1 mólos nátrium - foszfát - puffer - 0,1 mólos nátrium - klorid - oldattal (pH = 7) és 800 ml vízzel szemben, dializáló szűrés keretében. A belső dializátumot 0,45 pm-os pórusnagyságú Millipore-szűrőn szűrjük, majd a terméket fagyasztva szárítjuk. N - acetil - muramii

- L - alanil - D - izoglutaminil - L - alanin - 2 - (l’,2’

- dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid. 3 H20-t kapunk, amely főleg vagy teljes egészében nátriumsója alakjában van jelen.

A termék elemanalízisének adatai (az értékeket 100 % nátriumsóra vonatkoztatva, amely egy molekula sóra számítva 3 molekula vizet tartalmaz):

C59H114N6022P Na (1*315,55)

C% H% számított: 53,59 8,75

talált: 53,89 8,63

N%

P%

Na%

számított:

6,40

2,36

1,75

talált:

6,40

2,22

1,58

Rf=0,45 (acetonitril•víz =3 :

1)

Aminosavelemzés :

A glutaminsavhoz (=1) viszonyítva az alanin = 1,8 A norleucinhoz ( = 1 ) mint belső standardhoz viszonyítva glutaminsav = 0,9 értéket kapunk. IR(KBr): 3400, 2920, 2850, 1740 (C = 0), 1660 (C = 0), 1545 (C = 0), 1465,1455,1380,1240 (P = 0), 1165, 1100, 1065, 960, 720 cm'1,

14. példa

A 13. példában leírtakkal analóg módon állíthatjuk elő a következő vegyületeket is:

a) N - Acetil - muramii - L - alanin - D - izoglutamin - 2 - (l’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid - nátriumsó ( • 2,49 H20)

C56Hl03N5O18P Na • 2,49 H20 (1233,3)

C%

H%

N %

számított:

54,49

8,35

5,68 .

talált:

54,63

8,25

5,87

P%

Na%

h2o%

számított:

2,51

1,86

3,63

talált:

2,40

1,59

3,63

b) N - Acetil - demetil - muramii - L - alanil - D - izoglutamin - 2 - (l’,2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid - nátriumsó ( • 2,8 H20)

C55H101N5O18P Na ■ 2,8 H20 (1224,9)

C%

H%

N%

számított:

53,88

8,25

5,71

talált:

53,67

8,16

5,93

P%

Na%

h2o%

számított:

2,53

1,88

4,11

talált:

2,40

1,71

4,11

c) N - Acetil- murami! - L

- alanil - D - izoglutamiiül - y - oxi - metil - karbonil - 2 - (1\2’ - dipalmitoil - sn - glicero - 3’ - foszforil) - etil - amid - nátriumsó ( • 3,1 H20)

C58H106N5O20P Na • 3,1 H20 (1303.28)

C%

H%

N%

számított:

53,40

8,13

5,37

talált:

53*,21

8,09

5,18

P%

Na%

H20%

számított:

2,38

1,76

4,28

talált:

2,21

1,58

4,28

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

14