187835. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (amido)-N-helyettesített bleomicinek és savaddiciós sóik előállítására
1 187 835 2 tillált vizet adunk, majd a maradék aldehid eltávolítására 300 ml kloroformmal extraháljuk. A vizes fázis pH-ját nátrium-hidroxiddal 13,5 értékre állítjuk, majd 200 ml kloroformmal kétszer extraháljuk. A kívánt terméket tartalmazó kloroformos fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, majd a kloroformot csökkentett nyomáson végzett desztillálással eltávolítjuk. A maradékot 100 ml desztillált vízzel és 50 ml tömény hidrogén-kloriddal elegyítjük és szárazra pároljuk. 71%-os hozammal 66 g N-{3-[N-(3-amino-propil)-N-metil-aminö]-propil}-ciklooktil-amino-tri(hidrogén-klorid)-ot nyerünk. A vegyület PMR spektruma nehézvízben vizsgálva a következő: S (ppm) = 1,2-2,3, 15H (m); 2,0-2,8 4H (m); 3,0-3,9, 10H (m); 3,25, 3H (s) - m és s jelentése az előzőekben megadott. A vegyület PMR spektruma az előzőekben megadott kémiai szerkezetet alátámasztja. A többi fizikokémiai jellemzőt a 8. táblázatban ismertetjük. Az előzőekben ismertetetthez hasonlóan állítunk elő N-{3-[N-(3-amíno-propil)-N-metil-amíno]propil}-p-ciano benzil-amin-tri(hidrotén-klorid)-ot p-ciano-benzaldehidből 81%-os hozammal és N-{3- [N-(3-amino-propil)-N-metil-amino]-propil} 2-(pklór-fenil)-etil-amin-tri(hidrogén-klorid)-ot p-klórfenil-acetaldehidből 51%-os hozammal. E vegyületek fizikokémiai jellemzőit a 8. táblázatban ismertetjük. 6. példa 14,90 g, az 5. példa első lépésében előállított BOC-APMP-t 300 ml metanolban oldunk és pH- ját jégecettel 6,4 értékre állítjuk. A jégben hűtött oldathoz 77,30 g 3,4-dibenzil-oxi-benzaldehidet (4 molekvivalens), majd 5,0 g nátrium-ciano-borohidridet adunk. Az elegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, majd 96 órán át keverjük. Ezt követően csökkentett nyomáson végzett desztillálással eltávolítjuk a metanolt. A maradékot 200 ml desztillált vízzel hígítjuk, 200-300 ml kloroformmal kétszer extraháljuk. A kloroformos rétegeket egyesítjük, nátrium-szulfáton szárítjuk, 100 ml térfogatra bepároljuk, majd előzetesen kloroformmal mosott 1200 ml térfogatú szilikagél oszlopon engedjük át. Az oszlopon a kívánt vegyület adszorbeálódik. Az adszorbeált fázist kloroform-metanol eleggyel, a metanol koncentráció fokozatos növelése mellett, eluáljuk. A kívánt termék a 97 : 3 arányú kloroform-metanol eleggyel jön le. A kívánt terméket tartalmazó eluátum-frakciókat egyesítjük, csökkentett nyomáson bepároljuk. 31,43 g l-[N-(3-tercbutoxi-karbonil-amino-propil)-N-metil-amino]-3- [bisz(3,4-dibenzil-oxi-benzil)-amino]-propánt nyerünk olajos anyag formájában. Az olajos anyagot 78,6 ml diklór-metánban feloldjuk, jégben hűtve és keverve 30 perc alatt hozzácsepegtetünk 78,6 ml trifluor-ecetsavat (TFA). Az elegyet 0 °C hőmérsékleten 1,5 órán át reagáltatjuk. Ezután a fürdő hőmérsékletét 25 °C-ra emeljük és az oldószert csökkentett nyomáson Iedesztilláljuk. A maradékot 200 ml desztillált vízzel elegyítjük, 50 ml 5n nátrium-hidroxidot adunk hozzá, majd 500 ml kloroformmal kiextraháljuk belőle a 3-{N-{N-metil-N[3'-bisz(m,p-dibenziloxi-benzil)-amino-propil]amino}} propil-amint (röviden MDD-amint). A vizes fázist jnég egyszer extraháljuk 100 ml kloroformmal. A kloroformos fázisokat egyesítjük, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, majd a kloroformot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. 26,30 g nyers, olajos MDD-amint kapunk. A nyers, olajos terméket 2000 ml térfogatú, Amberlite * XAD-2 gyantával töltött oszlopon kromatografálva tisztítjuk. A kromatográfiás eljárást a következőképpen végezzük. A nyers olajat 75 ml metanolban oldjuk, az oldatot 750 ml 4%-os vizes káliumacetát és 2%-os vizes ecetsav 1 : 1 arányú elegyével pufferoljuk. A kapott szuszpenziót a fenti oszlopra visszük, a kívánt anyag az oszlopon adszorbeálódik. Az oszlopot a fenti puffereleggyel mossuk, az elegyhez fokozatosan növekvő koncentrációban metanolt keverünk. A kívánt termék, az MDD- amin, 15:85 puffer-metanol arányú eleggyel eluálódik. A kívánt terméket tartalmazó frakciókból csökkentett nyomáson végzett desztillálással eltávolítjuk a metanolt, majd a pH-t 5n nátrium-hidrox)d-oldattal 13 értékre állítjuk, és az oldatot háromszor extraháljuk 300-300 ml kloroformmal. A kloroformos fázisokat egyesítjük, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, a kloroformot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, majd a visszamaradt anyagot foszfor-pentoxidon szárítjuk. 46,2%-os hozammal 21,08 g MDD-amint (szabad bázist) nyerünk olajos anyag formájában. A vegyület fizikokémiai jellemzőit a 8. táblázatban ismertetjük. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű új (amido)-N- helyettesített bleomicinek és savaddíciós sóik előállítására-a képletben BM a bleomicin vázat jelentő rész; X jelentése- 1—18 szénatomos alkilcsoport;- amino-(l-12 szénatomos)-alkil-csoport;- 1-4 szénatomos alkilcsoport, melynek helyettesítői- 1-3 halogénatom,- adott esetben halogénatommal helyettesített 1 vagy 2 fenilcsoport,- adott esetben 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal helyettesített indolilcsoport vagy - egy furil-, piridil-, tiazolil- vagy piperidilesoport; - X,-(l-4 szénatomos)-alkil-csoport, ahol- X, jelentése (1) vagy (2) általános képletű csoport, ahol- X2 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy benzilesöpört,- X3 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport, fenil(1-4 szénatomos)-alkil-csoport, mono-(l-4 szénatomos)-alkil-amino-(l-4 szénatomos)-alkilcsoport, mely utóbbi fenil- vagy halogénezett fenilcsoporttal helyettesített lehet;- nafti lesöpört vagy- N-fenil-(l-4 szénatomosj-alkil-piperazinilcsoport és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 19
