187631. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbonsavamid-csoportot tartalmazó vegyületek, különösen peptidek előállítására
1 187 631 2 11,6 ml benzil-amint és 6,0 ml jégecetet. A kapott reakcióelegyhez a megadott hőmérséklet betartása mellett kis részletekben hozzáadunk összesen 40 ml metil-etil-foszfinsavanhidridet. A reakcióelegyet 30 percig keverjük 50 °C hőmérsékleten, majd 1 éjszakán át történő állás után a 17. példában leírtak szerint feldolgozzuk. A termék az etil-acetátos fázis bepárlása után kristályosodik. Kitermelés: 11,2 g (75%), op. 61 °C. 20. példa 3-Acetil-amino-2,4-dimetil-pentén előállítása 9,0 g (11,3 ml) 3-amino-2,4-dimetil-pentánt és 15 5,6 ml jégecetet feloldunk 20 ml dimetil-formamidban. 30 ml N-etil-morfolin beadagolása után keverés és hűtés közben, részletekben hozzáadunk a reakcióelegyhez összesen 40 ml metil-etil-foszfin 2Q sav-anhidridet. Ekkor csapadék válik ki, amely a reakció folyamán ismét feloldódik. A reakcióelegyet 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük, egy éjszakán át állni hagyjuk, majd a 17. példában leírtak szerint feldolgozzuk. Kitermelés: 10,9 g színtelen kristályos tűszerű 5 szilárd anyag, op. 106 °C (89%). NMR: £ 0,8-0,9 ppm 2 duplett (J = 6,5 Hz) CH—CH3 £ 1,8 ppm, oktett, (J = 6,5 Hz), 30 CH—CH— (CH3)2 £ 2,0 ppm, szingulett CH3CO £ 5,1 ppm, széles dublett, —NH 35 21. példa Nagymolekulájú karbonsavamidok szintézise 500 mg szalmin-szulfát (molekulasúlya 5000) és 75 mg p-hidroxi-fenil-ecetsav 8 ml vízben készített 40 szuszpenziójához + 5 °C és - 10 °C hőmérsékleten, keverés és hűtés közben, részletekben fél óra alatt hozzáadunk összesen 3,5 g metil-etil-foszfinsavanhidridet. Ezalatt a reakcióelegy pH-értékét nátrium-hidrogén-karbonát adagolásával 7,5 értéken 45 tartjuk. További 8 ml víz adagolása és 80 percig tartó keverés után az összes reakciópartner oldatba megy, a bevitt alkil-foszfinsavanhidrid átalakul. A kapott reakcióelegyhez további, az előzővel azonos mennyiségű metil-etil-foszfinsavanhidridet adunk, ennek során az előzőekben leírtak szerint dolgozunk. Az ezután kapott oldatot szobahőmérsékleten, vákuumban kis térfogatra pároljuk be, a visszamaradó anyagot felvesszük 20 ml 0,01 m ecetsav-oldatban és a kapott oldatot két azonos részre osztva Sephadex-G 10 oszlopon (2,5 x 100 cm) sómentesítjük. így összesen 420 mg terméket kapunk, amely az UV-vizsgálatban 264 nm-nél jelentkező csúcs alapján p-hidroxi-fenilacetil-csoportot tartalmaz, ami a szalmin-molekulábin egy amino-végcsoportot/mól proteinvegyület jelent. Analóg állítjuk elő az 1,28 mól szalmin/mól marhaszérumalbumin összetételű szalmin-marhaszérumalbumin vegyületet. Ennél a vegyületnél a marhaszérumalbumin karboxilcsoportja mellett az oldalláncban lévő karboxilcsoportok is részt vesznek a reakcióban. A proteinvegyületet Aminocoh(R> PM 30 ultraszűrőn (átengedési határ 40 000 molekulasúly) történő szűréssel tisztítjuk. A terméket 61%-os kitermeléssel kapjuk, amely az aminosavanalízis alapján 91"0-os. A kondenzációs reakcióban keletkező artefaktumok jelenlétét elemanalízissel (foszfor) vizsgáljuk (a kapott érték < 0,1",,). Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás karbonsavamid-csoportokat tartalmazó vegyületek, különösen peptidek előállítására valamilyen kívánt esetben védett karboxilcsoportot tartalmazó vegyületnek ekvimoláris mennyiségű kívánt esetben védett aminocsoportot tartalmazó vegyülettel történő reagáltatásával. majd adott esetben a védőcsoporlok lehasitásával, azzal jellemezve, hogy a vegyületek reakcióját vízmentes inert oldószerben vagy víznek és vízzel elegyedő inert oldószernek az elegyében 0-50 °C hőmérsékleten legfeljebb négyszeres moláris feleslegben alkalmazott difi 4 szénatomos alki!)-fos/Jinsavanhidrid és adott esetben tercier amin vagy bázikus hatású só jelenlétében folytatjuk le. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosílási módja, azzal jellemezve, hogy bázikus hatású sóként szénsav vagy foszforsav alkálifémsóját alkalmazzuk. I oldal rajz Kiadja az Országos Találmány Hivatal A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Szedte a Nyomdaipari I enyszedő Özein (S776<>7 ()')) 88-0645 — Dabasi Nyomda, Budapest — Dabas Felelős vezető: Bálint Csaba igazgató
