188190. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a természetben előforduló ergolén-vázas alkaloidot az ergokrisztint tartalmazó drog parazita módon történő előállítására

1

188 190

2

be: malátakivonat (holland) 3 s%, tripkazin 1,5 s%, citromsav 0,4 s%, glükóz 1,0 s%

A táptalaj pH értéke: 5,8.

Az inkubálást 24 °C-on 440 ford/perc keverés mellett, 0,5 1/perc levegőztetéssel 3 napig végeztük. 5 A tenyészettel 10 liter alábbi összetételű táptalajt oltottuk be: mannit 5,0 s%, citromsav 0,7 s%, kukoricalekvár (50% szárazanyagra számolva) 0,1 s%, kálium-dihidrogén-foszfát 0,025 s%, magnéziumszulfát 0,025 s% 10

Az inkubálást 24 °C-on, 230 ford/perc keverés mellett, 1,0 I/perc levegőztetéssel 4,5-5,0 pH értéken 6 napig végeztük. A pH-értéket ammóniumhidroxid oldat adagolásával tartottuk a megadott tartományon belül. A fermentlé spóraszáma: 15 5,5108/ml. A biomasszát elválasztottuk, majd malátakivonattal dúsítottuk, palackoztuk és mélyhütve tároltuk.

Az oltóspóra készítmény spóráinak csíraképessége 98-100%. 20

A készítménnyel, amelyet 30 000 spóra/mm3 koncentrációra hígítottunk, 30 m2-es szabadföldi parcellán rozsot fertőztünk. A fertőzést kézi fertőzőlapokkal végeztük. A termést kézzel, veszteségmentesen gyűjtöttük be. 25

Az új és a kiindulási törzs összehasonlító vizsgálatánál az alábbi eredményt kaptuk:

Törzs deponálási száma

OKI OKI 00 224 00 216

Ezer szem súly

g

160

180

ergokrisztin

mg/g

5,5

11,5

terméshozam

kg/ha

150

250

ergokrisztin- g/ha

825,

2875

Szabadalmi igénypont

Eljárás a természetben előforduló ergolén-vázas alkaloidot, az ergokrisztint tartalmazó drog előállítására rozsra virulens Claviceps purpurea törzs spóratenyészetével, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmus törzsként az Országos Közegészségügyi Intézetnél 00 216 szám alatt deponált Claviceps purpurea törzset alkalmazunk.

Ábra nélkül

3