188667. lajstromszámú szabadalom • Eljárás depolimerizált, szulfatált heparin-poliszacharid elegyek előállítására
1 188 667 2 6. példa 5 g benzetónium-heparinát 125 ml diklór-metánnal készített oldatához 5 g 4-nitro-benzil-kloridot adunk,és ennek oldódásáig keveijük az elegyet. Ezután szobahőmérsékleten 3 napig állni hagyjuk, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk,és a maradékot 75 ml dimetil-formamidban oldjuk. A képződött észtert 75 ml 10%-os metanolos nátrium-acetát-oldat hozzáadása útján leválasztjuk, szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk,és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 1,89 g heparin-(4- -nitro-benziI)-észtert kapunk nátriumsó alakjában. Hozam: 50 %. 1,85 g fenti módon kapott észterhez 46 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk, és az elegyet 60 °C hőmérsékleten 2 óra hosszat keveijük. Lehűlés után a reakcióelegyet 0,1 n vizes sódavoldattal semlegesítjük, majd kétszeres térfogatú metanol hozzáadása útján a képződött terméket leválasztjuk. A kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk, és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 1,13 g depolimerizált heparint kapunk nátriumsó alakjában. 7. példa 30 g benzetónium-heparinát 500 ml diklór-metánnal készített oldatához 30 g benzil-kloridot adunk és ennek oldódásáig keveijük az elegyet. A kapott oldatot azután szobahőmérsékleten 24 óra hosszat állni hagyjuk, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk,és a maradékot 400 ml éterben oldjuk. A nem oldódó részt szűréssel elkülöníljük. Ily módon 30 g heparin-benzilésztert kapunk benzetóniumsó alakjában. Hozam: 30 %. A fenti módon kapott észtert 200 ml diklór-metánban, amelyhez előzőleg 8 ml l,5-diaza-biciklo[4.3.0]5- ,-nonent adtunk oldjuk,és az oldatot 3,5 óra hosszat forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásával. A reakcióelegyből az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a maradékot 450 ml dimetil-formamidban oldjuk,és az oldathoz ugyanolyan térfogatú 10 %-os metanolos nátrium-acetát-oldatot adunk. A képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük és metanollal mossuk, majd n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá, és az elegyet 0 °C hőmérsékleten 1 óra hosszat állni hagyjuk. Semlegesítés után kétszeres térfogatú metanolt adunk a re akcióele gyhez, majd a kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk, és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 6,6 g depolimerizált heparint kapunk nátriumsó alakjában. 8. példa 10 g benzetónium-heparinát 250 ml diklór-metánnal készített oldatához 10 g 4-klór-benzil-kloridot adunk, és ennek oldódásáig keverjük az elegyet. A kapott oldatot azután szobahőmérsékleten 24 óra hosszat állni hagyjuk, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot 200 ml éterrel felvesszük,és a képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük. Ily módon 10 g heparin-(4-klór-benzil)-észtert kapunk benzetóniumsó alakjában. Hozam: 30 %.1 5 g fenti módon kapott észtert feloldunk 100 ml diklór-metánban, amelyhez előzőleg 1,5 ml 1,5-diaza-diciklo-[4.3.0]5-nonent adtunk, majd az elegyet 4 óra hosszat forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásával. A reakcióelegyből az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a maradékot 30 ml dimetil-formamiddal felveszszük,és 100 ml 10%-os metanolos nátrium-acetát-oldatot adunk hozzá. A képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk, majd 24 ml n vizes nátrium-hidroxid-oldat hozzáadásával 0 °C hőmérsékleten 1 óra hosszat állni hagyjuk. Az oldatot n vizes sósavoldat hozzáadása útján semlegesítjük, majd kétszeres térfogatú metanol hozzáadásával leválasztjuk a terméket. A kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk, és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 1 g depolimerizált heparint kapunk nátriumsó alakjában. 9. példa 30 g benzetónium-heparinát 600 ml dimetil-formamiddal készített oldatához 30 g benzil-kloridot adunk. Oldódás után az elegyet szobahőmérsékleten 60 óra hosszat állni hagyjuk, majd 1200 ml 10%-os metanolos nátrium-acetát-oldat hozzáadása útján leválasztjuk a képződött észtert. A kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk, és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 11,4 g heparin-benzilésztert kapunk nátriumsó alakjában. Hozam: 40 %. 10 g fenti módon kapott észterhez 250 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk, és az elegyet 60 °C hőmérsékleten 2 óra hosszat keveijük. Lehűlés után az oldatot 0,1 n vizes sósavoldattal semlegesítjük, és kétszeres térfogatú metanol hozzáadásával lecsapjuk a terméket. Ezt leszűrjük, metanollal mossuk,és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 6,65 g depolimerizált heparint kapunk nátriumsó alakjában. 10. példa 120 g benzetónium-heparinát 2,4 liter dimetil-formamiddal készített oldatához 120 g 4-klór-benzil-kloridot adunk,és ennek oldódásáig keveijük az elegyet. Az oldatot azután szobahőmérsékleten . 60 óra hosszat állni hagyjuk, majd 2,4 liter 10%-os metanolos nátrium-ace tát-oldatot adunk hozzá. A képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, metanollal mossuk,és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 46 g heparin-(4-klór-benzil)-észtert kapunk nátriumsó alakjában. Hozam: 50 %. 20 g fenti módon kapott észterhez 500 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk,és az elegyet 60 °C hőmérsékleten 2 óra hosszat keveijük. Lehűlés után az oldatot semlegesítjük, és kétszeres térfogatú metanol hozzáadása útján lecsapjuk a terméket. 11,7 g depolimerizált heparint kapunk nátriumsó alakjában. 11. példa 30 g benzetónium-heparinát 750 ml diklór-metánnal készített oldatához 30 g metil-jodidot adunk,és ennek oldódásáig keveijük az elegyet. A kapott oldatot szobahőmérsékleten 48 óra hosszat állni hagyjuk, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot 450 ml dimetil-formamidban oldjuk,és 450 ml 10 %-os metanolos nátrium-acetát-oldat hozzáadása útján leválasztjuk a terméket. A kapott csapadékot leszűijük, metanollal mossuk,és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 10,5 g heparin-metilésztert kapunk nátriumsó alakjában. Hozam: 50 %. 2 g fenti módon kapott észterhez 50 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk és az elegyet 60 °C hőmérsékleten 2 óra hosszat keveijük. Lehűlés után az oldat pH-értékét 4,5 körülire állítjuk be H+-alakban levő karboxilos ioncserélő gyantával történő keverés útján. A gyantát ezután kiszűijük és vízzel utánamossuk. A mosófolyadékkal egyesített vizes fázist híg vizes nát5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
