187461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló hatású N-nitrozo-N-(béta-klóretil)-karbamoil-peptidek előállítására
1 187.461 2 12. példa a-/ N-Nitrozo -N- (ßk lore til) -karbamoil]-lizilprolil-valinamid-acetát 547 mg (1 mmól) a-[N-(ß-klöretil)-karbamoil]-£terc-butiloxi-karbonil-lizil-propil-valinamidhoz 10 ml vízmentes piridinben —20 °C-on 1 ml (1,2 mmól) nitrozilkloridot tartalmazó vízmentes diklórmetánt csepegtetünk keverés közben. 1 óráig tartó keverés után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot 0 °C-os etílacetátban oldjuk és jeges vízzel kétszer kitűzzük. Az etilacetátos fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban oldószermentesítjük. A bepárlási maradékot 5 ml 98-100%-os hangyasavban 0 "C-on 2 órán át állni hagyjuk, majd 1 ml 0,12 mmól sósavat tartalmazó hangyasavat adunk hozzá, végül 10 perc múlva vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot szilikagél oszlopon kromatografáljuk 0 °C-on etilacetát-piridin-jégecet-víz 60:20:6:11 eluenssel. A főterméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, vákuumban bepároljuk, a bepárlási maradékot vízben oldjuk és liofilizáljuk, így 390 mg (72%) cím szerinti vegyületet kapunk. Rf: 0,33 (etilacetát-piridin-jégecet-víz = 60:20:6:11, Kieselgel, G, Merck). Analízis a C2iH38N707CI (536,05) képlet alapján: számított: Cl = 6,61%; N = 18,29% talált: Cl = 6,32%; N = 17,72%. 13. példa N-Nitrozo-N- (fi-klóretil) -karbamoil-propil-valinamid 1,37 g (5 mmól) prolil-valinamid-acetátot [Helv. Chim. Acta 46, 870. (1963)] 15 ml vízmentes dimetilformamidban szuszpendálunk, és jeges hűtés és keverés mellett 1,4 ml (10 mmól) trietilamint, majd 1,25 g (5 mmól) N-nitrozo-N-(ß-klöretil)-karbamoil-N-hidroxiszukcinimidet adunk hozzá. A reakcióelegyet 15 percig keverjük 0 °C-on, majd jeges vizet adunk hozzá. A kivált szilárd anyagot szűrjük, hideg vízzel mossuk, majd foszforpentoxid felett szárítjuk. 0,91 g (53%) cím szerinti vegyületet kapunk. Op.: I30°C (bomlik) Rf: 0,8 (kloroform-metanol 8:2, Kieselgel G, Merck). Analízis a C13H22N504C1 (347,8) képlet alapján: számított: Cl = 10,19%; N - 20,13% talált: Cl = 9,86%; N = 19,76%. 14. példa a) a-f N- N itrozo A' - (ß - A' lór-etil) - k arbamoil ]e, terc-hutil-o.xi-karbonil-triptofil-gliiil-lizil-propil- valinamid 1,2 g (1,74 mM) e-terc-butil-oxi-karbonil-triptofil-glicil-lizil-propil-valinamid 10 ml abs. dimetilformamidban lévő oldatához 0 °C-on, kevertetés közben 0,24 ml (1,74 mM) trietilamint és 400 mg (1,6 mM) N-nitrozo-N-(ß-klör-etil)-karbamoil-N- hidroxi-szukcinimidet adunk. A reakcióelegyet félóra múlva vákuumban bepároljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk és vízzel kirázzuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk. Termék: 1,2 g (85%). Rf: 0,25 (kloroform-metanol 9:1) Analízisa C37H55N,0OgCl (819,37) képlet alapján: számított: N = 17,09%; Cl = 4,33% talált: N = 16,72%; Cl = 4,01% b) a-/ N-Nitrozo-N-(ß-klór-etil)-karbamoil]-triptofil-glicil-lizil-prolil- valinamid acetát 819 mg (1 mM) a-fN-nitrozo-N-(ß-klör-etil)karbamoil]-e-terc-butil-oxi-karbonil-tríptofil-glicillizil-propil-valinamidot 10 ml 0,12 N sósavas hangyasavban 5 percig állni hagyjuk, majd az oldatot vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot vízben oldjuk, etilacetáttal kirázzuk. A vizes fázist liofilizáljuk, majd a liofilizátumot szilikagéllel töltött oszlopon etil—acetát—piridín-jégecet— víz = 60 : 20:6: 11 elegyével kromatografáljuk. Az eluáló elegy bepárlása után a maradékot vízben oldjuk és újból liofilizáljuk és így 480 mg (63%) cím szerinti sót nyerünk. Rf: 0,25 (etilacetát-piridin-jégecet-víz 60:20:6:11) Analízis a C34H5 ^„OpCl (779,27) képlet alapján: számított: N = 17,97%; Cl = 4,55% talált: N = 17,00%; Cl = 4,46% 15. példa a) a-[N-nitrozo-N-(^-klór-etil) -karbamoil)-e-terc-butil-óxi-karbonil-lizil-triptofil-leucil-aszparagil-fenilalaninamid 1,4 g (1,73 mM) e-terc-butil-oxi-karbonil-liziltriptofil-leucil-aszparagil-fenilalaninamidot 15 ml abs. dimetil-formamidban oldunk 0 °C-on. Az oldathoz kevertetés közben 0,24 ml (1,73 mM) trietilamint és 433 mg (1,73 mM) N-nitrozo-N-(ß-kloretil)-karbamoil-N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Fél óra kevertetés után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot vízzel eldörzsöljük, szűrjük. A nyersterméket etanolban oldjuk, vízzel kicsapjuk, szűrjük. Ily módon 1,08 g (67%) cím szerinti vegyületet nyerünk. Rf: 0,83 (butanol-piridin-jégecet-víz 4: 1 : 1 : 1) Analízis a C44H61N10O, ,CI (941,50) képlet alapján: számított: N = 14,8%; Cl = 3,76% talált: N = 14,74%; Cl = 4,12%. b) a-J N-nitrozo-N- (ß-klör-etil)-karbamoilJ-lizil-triptofil-leucil-aszparagil-fenilalaninamid 941 mg (1 mM) a-[N-nitrozo-N-)ß-klör-eti!)karbamoil]-e-terc-butil-oxi-karbonil-lizil-triptofil-5 10 15 2C 25 30 35 40 45 50 55 60 6
