187421. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az Aujeszky-féle betegség elleni inaktivált, adjuvált oltóanyag előállítására
1 187 421 2 magasnyomású készülék segítségével stabil emulzióvá alakítjuk, amely 0-+45 °C hőmérséklet közölt nem válik szét. Az ínaktivált és olajos adjuvált vakcinát sterilen üvegekbe töltjük és légmentesen zárjuk. d) Oltási reakció vizsgálata A fentiek szerint előállított vakcinával nyulakat, juhokat, ebeket, két napos, 3 hetes, 8 hetes korú malacokat, valamint vemhességük utolsó harmadában lévő kocákat oltunk izomba ismételten a vakcina 2 ml-es adagjával. A kísérleti vakcinával oltott nyulakat és juhokat 6 hétig, a sertéseket 3 hónapig tartjuk megfigyelés alatt, amely idő alatt semmiféle oltási reakció nem jelentkezik. 2. példa Malacok immunizálása A vakcina 2 ml-es adagjával 2 napos, 3 hetes, 8 hetes korú fogékony malacokat vakcinázunk intramuszkulárisan, 3 hetes időközzel kétszer. A kezeli sertésekben specifikus ellenanyagok keletkeznek, amelyek a vakcinázott állatokat megvédik a 2 x I0f TC1D50 virulens Aujeszky vírussal végzett intrana záiis felületfertőzés során, míg a nem vakcinázott fogékony malacok a felülfertőzés következtében elhullanak. 3. példa Kolosztrális immunitás létrehozása A vakcina 2 ml-es adagjával fogékony vemhes kocákat vakcinázunk 3 hetes időközzel, kétszer, a vemhesség utolsó harmadában úgy, hogy a várható ellés előtt két héttel az immunizálás befejeződjön Az immunizált kocák kolosztrumában specifikus ellenanyagok jelennek meg, amelyek következtében a malacok vérsavójának 7 napos korban mért vírussemlegesítő ti tere átlagosan 1 : 16. Ez az ellenanyagszint a 2 x 10® TCID5o titerű virulens vírussal végzett felülfertőzéssel szemben meglévő védettséget ad. A 30., 60. és 90. napon végzett ellenőrző felülfertőzés 'során a csökkenő szintű kolosztrális ellenanyagokkal rendelkező malacoknak csupán 18, 26, illetve 40%-a hullik el. A nem immunizált kocáktól származó azonos korú kontroll malacoknál ez az elhullás 100%. A tej útján kapott specifikus ellenanyagok tehát megvédik a szopós malacokat a betegség iránt legfogékonyabb életkorban. 4. példa Kolosztrális immunitással rendelkező malacok vakcinálása A 3. példa szerint immunizált fogékony kocáktól származó, kolosztrális immunitással rendelkező malacokat 7 napos és 28 napos korukban kétszer oltjuk a találmány szerint készült vakcina 2 ml-es adagjával. A malacoknál magas titerben (1 :44) keletkeznek specifikus ellenanyagok.. A malacokat 60 napos korukban 2 x 10® TCIDS0 titerü virulens vírussal intranazálisan felülfertőzzük. A kolosztrális alapimmunitással rendelkező, kétszer vakcinázott malacok tünetmentesen átvészelik a felülfertőzést, míg az oltatlan kocáktól származó nem vakcinázott kontroll malacok 100%-a elhullik. Kolosztrális immunitással rendelkező szopós malacok tehát eredményesen immunizálhatok az inaktivált vakcinával. 5. példa Az oltás gyakorisága A 3. példa szerint kétszer vakcinázott fogékony kocák újabb vemhességük alatt egy alkalommal emlékeztető oltásban részesülnek, az 1. példa szerint készített vakcina 2 ml-es adagjával. Az emlékeztető oltás hatására a kocák kolosztrumának specifikus ellenanyagszintje újra magas lesz, így malacaik 2x 10® TCID50 titerű virulens vírussal végzett ellenőrző felülfertőzése alkalmával a 3. példában leírt eredményeket kapjuk. A második vemhesség alatt pótoltásban nem részesült kocák malacai a felülfertőzés során nagyobb %-ban mutatnak elhullást, (6 hetes korban 35%), tehát a megfelelő szintű kolosztrális védelem érdekében az alapimmunitással rendelkező kocákat minden vemhességük idején egy alkalommal pótoltásban kell részesíteni. 6. példa Juhok immunizálása Az 1. példa szerint készített vakcina 2 ml-es adagjával egy, három és hat hónapos korú juhokat immunizálunk, majd az oltás utáni 15. napon 1000 TCIDS0 virulens Aujeszky vírussal felülfertőzzük. A vakcinázatlan kontroll juhok 100%-a elhullik a fertőzés következtében, mit az immunizált juhok tünetmentesen átvészelik a felülfertözést. 7. példa Ebek immunizálása Az 1. példa szerint készített vakcina 2 ml-es adagjával egy hónapos, valamint 6 hónapos korú ebeket oltunk 3 hetes időközzel, kétszer. A második oltás utáni 15. napon a vakcinázott ebeket oltatlan kontroll ebbel együtt 10® TCIDS0 virulens vírussal felülfertőzzük. Az oltott ebek specifikus ellenanyagszintje magas (1 : 32) és a fertőzést tünetmentesen átvészelik, míg az oltatlan kontroll a betegségre jellemző tünetek mellett elhullik. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az Aujeszky-féle betegség elleni inaktivált vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy - az Országos Közegészségügyi Intézetnél 00 236 sz. alatt letétbe helyezett virulens vírustörzzsel nyu-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
