187417. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualin-származékok előállítása sóik formájában
1 187417 2 Oldószer: acetonitril, továbbá 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 7 : 93 térfogatarányú elegye bevitt kiindulási anyag mennyisége: 20 mg összesen hatszor végrehajtott ismételt frakcionálás eredményekképpen 2,3 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-ll-[0-(2-hidroxi-etil)]-spergualin-trihidrokloridot és 2,5 mg mennyiségben fehér por alakjában (+ )-11-[0-(2-hidroxi-etil)]-spergualin-trihidrokloridot kapunk. 26. példa 1 l-(0-Benzil)-spergualin (26. vegyület) előállítása 2,36 g (4,6 millimól) (- )-spergualin-trihidrokloridhoz 90 ml benzilalkoholt és 9 ml, hidrogénkloriddal telített benzinalkoholt adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az így kapott reakcióelegyet 350 ml vízben extraháljuk, majd a vizes fázis pH- értékét 1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal 6,0-ra beállítjuk és ezután bepároljuk. A maradékot 20 ml 1 mólos vizes nátrium-klorid-oldatban feloldjuk, majd a kapott oldatot átbocsátjuk 500 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából álló oszlopon. Az oszlopot egymás után 1,5 liter 0,6 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal, 1,5 liter 0,4 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal és 1,5 liter vízzel eluáljuk. A vízzel eluálódó részt szárazra pároljuk, majd az 1. példában ismertetett módon Sephadex LH-20 márkanevű gyantán sómentesítjük. így 1,92 g (69%) mennyiségben fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk trihidrokloridsóként. E vegyület epimerekre való szeparálása céljából a 22. példában ismertetett nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel lényegében azonos módon járhatunk el, azzal a különbséggel, hogy oldószerként acetonitrilt, továbbá 0,01 mólos nátrium-pentán-szulfonát-oldat és 0,01 mólos dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat (pH 3) 16 : 84 térfogatarányú elegyét használjuk. összesen kilencszer végrehajtott ismételt frakcionálás eredményeképpen így 21,2 mg mennyiségben fehér por alakjában (-)-l l-(Ó-benzil)-spergualintrihidrokloridotés 18,8 mg mennyiségben fehér por alakjában (+)-11 -(O-benzil)-spergualin-trihidrokloridot kapunk. 27. példa (-)-l l-(0-MetiI)-spergualin előállítására a) lépés (— )- l-N,4-bisz(benziloxi-karbonil)-spergualin előállítása 2,3 g (.4,48 millimól) (- )-spergualin-trihidroklorid 11 ml N,N-dimetil-formamid és 11 ml víz elegyéből készült oldatához jeges hűtés közben 1,25 ml (8,96 millimól) trietil-amint, majd ezután 2,24 g (8,97 millimól) N-(benziloxi-karboniloxi)szukcinimid 11 ml N,N-dimetil-formamiddal készült oldatát adjuk. Az így kapott reakcióelegyet 5 °C-on 15 órán át keverjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradékot 10 ml 0,5 mólos vizes nátrium-klorid-oldatban oldjuk és a kapott oldatot előzetesen 0,5 mólos vizes nátriumklorid-oldattal ekvilibrált Diaion HP-20 márkanevű gyanta 400 ml-nyi mennyiségéből álló oszlopon vezetjük át. Az oszlopot először J liter 0,5 mólos vizes nátrium-klorid-oldattal, majd 1 liter vízzel mossuk, ezt követően pedig metanollal eluáljuk, 15 g-os frakciókat szedve. A 21-30. számú frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk, 287 mg (82%) mennyiségben fehér por alakjában a lépés címadó vegyületét kapva hidrokloridsó formájában. Fajlagos forgatóképessége [a]o= - 11° (c=l, víz). 'H—NMR (deuterometanol, delta): 1,3-2,0 (CH2 • 6), 2,38 (CH2), 2,9-3,4 (NCH2 • 5), 4,0 (CH), 5,04 (CH2), 5,07 (CH2), 5,56 (CH) és 7,30 (C6H5 • 2). b) lépés (-)-1 -[N ,4-bisz(benziloxi-karbonil)]-11 -(0- metil)-spergualin előállítása Jeges hűtés közben az a) lépésben ismertetett módon előállított vegyületből 78 mg (0,484 millimól) 12 ml metilén-kloriddal készült oldatához hozzáadjuk 0,1 ml bór-trifluorid-dietil-éter komplex 4 ml metilén-kloriddal készült oldatát, majd az így kapott elegyhez hozzáadjuk diazo-metán metilén-kloridos oldatát, mégpedig 30 perc és 1 óra közötti intervallumokban 1-1-1 ml-eket adagolva, összesen 9 ml-t. (A diazo-metán-oldatot úgy állítjuk elő, hogy 30 ml 40%-os vizes kálium-hidroxidoldat és 100 ml metilén-klorid elegyéhez fokozatosan 10 g N-nitrózó-metil-karbamidot adagolunk, a kapott elegyet 40 °C-on tartva vizes hűtéssel, majd ezután a szerves fázist elválasztjuk és a vizes fázist 10 ml metilén-kloriddal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük és végül szemcsés kálium-hidroxid fölött 5 °C-on 3 órán át szárítjuk.) A reakció kezdete után 3,5 órával a keverést megszakítjuk, majd néhány csepp híg ecetsavoldat adagolását követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot 3 ml 50%-os vizes metanolban oldjuk, majd az így kapott oldatot 100 ml Diaion HP-20 márkanevű gyantából álló oszlopon átbocsátjuk. Az oszlopot 300 ml 10%-os vizes metanollal mossuk, majd metanollal eluáljuk, 15 ml-es frakciókat szedve. A 25-28. számú frakciókat öszszeöntjük, majd szárazra pároljuk, 262,4 mg menynyiségben olyan fehér port kapva, amely a hidrokloridsó formájú címadó vegyület és a reagálatlan kiindulási anyag (a kihozatal 69,2%) keveréke. Ennek a keveréknek az összetételét nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel 4,0 mm átmérőjű és 150 mm hosszú, Nucleosil 5Clg márkanevű anyaggal töltött oszlopon, eluálószerként acetonitril és 0,01 mólos diamino-hidrogén-foszfát-oldat 1 : 1 térfogatarányú elegyét és 0,8 ml/perc átfolyási sebességet használva határoztuk meg. Megállapítható volt, hogy a 10,47 perc retenciós idejű címadó vegyület és a 7,74 perc retenciós idejű kiindulási vegyület aránya 47 : 50. Ebből a keverékből 78,5 mg-ot felviszünk 30 ml Silica Gel 60 márkanevű szilikagélből álló oszlopra, majd 10% metanol és 90% kloroform elegyével eluálást végzünk. Az eluátumot pontosan az előző 5 10. 15 20 25 30 35 40 45 50 55-60 65 24
