188565. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás új peptidek előállítására és ezek alkalmazási módja

141

' 188 565

142

ml metanollal készített oldatához 314 mg trietilamint és 518 mg triakontánsav-N-hidroxi-szukcinimid-észtert adunk. A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a maradékhoz 10 ml vizet és 4 ml 1 n sósavat adunk. A csapadékot elválasztjuk, vízzel mossuk, és szárítás után nyers terméket kapunk, melyet meleg diizopropil-éterrel mosva 610 mg triakontanoil-L-Ala-y-D-Glu(a-OH)-(L-Boc-D-mezoDAP-L)-D-AlaOH-t kapunk. Op. : 157 °C (bomlás közben).

[a]D = —14,67° (c = 0,20 ecetsavban). IR-spektrum (nujol): 3280, 1720, 1625 cm-1. NMR-spektrum (deutero-kloroform +deutero-metanol, <5 ppm): 0,92 (3H, m), 1,1—2,1 (77H, m), 2,15—2,50 (4H, m).

2. lépés: 166/2 reakcióegyenlet.

500 mg triakontanoil-L-Ala-y-D-Glu(a-OH)-(L-Boc-D-mezoDAP-L)-D-AlaOH 20 ml ecetsavval készített szuszpenziójához 10 ml sósavval telített ecetsavat adunk, és az elegyet vízfürdőn 5 percen át keverjük, majd szobahőmérsékletre hűtjük és

1,5 órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. A reakcióelegyet ezután vákuumban bepároljuk, és a maradékot vízzel mossuk, majd a csapadékot elválasztjuk, és szárítás után 412 mg triakontanoil-L-Ala-y-D-GIu(a-OH)-(L-mezoDAP-L)-D-AIaOH-t kapunk. Op.: 185 °C (bomlás közben).

IR-spektrum (nujol): 3300, 1720, 1625 cm-1. NMR-spektrum (trifluor-ecetsav <5 ppm): 0,90 (3H, m).

167. példa

1. lépés: 167/1 reakcióegyenlet.

A 165. példa 1. lépésében megadottak szerint n-Heptanoil-y-D-Glu(a-OBzl)-(L-Z-D-mezoDAP-D-OEt-L)-D-AlaOEt-t állítunk elő. Op.: 141— 142 °C.

[a]D = —10,31° (c=0,22, kloroformban). NMR-spektrum (hexadeutero-dimetil-szulfoxid, ö ppm): 0,85 (3H, m), 1,05—2,40 (29H, m), 3,93—4,70 (8H, m), 5,06 (2H, s), 5,11 (2H, s),

5,58 (1H, d, J = 8Hz), 6,60 (2H, d, J=8Hz), 7,20 (1H, d, J = 8Hz), 7,31 (10H, s).

2. lépés: 167/2 reakcióegyenlet.

A 165. példa 2. lépésében leírtak szerint eljárva n-heptanoil-y-D-Glu(a-OH)-(L-mezoDAP-D-OEt-L)-D-AlaOEt-t állítunk elő. Op.: 179—182 °C. [a]D = —13,85° (c=0,29, ecetsavban). NMR-spektrum (hexodeutero-dimetil-szulfoxid,

Ô ppm): 0,87 (3H, m), 1,02—2,33 (27H, m), 3,40 (1H, m).

168. példa

1. lépés: 168/1 reakcióegyenlet.

165. példa 1. lépésében leírtak szerint eljárva heptanoil-y-D-Glu(a-OBzl)-(L-Z-D-mezoDAP-D-OEt-L)-D-AlaOH-t állítunk elő. Op.: 94—102 °C. [a]D = —1,06 (c = 0,21, kloroformban). IR-spektrum (nujol): 3280,1735,1685,1630cm-1 NMR-spektrum: (deutero-kloroform, ô ppm): 0,86 (3H, m), 1,05—2,55 (26H, m), 3,9—4,9 (6H, m), 5,10 (2H, s), 5,16 (2H, s), 7,32 (10H,s).

