188847. lajstromszámú szabadalom • Eljárás liofilizett abszorbeált kombinált vakcinák előállítására
188 847 Fehérje mennyisége (mg/ml) Dextrán % Ülepedés (mm) Liofilezés előtt Lioíilezés után 15 perc 30 perc 5 perc 30 perc 1,6 1 3 15 100 homogén 3,2 l 3 14 100 homogén 6,4 1 3 14 100 homogén 13,0 1 2" 5 45 100 26,0 1 2 6 25 45 50,0 1 1 4 10 23 0 2 4 14 28 72 0,2 2 3 14 30 65 0,4 2 3 14 30 66 0,8 2 3 13 20 60 1,6 2 3 14 20 55 3,2 2 3 15 20 40 6,4 2 4 16 10 20 0 4 3 14 15 50 0,2 4 3 15 15 45 0,4 4 3 14 10 45 0,8 4 3 14 10 40 1,6 4 3 14 8 30 3,2 4 3 14 6 16 6,4 4 3 13 6 14 A fentiek értelmében az antigének oldatához 0,5- 10 tömeg % vivőanyagot, továbbá tartósítószerként 0,01 ' tömeg % tiomerzált adunk. Az így készített elegyet ampullákba adagoljuk és liofilezzük oly módon, hogy az anyag hőmérséklete a kezdeti - 30 °C-oí, előnyösen a - 35 °C-ot ne haladja meg, A liofilezés második szakaszában 3(1-35 °C-on tartva az anyag hőmérsékletét, biztosítjuk a kívánt 3 % alatti nedvességtartalmat. A liofilezett vakcinái felhasználáskor 6,8 és 7 közötti pH-jú foszfáttal pufferolt fiziológiás sóoldattal a felhasználási koncentrációra hígítva alkalmazhatjuk. A találmány szerinti eljárás előnye, hogy az így előállított liofilezett adszorbeált kombinált vakcinák lényegesen hosszabb ideig megtartják hatékonyságukat, mint a jelenleg forgalomban levő vakcinák. A találmány szerinti eljárással előállított Di-Te-Pe vakcina például kísérleteink tanúsága szerint 56 °C-on legalább 4 hétig, 37 ”C-on pedig legalább 1 évig tárolható hatékonyságcsökkenés nélkül. A találmány szerinti eljárást a következő példákkal szemléltetjük anélkül, hogy oltalmi körünket az 3Q itt leírtakra kívánnánk korlátozni. I. példa Fermentorban tenyésztett Bordetella pertussis szuszpenziókat savas kicsapással koncentrálunk. 35 A savas kicsapást l n sósavval 4 körüli pH-értéknél végezzük, majd a szuszpenziókal 4 °C-on 48 óra hosszat ülepítjük. A felülúszó dekantálás--' után az üledéket 7,2 pH-ra pufferolt izotóniás nátriumklorid-oldattal reszuszpendáljuk úgy, hogy a szuszpenzió opacitása 300 NOE/m! (nemzetközi opacitási egység) legyen. A szuszpenziókal ezután 0,02 s% tiomerzállal és 56 °C-on végzett 30 percig tarló hőkezeléssel inaktiváljuk, majd 4 °C-on tároljuk. 45 2. példa Vakcinákat készítünk, amelyeknek a következő rz összetétele (a mennyiségek 10 adagra vonatkoznak 3 ml össztérfogatban): 1 2 3 4 5 6 7 Diftéria-toxoid (Lf)* 250 250 250 250 300 300 300 Pertusszisz sejtszuszpenzió (NOÉ)* 150 150 150 150 150 150 150 Tetanusz-toxoid (KE)* 50 50 100 100 100 100 100 Salmonella typhi (sejt)-5- 109 —Al-foszfát-gél (mg) 30 30 30 30 30 30 30 Tiomerzál (s%) 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 4
