188057. lajstromszámú szabadalom • Antigén-antitest reakciós analitikai eljárás és ahhoz alkalmazható reagens
1 188 057 2 haladó merlek hen AFP-t tartalmazó mintáknál e> lirii alakú agglutinációt figyelünk meg, míg a 100 ng.ml-t meghaladó mértékben AFP-t tartalmazó mintáknál vagy szembetűnően nagyobb gyűrű alakii. vagy Ibnatszerű agglutinációt figyelünk meg. Amikor ismert összetételű mintákkal végezzük ■igyane/.t a kísérletet, a korábbi tapasztalathoz képest kevesebb a pszeudo-reakció még nagymértékben zavaros minták esetében is, ami megkönnyíti a/ értékelést. 6. példa Anli-AFP antitest globulint feloldunk 0,1 mól/ liter gliein púderben (pH = 8,8), majd hozzáadunk egyező mennyiségű gliein púderrel (pH = 8,8) látex reagenst (részecskeméret 0,22 pm, gyártó: Dow Chemical C’o,) úgy, hogy egy-egy látex részecskére 800 1500 antitest globulint alkalmazunk és az így kapott elegyel szobahőmérsékleten keverjük kielégítő mértékű szenzibilizáltság eléréséig. Centrifugás elkülönítés után a felülúszót eltávolítjuk és a csapadékhoz adunk 0,1 mól/liter gliein puffert, amely egy látex részecskére számított 1000-2000 molekulányi 5 marhaszérum albumint és 0,6%-os koncentrációban dextrán-szulfátot tartalmaz. Az így kapott szenzibilizált részecskéket - tartósítószert tartalmazó - 0,1 mól/litemyi gliein pufferben (pH = 8,8) szuszpendáltatjuk és a szuszpenziót tároljuk. 10 Látható, hogy a találmány lényege, hogy a meghatározandó antigént vagy antitestet tartalmazó mintát a reakcióközegben oldódó polianion vegyülettel kezeljük és az így kezelt mintát alkalmazzuk a reakcióban. A polianiont tehát vízben - vagy 15 vizes közegben - oldódó vegyület alakjában adjuk a reakcióelegyhez. Ebből az is nyilvánvaló szakember számára, hogy a találmányi gondolattal öszhangban a fenti példáktól egyébként eltérő módon is végezhető a meghatározás és alkalmazható a találmány szerint készített reagens-preparátum. Táblázat Kísérlet No. Minta Kinyerés (%) Hemolízis Zavarosság Ellenőrző p. Nincs polianion 1. példa Dextránszulfát 2. példa Poliszt.szulfonsav 3. példa Heparin 4. példa Cell.-ftalát-acetát 1 + + + 93,7 101,4 93,9 96,2 98,3 2 ± ± ± 86,8 88,8 88,2 88,9 88,9 3 ± ± ± 83,8 105,8 80,2 87,2 82,9 4 ± ± + ± + 88,0 96,5 90,0 92,2 93,2 5 ± ± ± 76,7 86,6 80,3 82,3 85,2 6 ± 84,6 98,1 85,2 87,8 91,2 7 + 90,7 103,3 93,4 93,5 98,5 8 + 85,9 103,0 86,8 85,9 91,7 9 ± 72,9 96,2 85,0 82,4 91,7 10 ± 100,6 100,6 100,0 99,8 101,7' 11 ± 105,1 100,4 89,9 100,2 111,2 12 F + + 92,7 101,0 94,3 102,0 98,4 13 + + 96,5 99,1 97,8 100,0 101,2 14 + ± 92,4 97,5 95,2 99,0 101,2 15 + 100,0 100,2 97,5 102,0 101,5 ló t ± 79,6 93,1 80,4 85,0 88,4 17 _ 95,6 100,1 95,5 99,4 100,9 IS + 81,1 93,2 87,5 85,5 93,5 19 ± + ± 82,6 85,5 83,7 87,0 86,0 20-92,0 105,1 97,2 102,0 98,0 Átlagérték 89,07 97,78 90,1 92,92 95,18 Szórás ±8,39 ±5,76 ±6,33 ±7,21 ±7,07 Variancia tényező 9,42 5,89 7,02 7,76 7,43 4
