187324. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidroxi-alkil-purinok észter-származékainak előállítására
lis lymphocyták növekedésének gátlásában. Az NPT 15 458 képes az egér leukémiás lymphocyták (egy L-1210 sejtvonal) proliferációjának gátlására szövettenyészetben. 10mikrogramm/m! koncentráció esetén az NPT 15 458 40%-ban gátolta az L-1210 sejteket. Végül a 3. táblázatban összefoglalt adatok azt mutatják, hogy normális szervezeti pH-n (7,2) a vegyületek jó kémiai stabilitással rendelkeznek, viszont bázikus pH-értékeken NPT 15 392 „aktív” vegyületekké hasadnak. Mint ez a 9. táblázatból kitűnik, az észterek - különösen az NPT 15 458 - állati szövetekkel inkubálva NPT 15 392-vé hasadnak. Valószínűleg ez az oka annak, hogy a szóban forgó vegyületek („pro-gyógyszerek”) miért rendelkeznek a jelzett biológiai aktivitással. Ezen túlmenően a 10. táblázatban közölt adatok világosan megmutatják, hogy egerekkel végzett kísérletek során a biológiailag „aktív” vegyület - vagyis az NPT 15 392 - legalább 12-szeres vérszintjét érjük el, ha az NPT 15 458-at i. p. úton injektáljuk, mintha magát az NPT 15 392-t adnánk be. Továbbá a 9. táblázatból kiderül, hogy a Verő sejtek (vese), a máj és a HPBL egyaránt biológiailag aktív NPT 15 392-vé hasítják a „pro-gyógyszert”. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek specifikusan gátolják a vírusok replikációját, modulálják (kihangsúlyozzák vagy gátolják) az immunválaszt, valamint gátolják a leukémiás lymphocyták növekedését. Az in vitro kísérletekre, valamint a vegyületekkel az NPT 15 392-höz viszonyítva elért magasabb vérszintre alapozva - az NPT 15 392 a 0,01-100 mikrogramm/ml-es koncentráció-tartományban mutat aktivitást - a hatásos dózis emlősöknél várhatóan 0,0005-50 mg/kg. Kikészítések A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek 1-1000 mg/testsúlykg-os szintnél is aktívak lesznek. Az adagolás történhet tabletták vagy kapszulák formájában embereknek és állatoknak egyaránt, valamint ha az oldhatóság lehetővé teszi, vizes szirupokat, olajos oldatokat, illetve nem oldódó anyagok esetén szuszpenziókat is előállíthatunk. Az alábbiakban ismertetünk néhány jellegzetes kikészítési formát. Kapszula NPT 15 458 0,1-500 mg Avicel pH 101 800 mg-hoz szükséges (mikrokristályos cellu- mennyiségben lóz) Szuszpenzió A hatóanyag vizes szuszpenzióját számos szuszpendálószerrel elkészíthetjük. Ezen szuszpendálószerek közül példaként a következőket említjük meg: nátrium-karboxi-metil-cellulóz, nátrium-alginát, tragakant, Avicel RC-591 (mikrokristályos cellulóz), metil-cellulóz, Veegum és Xanthan gyanta. Ezen túlmenően a készítményekhez hozzáadhatunk édesítőszereket, ízesítőszereket, színezékeket, tartósítószereket, védőkolloidokat és diszpergálószereket is. Szirup NPT 15 458 0,05-250 mg (vagy maximális oldhatóság szintjén) Kukoricacukor 3,25 g Desztillált víz 0,05 PD és C Red 40 0,001 75 g Nátrium-szacharin 0,002 50 g Alkohol U. S. P. 0,08 g Metil-parabén U. S. P. 0,005 g Glicerin 0,001 g Cseresznyeíz 0,312 25 g Gyümölcsíz 0,008 25 g Desztillált víz 5 ml-hez szükséges mennyiségben Tabletta NPT 15 458 0,1-500 mg Avicel pH 101 130 mg Módosított keményítő 20 mg Magnézium-sztearát 5,5 mg U. S. P. Polvinilpirrolidon 22 mg Stearinsav U. S. P. 30 mg Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű hidroxi-alkilpurin-észter-származékok előállítására - az (I) általános képletben R1 jelentése 5-8 szénatomos alkilcsoport, míg R2 jelentése valamely 1-5 szénatomos alkánkarbonsav 2-3 szénatomos a-amino-alkánkarbonsav vagy 2-5 szénatomos alkán-dikarbonsav acilcsoportja azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű hidroxi-alkil-purin-származékot - amelynek képletében R1 jelentése a fenti - valamely 1-5 szénatomos alkánkarbonsavval, - kívánt esetben védőcsoporttal helyettesített - 2-3 szénatomos a-aminoalkán-karbonsavval vagy 2-5 szénatomos alkándikarbonsavval vagy ezen karbonsavak valamilyen reakcióképes származékával, adott esetben kondenzálószer - így például diciklohexil-karbodiimid - jelenlétében reagáltatjuk, majd az adott esetben jelenlevő védőcsoportot hidrolizissel lehasítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási mcdja olyan (I) általános képletű vegyületek - melynek képletében R1 jelentése 5-6 szénatomos alkilcsoport, és R2 jelentése az 1. igénypont szerinti - előállítására, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan (II) általános képletű hidroxi-alkil-purin-származékot alkalmazunk, amelynek képletében R1 jelentése a fenti. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja olyan (I) általános képletű vegyületek - amelynek képletében R1 jelentése az 1. igénypontban megadott, és R2 jelentése valamely 1-5 szénatomos alkánkarbonsav, valamely 2-5 szénatomos a-amino-alkánkarbonsav, vagy valamely 2-5 szénatomos alkándikarbonsav monoészterének acilcsoportja - előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű hidroxi-alkil-purin-származékot, amelynek képletében R1 jelentése a fenti, a megfelelő karbon-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
