188446. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vas- és szeléntartalmú preparátum előállítására
1 188 446 2 megbízhatósági szinten, a szelén vonatkozásában pedig 95%-os megbízhatósági szinten (Wilcoxson- Mann-Whitney-féle rangszámösszeg-próba). A találmány szerinti új készítménnyel kezelt malacok vérszérumának szelén- és glutation-peroxídázszintjét még 4 héttel a kezelés után is elegendően magasnak mondhatjuk, ugyanakkor a kontrollállatoknál mért megfelelő értékek hiányállapot kialakulását jelzik. Meg kell jegyezni, hogy a kísérletben alkalmazott 0,3 mg/kg-os szeléndózis ötször nagyobb a normális dózisnál, és ismeretes, hogy a szelén gyorsan ürül ki a szervezetből. Egy másik kísérletsorozatban két kocát alacsony szeléntartalmú étrenden tartottunk vemhességük utolsó négy hetében és a szoptatás ideje alatt. A 25 élveszületett kismalacot háromnapos korukban két csoportra (12 db+13 db) osztottuk úgy, hogy mindkét csoportba jutottak malacok mindkét kocától. Vérmintákat vettünk mindegyik malactól, hogy meghatározzuk a szelén és a glutation-peroxidáz enzim szintjét a vérben, és vértsejtszámlálást végeztünk. A kísérleti csoport (13 db malac) 200 mg Fe3+-t kapott vas-dextrán komplex alakjában olyan 2 ml-es szubkután injekcióban, amelybe előzőleg még annyi nátrium-szelenitet is adagoltunk, hogy a Se4+ koncentrációja 0,15 mg/ml legyen. Az ellenőrző csoport (12 állat) 200 mg Fe3+-t kapott vas-dextrán komplex alakjában, szelén hozzáadása nélkül. Az ellenőrző csoportból az egyik kismalac később elpusztult. Nyolc nap után valamennyi malactól vérmintát vettünk. Egy elektronikus vérsejtszámláló alkalmazásával megállapítottuk, hogy az eritrocita-szám átlagos emelkedése a kisérleti csoportban 1,76 + 0,44 x 1012/1, a kontrollcsoportban viszont 1,41 ± 0,30 x 1012/1 volt. A különbség statisztikailag szignifikáns volt - 95%-os megbízhatósági szinten - a nemparaméteres Wilcoxson-Mann- Whitney-féle rangszámösszeg-próba szerint. A szelénről korábban nem mutatták ki, hogy serkentené az eritrociták szintézisét. Ennek folytán a találmány kidolgozása során tett fenti megállapítás igen jelentős felismerésnek tekinthető, amelynek nagy szerepe lesz mind a humán, mind az állatgyógyászat vonalán. Valószínűsíthető, hogy a vassal kombinált szelén alkalmazása idézi elő az eritrociták számának jelentős növekedését. Azt is megállapítottuk, hogy a malacoknak háromnapos korukban adott vas + szelén kombinált injekció (200 mg Fe3+ +0,3 mg Se4+) (állat) a korábbi megfigyelésekkel összhangban képes a szérum szelénkoncentrációját és glutation-peroxidáz szintjét, valamint az állat testi fejlődését, súlygyarapodását legalább 3 hétig normális szinten tartani. Ugyanakkor az előző csoport állatai (200 mg Fe3+/állat) eddigre már súlyos szelénhiány-tüneteket mutatnak, amit a súlygyarapodás visszamaradása jelez. A szelén valószínűleg egy vas-szelén komplex alakjában raktározódik, ami magyarázatot ad arra, hogy nem várt módon miért elégséges egyetlen, újszülött korban adott szelénadag mintegy 8-10 kg-os testsúly eléréséig. A kísérleti eredmények azt mutatják, hogy a találmány szerinti vas-szelén preparátum megfelelő depó- illetve nyújtott hatással rendelkezik in vivo, s hogy meglepően magas szintű a biológiai aktivitása is. Az alábbi példák segítségével bemutatjuk a találmány szerinti új típusú készítmény előállítását. /. példa Összetétel: Nátrium-szelenit; Se4+-tartalom: 0,150 mg Vas-dextrán hidrolizátum; Fe3+-tartalom: 100,0 mg Aqua sterilisata ad 1,0 ml 150 mg szelénnel ekvivalens nátrium-szelenitet feloldunk 5 ml steril, desztillált vízben és az oldatot a vas-dextrán hidrolizátumának oldatával elegyítjük. Az így kapott oldatot azután steril vízzel 1 liter térfogatra töltjük fel, membránszürőn vagy üvegszűrőn átbocsátva a lebegő szilárd részecskéket eltávolítjuk. A szürletet üvegampullákba vagy forró levegővel sterilizált injekciós ampullákba töltjük. A használatra kész csomagolású injekciós oldatot autoklávozással sterilezzük. 2. példa Összetétel: Nátrium-szelenit; Se4+-tartalom: 0,150 mg Vas(III)-polimaltóz; Fe3+-tartalom: 100,0 mg Aqua sterilisata ad 1,0 ml 100 mg ferriiont tartalmazó vas(III)-hidroxidipolimaltóz komplexet 500 ml steril vízben feloldunk és a nátrium-szelenitet hozzáadjuk. Az oldatot steril vízzel 1 literre feltöltjük, szűrjük, edényekbe töltjük és a letöltött kész terméket sterilezzük. 3. példa összetétel: Szelén-dioxid; Se4+-tartalom: 0,1 mg Vas-dextrán hidrolizátum; Fe3+-tartalom: 100,0 mg Aqua sterilisata ad 1,0 ml Az injekciós oldatot az 1. példa szerinti eljárással készítjük. 4. példa Összetétel: Nátrium-szelenit; Se4+-tartalom: 0,2 mg Vas-polimaltóz; Fe3 +-tartalom: 100,0 mg A fenti összetétellel homogén porkerevéket állítunk elő önmagában ismert eljárások segítségével. A porkeveréket oldószer(ek) hozzáadásával granulálhatjuk. 5. példa Nátrium-szelenit; Se4+-tartalom: 0,06 mg Vas-dextrán hidrolizátum; Fe3+-tartalom: 100,0 mg Tisztított víz, szükséglet szerint Polietilénglikol 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 50 65 4
