188752. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kolecisztokinin C-terminális hexapeptid előállítására
3 187 752 4 or-ecetsav, 4 ml víz, 0,4 ml tioglikolsav és 0,5 g ditiotreitol elegyében okiunk. A reakcióelegyet argon atmoszférában keverjük. Teljes oldódás után az elegye) 40 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd a telrapeptidel 300 ml éterrel kicsapjuk, szűrjük, éterrel g és hexánnal többször mossuk. Végül a terméket szárítjuk. 10,2 g L-triptofil-L-metionil-L-aszpartil-L- fenilalanin-trifluor-acetálot kapunk; R^ =0,4. 10,2 g (15 minői) L-lriplofil-mctionil-L.-nszpartil-L- fcnilalanin-lrifluor-acctátot és 9,2 g (17 mmót) tere- jg butil-oxi-karbonil-L-metionil-glicin-pentaklór-fenilésztert 150 ml dimetil-formamidban oldunk, és 2,1 ml (15 mmól) trietil-amint adunk hozzá. A reakcióelegyet 48 óra elteltével 30 ml végtérfogatra bepároljuk, és 50 ml éter és 100 ml 5 %-os vizes kálium-hidrogén- 15 szulfát oldat keverékébe öntjük. A kivált amorf anyagot szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. 9,7 g tcrcbutil-oxi-karboml-L-melionil-glicil-L-triplolil-L- metionil-L-aszpartil-L-fenilalanin-amidot kapunk ; Rr‘ = 0,45. 20 9,7 g, az előzőek szerint előállított védett hexapeptidet 0'C-on. argon atmoszférában, keverés közben 36 ml Irilluor-ccctsav, 4 ml víz, 0,5 ml tioglikolsav és 250 mg ditiotreitol elegyében oldunk. Oldódás után 30 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk az elegyet, 25 majd a terméket éterrel kicsapjuk. A csapadékot szűrjük és éterrel többször mossuk. 9,5 g (95 %) L-metionil-glicil-L-triplofil-L-metionil-L-aszpartil-L-fcnilalanin-triduor-acetátot kapunk; R? = 0,60. A fentiek szerint kapott sóból kívánt cselben vizes 30 közegben, ekvivalens mennyiségű trictil-aminnal végzett kezeléssel felszabadítjuk az L-mctionil-glicil-L- triptofil-L-metionil-L-aszpartil-L-fenilalanint ; Rr =0,60. A példában ismerteteti eljárás valamennyi lépésé- 35 ben vékonyrélegkromatográfiásan egységes, tiszta termékeket kapunk. Szabadalmi igénypontok 1. ' Ijárás az (I) képlctü L-M ;t-Gly-L-Trp-L-Met-L-Asp-L-Phe-NH2 (I) hexapci tid előállítására szabad bázis vagy Irilluorccctsav-s só formájában, azzal jellemezve, hogy 1-aszpart '-L-fcnilalanin-amidot vizes szerves oldószeres közegben, 7,5 és 7,8 közötti pH-értéken terc-butiloxi-karbanil-L-triptofil-L-metionil-aziddal acileziink, a képződött tcrc-butil-oxi-karbonil-L-triptofil-L- metionil-L-aszpartil-L-fenilalanin-amidot elkülönítjük, majd trifluor-ecetsav, víz, tioglikolsav és ditiotreitol 50 : 30 : 10 ; 10 cs 95 : 3 : I : I közötti súlyarányú elegyében oldva közömbös gáz-almoszlrérában állni hagyjuk, a képződött L-triptofil-L-melionil-L-aszpartil-L-fenilalanin-amid-triíluor-acetátot kicsapjuk, szerves oldószeres közegben, bázis jelenlétében tercbutil-oxi-karbonil-L-metionil-glicin-pcntaklór-fcnilésztcrrel rcagállatjuk. a kapott tcrc-bulil-oxi-karbonil-L-mctionil-glicil-L-triplofil-L- mctionil-L-aszpartil-L-fcnilalanin-amidot elkülönítjük, trifluor-ecetsav. víz. tioglikolsav és ditiotreitol 50:30:10:10 és 95 : 3 : 1 : I közötti súlyarányú elegyében oldva közömbös gáz atmoszférában állni hagyjuk, végül a reakcióelcgybő! triduor-ecetsavas só formájában elkülönítjük az. (I) képletű vcgyülctct. cs kívánt cselben a kapott sóból szerves bázissal felszabadítjuk az (1) képlctü terméket. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a lerc-butil-oxi-karbonil védöcsoporlok eltávolítására 85 : 10 : 2 : 3 súlyarányú triduor-ccclsav-víztioglikolsav-dilriolreitol elegyet használunk. Rajz nélkül 3