72

2. lépés: 168/2 reakcióegyenlet.

930 mg heptanoil-y-D-Glu(a-OBzl)-(L-Z-D-mezoDAP-D-OEt-L)-D-AlaOH-t 20 ml ecetsavban oldunk, és 200 mg 10%-os palládium-szén katalizátor jelenlétében, atmoszférikus hídrogénnyomás mellett hidrogénezzük. A katalizátor eltávolítása után az ecetsavat vákuumban lepároljuk. A maradékot 50 ml-es HP—20 oszlopon kromatografáljuk, eluensként etanol-H20 (3:7, tf/tf) elegyet alkalmazva. Ily módon 490 mg heptanoil-y-D-Glu(a-OH)-(L-mezoDAP-D-OMe-L)-D-AlaOH-t kapunk. Op. : 218 °C.

[a]D = —14,63° (c=0,2, vízben).

IR-spektrum (nujol): 3280, 1740, 1635 cm-1. NMR-spektrum (deutérium-oxid, ppm): 0,90 (3H, m), 1,2—2,6 (26H, m), 4,1—4,55 (6H, m).

169. példa

1. lépés

100 ml trifluor-ecetsavat adunk 19,0 g (L-Boc-D-Z-mezoDAP-D-OMe-L)-D-AlaOMe-hez és az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A trifluor-ecetsav eltávolítása után a maradékot 300 ml metilén-kloric/ban oldjuk és 14,38 g trietil-amint és 24,38 g sztéaroil-L-Ala-D-Glu(OSu)(OB- zl)-t adunk hozzá. A reakcióelegyhez 250 ml metanol és 50 ml tetrahidro-furán elegyét adjuk, majd egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 300 ml vizet adunk hozzá, és 1 n sósav adagolásával a pH-értéket 4-re állítjuk. A kapott csapadékot elválasztjuk és vízzel mosva nyers terméket kapunk, melyet 800 g szilikagélen végzett oszlop-kromatográfiával tisztítunk, az eluálást kloroform-metanol (50:1 tf/tf) eleggyel végezve. Ily módon 21,13 g sztearoiI-L-Ala-y-D-Glu(a-OBzl)L-Z-D-mezoDAP-D-OMe-L)-D-AIaOMe-t kapunk, melynek olvadáspontja 166—170 °C.

[«L = —15,59° (c=0,30, kloroformban). IR-spektrum (nujol): 3300, 1730, 1685, 1635 cm-1.

NMR-spektrum (deutero-kloroform, ô ppm): 0,88 (3H, m), 1,06—2,55 (48H, m), 3,66 (3H, s),

3,71 (3H, s), 4,20—4,80 (5H, m), 5,10 (2H, s),

5,40 (2H, s), 5,78 (1H, d, J=8Hz), 6,50 (1H, m),

7,04 (1H, d, J=8Hz), 7,30 (10H, s).

2. lépés

6,0 g sztearoil-L-Ala-y-D-GIu(a-OBzl)-(L-Z-D-mezoDAP-D-OMe-L)-D-AlaOMe-t 80 ml ecetsavban oldunk, és 1,2 g 10%-os palládium-szén katalizátor jelenlétében, atmoszférikus hidrogénnyomás mellett hidrogénezzük. A katalizátor eltávolítása után a szűrletet sósavval telítjük és az oldatot vákuumban bepároljuk. A maradékhoz toluolt adunk, majd vákuumban lepároljuk. Ezután az elegyhez diizopropil-étert adunk, 6 órán át keverjük, majd a csapadékot elválasztjuk és szárítjuk, így 4,60 g sztearoil-L-Ala-y-D-Glu-(L-mezoDAP-D-OMe-L)-D-AlaOMe sósavas sót állítunk elő. Op.: 186—187 °C.

170. példa

1. lépés

A 169. példa 1. lépésében leírtak szerint eljárva heptanoil-y-D-Glu(a-OBzl)-(L-Z-D-mezoDAP-D-5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55;

60

65