187803. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminosavak N-(vinblasztinoil-23)-származékainak és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 187.803 2 savakkal képezett addíciós sói. f: A (III) általános képletben a (3) képletű csoport izoleucinból, triptofánból származó észtert jelent. A vegyületeket 3-demetoxi-karbonil-0-dezacetilvinblasztin-3-karboxamidnak nevezzük. Ezeket előnyösen azonban az aminosavak N-(vinblasztin- 23-oil)- vagy N-(vinkrisztinoil-23)-származékokként fogjuk feltüntetni. A találmány szerint különösen aminosavak és vinkrisztin-O-4-dezacetil-vinkrisztin, deformil-0-4- dezacetil-vinkrisztin és dezoxi-vinblasztin-B reakciótermékeit állítjuk elő. Ez utóbbi vegyületet úgy kapjuk, hogy anhidrovinblasztint, melyet vinblasztin dehidratálásával kapunk, dehidrogénezünk, vagy vindolin-katarantinnal kapcsolunk össze. (Potier és társai, JACS 98, 7017 [1976]). Ha a (III) általános képletű aminosav az R3 oldalláncban funkciós csoportokat tartalmaz, akkor a funkciós csoportokat ismert módon védőcsoportokkal láthatjuk el. A védelmet a védendő csoport természetétől függően úgy kaphatjuk, hogyha a vegyületet benzil-, t-butil-, benziloxikarbonil-, t-butoxi-trifluoracetilkarbonil- vagy tritilcsoporttal kondenzáljuk. Használhatunk sikeresen más peptid-kémiából ismert védőcsoportot is. A találmány szerint a vegyületeket ismert módon állíthatjuk elő a megfelelő vinblasztin-származékokból hidrazilolízissel vagy nitrozálással és aminosavészterrel történő reagáltatással, az 1. reakcióvázlat szerint. Az eljárás első lépése előnyösen abból áll, hogy vízmentes hidrazint feleslegben vinblasztin bázis vízmentes metanollal képezett oldatához adunk Az oldatot inert atmoszférában 12 órától 12 napig terjedő ideig 30-70 °C közötti hőmérsékleten melegítjük. Előnyösen 60 °C-on tartjuk a hőmérsékletet. A bisz-indol-származék hidrazidját ezután víz hozzáadásával izoláljuk, diklórmetánnal extraháljuk és koncentráljuk. A vegyületet később preparatív kromatografálással semleges szilíciumdioxidon tisztítjuk. Vinkrisztin esetében a kapott termék 0-4-dezacetil-deformil-vinkrisztin-karbohidrazid. A második lépésben a módosított vinblasztin hidrazid-csoportját acilaziddá alakítjuk. Ezt az átalakítást legjobban úgy érjük el, ha a hidrazid vizessavas metanolos elegyével készített oldatához nátrium-nitritet adunk, sávként például sósavat alkalmazunk, A reakció hőmérsékletét 0 és 5 °C között tartjuk. A vízzel nem-elegyedő aprotikus oldószerrel, előnyösen kloroformmal vagy metilén-kloriddal történő extrahálás után a szerves fázist elkülönítjük és részben bepároljuk. Az acilazidot általában nem izoláljuk, hpem közvetlenül adjuk az aminosav-észterhez vagy a polipeptidhez vagy annak védett származékához, amelyet megfelelő oldószerben, például metilénkloridban feloldunk. Az aminosavat a vinblasztin-karboxazidhoz viszonyítva körülbelül 1-5 mólekvivalens mennyiségben használjuk. A reakcióelegyet -3 és +10°C között tartjuk 8-72 óráig, általában 15 óráig. A reakciót legjobban vékonyrétegkromatográfiával követjük nyomon. A reakció befejeződése után az oldószert csökkentett nyomáson eltávolíthatjuk és a kapott terméket szulfát-sóvá vagy más ásványi vagy szerves savból levezethető megfelelő sóvá alakíthatjuk a megfelelő sav metanolos oldatából történő kristályosítással. A találmány szerint előállított tiszta vegyületet izolálhatjuk és ismert módon kristályosítással és kromatografálással tisztíthatjuk. A jelen találmány szerint az új bisz-indol-alkaloidokat tartalmazó gyógyászati készítményeket is állítunk elő. A találmány szerint előállított vegyületek különösen hasznos tumorellenes tulajdonságokat mutatnak, melyeket á humán gyógyászatban hasznosíthatunk. Hasznosak lehetnek például, ha az L 1210, P 388, glioma, limfoszarkoma és más leukémia vagy rosszindulatú tumor kezelésére alkalmazzuk. A humán gyógyászatban a Hodgkins betegség és más szolid tumor kezelésére használható, melyeket egyébként vinblasztinnal, vinkrisztinnel vagy vindezinnel lehet kezelni. A vegyületek az állatgyógyászatban is hasznosak lehetnek állati tumorok kezelésére. Az új vegyületeket a vinblasztinhoz hasonlóan más területen is alkalmazhatjuk a gyógyászatban, igy például az artritisz bizonyos formáinak kezelésér ■ (4 208 411. számú Amerikai Egyesült Állaiok-be!i szabadalmi leírás) vagy a vinkrisztinhez isasonlóan pszoriázis kezelésére (3 749 784. számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás). ______ Gyógyászati célokra a találmány szerint előállított gyógyászati készítményeket lehetőleg liofilizált formában, előnyösen parenterális, gyógyászati lag elfogadható hordozóban feloldva bázis vagy gyógyászatilag elfogadható savaddíciós só formájában adagoljuk. Savaddíciós sók között megemlíthetők a nem-toxikus és gyógyászatilag elfogadható sók, például a szervetlen savak sói, így sósavval, foszforsavval, kénsavval vagy szerves savakkal, például ecetsavval, propionsawal, borostyánkősavval, borkősawal, oxálsawal, metán-szulfonsawal és benzol-szulfonsawal képezett sók. Oldószerként fiziológiai vizet vagy más fiziológiai sóoldatot használunk megfelelően, például foszfát-pufferrel pufferezve. Általában a vegyületeket a humán gyógyászatban analóg módon alkalmazhatjuk, mint a vinka-alkaloidokat. A hatóanyagot általában 0,01-5 mg/kg dózisban adagoljuk a használt származéktól és az előírt terápiától függően. Egy héten a dózis általában 0,1-35 mg/kg között változik. A találmány szerint előállított készítményt 2-900 mg-os dózisokban készítjük. 5 10 15 2C 26 30 3t> 40 43 50 55 60 3
