187461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló hatású N-nitrozo-N-(béta-klóretil)-karbamoil-peptidek előállítására
1 187.461 2 240.20:6: 11, VRK Kieselgel G, Merck). Analízisa C22H,7N,07Cl2 (611,51) képlet alapján: számított: Cl = 11,59%; N = 20,61% talált: Cl = 11,18%; N = 20,07%. 3. példa a, c.hisz (N-nitrozo-N-(fi-klóretil) -karbamoil]-lizil-prolil-valinamid 552 mg (1 mmól) a, e-bisz(ß-klöretilkarbamoil)lizil-prolil-valinamidhoz (1. példa) 10 ml 99%-os hangyasavat adunk, és hűtés és keverés közben 500 mg nátriumnitrit 3 ml vízben készült oldatát csepegtetjük hozzá 1 óra alatt. A reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk, másnap vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot vízzel eldörzsöljük, szűrjük, a szűrőn vízzel mossuk. Termék súlya: 460 mg (75%) Rf: 0,80 (metanol-etilcetát 1 : 3, VRK, Kieselgels, Merck). Analízis a C22H37N907Cl2 (611,51) képlet alapján: számított: Cl = 11,59%; N = 20,61% talált: Cl = 11,41%; N = 20,10%. 4. példa a) a-[N-Nitrozo-N-ffi-klóretilj-karbamoilJ-E- terc-butil-oxikarbonil-lizil-propil-valinamid 614 mg (1 mmól) e-terc-butiloxikarbonil-lizilprolil-valinamid-tozilátot [Helv., 46, 870, (1963)] 10 ml vízmentes dimetilformamidban oldunk, és 0,14 ml (1 mmól) trietilamint, majd 274 mg (1 mmól) N-nitrozo-ß-kloretilkarbamoil-p-nitrofenolt és 136 mg (1 mmól) 1-hidroxi-benztriazolt adunk hozzá. Kétórás keverés után a dimetilformamidot vákuumban ledesztilláljuk, a desztillálási maradékot etilacetátban oldjuk, és vízzel kirázzuk. Az etílacetátos fázist vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A visszamaradt olajat vízmentes éterrel eldörzsöljük, szűrjük. A kiszűrt terméket kloroform-metanol 9 : 1 arányú oldószereleggyel szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. A főterméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, az oldószert ledesztilláljuk. A desztillálási maradékot vízmentes éterrel elporítjuk. Termék súlya: 250 mg (43%) Rf: 0,90 (kloroform-metanol 9: 1, VRK Kieselgel G, Merck), Rf: 0,80 (n-butanol-jégecet-víz 4:1:1, Kieselgel G, Merck). Analízis a C22H42N707C1 (576,10) képlet alapján: számított: Cl = 6,15%; N = 17,02% talált: Cl = 6,00%; N = 16,61%. b) a-f N-Nitrozo-N-(fi-klóretil)-karbamoil}-lizilprolil-valinamidhidroklorid 200 mg a-[N-nitrozo-N-(ß-klöretilkarbamoil)]-eterc-butiloxi-karbónil-lizil-prolil-valinamidot [4. példa, a)] 6 ml 0,17 n sósavas hangyasavban szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd az oldatot vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot vízben oldjuk, etilacetáttal kirázzuk. A vizes fázist Iiofilizáljuíc. A termék súlya: 140 mg. Rf: 0,10 (n-butanol-jégecet-víz 4 : 1 : 1, Kieselgel G, Merck). Analízisa QgHjsN^sC^ (512,44) képlet alapján: számított: Cl = 13,84%; N = 19,13% talált: Cl = 13,72%; N = 18,81%. J. példa fi-Klóré tilkarbamoil-tr iptoßl-norleucil-aszparagil-fenil-alaninamid 615 mg (1 mmól) triptofil-norleucil-aszparagilfenil-alaninamid-hidrokloridot [Nature, 207, 1356. (1956)] 6 ml vízmentes dimetilformamidban oldunk, jeges hűtés és keverés közben 0,14 ml (1 mmól) trietilamint, majd 0,1 ml (1,2 mmól) ß-kloretil-izocianätot csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk. A dimetilformamidot vákuumban ledesztillál„juk, és a desztillációs maradékot vízzel eldörzsöljük, szűrjük. Termék súlya: 600 mg (88%). Rf: 0,72 (n-butanol-jégecet-víz 4:1:1, Kieselgel, G, Merck). Op.: 201-202 °C. Analízis a C33H42N707C1 (684,19) képlet alapján: számított: Cl = 5,18%; N = 14,33% talált: Cl = 4,94%; N = 13,78%. 6. példa N-Nitrozo-N- ( fi-klóretil) -karbamoil-triptofilnorleucil-aszparagil-fenilalninamid 684 mg (1 mmól) ß-kloretilkarbamoil-triptofilnorieucil-aszparagil-feniialaninamidot (5. példa) 8 ml 99%-os hangyasavban oldunk, és az oldathoz hűtés és keverés közben 300 mg nátriumnitrit 2 ml vízben készült oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet éjszakán át jégszekrényben állni hagyjuk, másnap vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot vízzel eldörzsöljük, szűrjük, a szűrőn vízzel mossuk. Termék súlya: 605 mg (85%). Rr: 0,.80 (n-butanol-jégecet-víz 4 .1:1, Kiselgel G, Merck). Analízis a CaaH^NgOgCl (713,20) képlet alapján: számított: Cl = 4,97%; N = 15,71%; NO = 4,20% talált: Cl = 4,73%; N = 15,28%; NO = 3,87% Mivel a nitrozo-csoport elnyelési tartományában a peptidnek saját abszorpciója is van, a nitrozocsoport meghatározására Loo és Dión módszerét [J. Pharm. Sei., 54, 809. (1965)] használtuk. 7. példa 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
