188709. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cedfalosporin-metilészterek enzimes dezészterezésére
1 188 709 2 A fenti táptalajok 50 — 50 ml-ét 250 ml térfogatú lombikokban autoklávozzuk. A táptalaj lehűlése után beoltjuk a tenyészeteket az S. capillispira vegetatív tenyészetével, és 3 napon át 30 °C hőmérsékleten rázógépen folytatjuk a tenyésztést. Ezután 4 —4 ml-t mindegyik tenyészetből kiveszünk, és l ml szubsztrát-oldattal keverünk. A szubsztrát-oldatot úgy állítjuk elő, hogy 5 ml/mg-os oldatot készítünk 0,5 mólos, 7 pH-jú kálium-dihidrogén-foszfáttal, és metil - 7 - amino - 3 - metil - 3 - cefém - 4 - karboxiláttal. A reakcióelegyeket 16 órán át 30 °C hőmérsékleten rázatjuk, majd az 1. példában megadottak szerint eljárva papír-kromatográfiás analízist végzünk. Úgy találtuk, hogy a mikroorganizmus az összes fenti táptalajon jól nő. A kromatográfiás analízis szerint az észter-hasítást katalizáló enzim a H. táptalajt kivéve, az összes táptalajon termelődik. A H. táptalaj több nehézfémsót tartalmaz, és igen magas koncentrációban tartalmaz diammónium - hidrogén-foszfátot. 4. példa A 3. példában megadottakat ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy több, más kémiailag meghatározott összetételű táptalajt vizsgálunk. Az alábbi táptalajokat készítjük el: A diammónium-hidrogén-foszfát 10 g nátrium-szulfát 0,5 g dikálium-hidrogén-szulfát 5 g magnézium-szulfát ■ 7 H20 0,4 g éiesztőkivonat 1 g glükóz 10 g víz 1000 ml-re kiegészítve. A táptalaj pH-ját foszforsavval 7,0-ra állítjuk be. B kálium-dihidrogén-foszfát 10 g nátrium-szulfát 0,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 5 g magnézium-szulfát • 7 H20 0,4 g élesztőkivonat 1 g glükóz 10 g víz 1000 ml-re kiegészítve. A táptalaj pH-ját kálium-hidroxiddal 7,0-ra állítjuk be. C diammónium-hidrogén-foszfát 10 g nátrium-szulfát 0,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 5 g magnézium-szulfát • 7 H20 0,4 g vas-szulfát ■ 7 H20 0,02 g mangán-szulfát • 4 H20 0,02 g nátrium-klorid 0,02 g élesztőkivonat 1 g glükóz 10 g víz 1000 ml-re kiegészítve. A táptalaj pH-ját foszforsavval 7,0-ra állítjuk be. D diammónium-hidrogén-foszfát 10 g nátrium-szulfát 0,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 5 g magnézium-szulfát • 7 H20 0,4 g réz-szulfát • 5 H20 0,04 g nátrium-molibdenát • 2 H20 0,2 g cink-szulfát • 7 H20 8 g koball-klorid • 6 H20 0,2 g éiesztőkivonat 1 g glükóz 10 g bórsav 0,5 mg víz 1000 ml-re kiegészítve. A táptalaj pH-ját foszforsavval 7,0-ra állítjuk be. E glutaminsav 5 g magnézium-szulfát • 7 H20 0,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 2 g kalcium-karbonát 1 g glükóz 10 g Czapek oldata 2 ml víz 1000 mlre kiegészítve. A táptalaj pH-ját kálium-hidroxiddal 7,0-ra állítjuk be. F glutaminsav 5 g magnézium-szulfát • 7 H20 0,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 5 g kalcium-karbonát 1 g glükóz 10 g Czapek oldata 2 ml víz 1000 ml-re kiegészítve. A táptalaj pH-ját kálium-hidroxiddal 7,0-ra állítjuk be. ' G éiesztőkivonat 5 g magnézium-szulfát • 7 H20 0,5 g dikálium-hidrogén-foszfát 2 g kalcium-karbonát 1 g glükóz 10 g Czapek oldata 2 ml víz 1000 ml-re kiegészítve. A táptalaj pH-ját foszforsavval 7,0-ra állítjuk be. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
