187090. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált dipeptidek előállítására
1 187 090 2 9,5 g N - a - (benziloxi - karbonil) - N - e - (tere- butoxi - karbonil) - 1 - lizint és 3,825 g hidroxibenztriazoll adunk jeges fürdőben keverés közben 25 ml dimetil-formamidhoz argongázatmoszférában. Az elegyhez 4,49 g L - prolin - tere - buti! - észtert, majd 2,2 ml N,N - diizopropil - etil - amint és 5,15 g diciklohexil-karbodiimidet adunk, A fürdőt 15 perc múlva eltávolítjuk, és a reakcióelegyet 6.5 óra hosszáig szobahőmérsékleten keverjük. A dimetil-formamidot vákuumban eldesztilláljuk. A maradékot etil-acetáttal oldjuk, és a diciklohexilkarbamidot kiszűrjük. A szűrletet 10 %-os káliumhidrogén-szulfát oldattal és telített vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal semlegesre mossuk. A 13,26 g nyersterméket szilikagéliel töltött oszlopon etil-acetát : hexán (2:1) eleggyeí eluálva tisztítjuk, így 13,0 g 1 - [N - a - (benziloxi - karbonil)- N - e - (tere - butoxi - karbonil) - L - lizil] - L - prolin - tere - butil - észtert kapunk. b) (S) - 1 - {N - a - [3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - butil] - N - e - (tere - butoxi - karbonil) - L - lizil} - L - prolin - tere - butil - észter. Az a) pontban előállított észter-terméket etanolban 10 %-os palládiumosszénnel redukálva 3,99 g 1 - [N - e - (tere - butoxi - karbonil) - L - lizil] - L - prolin - tere - butil - észtert kapunk. Ezt az anyagot 40 ml dimetil-formamiddal oldjuk, és 3,01 g (S) - N - (lebenzil - 3 - klór - 2 - oxo - propil) - benzamidot (a 63.b) példából) és 840 mg nátrium-hidrogénkarbonátot adunk hozzá. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18 óra hosszáig keverjük, utána vákuumban bepároljuk, etil-acetáttal oldjuk, és telített náírium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk. A 7,0 g nyersterméket szilikagéliel töltött oszlopon etil-acetát : metanol (99 : 1) eleggyei eluálva tisztítjuk, így 1,7 g (S) - 1 - {N - a - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - buti!] - N - e - (tere - butoxi - karbonil) - L - lizil} - L - prolin - tere - butil - észtert kapunk. c) (S) - 1 - {N - a - [3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - buti!] - L - lizil} - L - prolin - dihidroklorid. A b) pontban előállított észter termék 1,6 g-ját szobahőmérsékleten 30 percig reagáltatjuk 20 ml 1.5 n ecetsavas sósavoldattal, majd szárazra pároljuk, és dietil-éterrel szilárd anyaggá dörzsöljük szét, így 1,37 g nyersterméket kapunk. Ezt az anyagot vízzel oldjuk, mikropórusos szűrőn szűrjük, és liofilizálva 1,28 g terméket kapunk. További tisztítást LH-20 oszlopon vízben végzünk, így 740 mg (S) - 1 - {N - a - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo- butil] - L - lizil} - L - prolin - dihidrokloridot kapunk, amelynek olvadáspontja 120 — 180 °C. [o]d = -84,8“ (c = 1,05; metanol). A vékonyrétegkromatográfia adatai : szilikagél; kloroform : metanol : ecetsav = 60 : 40 : 38 % 20; Rf = 0,61 (nyom 0,9-nél). Az elemanalízis eredményei a C,sH16N405 • 2HC1 • 3 H20 összegképletre: számított: C % 52,98; H % 6,98; N % 8,83; Cl% 11,17; mért: C % 52,98; H % 6,93; N % 8,66; Cl % 11,31. N - {N - Í(S) - 3 - (Benzoil - amino) - 4 - fen.il - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - N - ciklohexil - glicin - monohidroklorid. a) N-Ciklohexil-glicin-terc-butil-észter. 70,35 ml ciklohexil-amint és 12,9 g nátriumhidrogén-karbonátot szuszpendálunk keverés közben 200 ml vízmentes etanolban, majd keverés közben jeges fürdőben lehűtjük. Az elegyhez 20,78 ml bróm-ecetsav-terc-butil-észtert adunk cseppenként A jeges fürdőt eltávolítjuk. Szobahőmérsékleten 24 óra hosszáig keverjük, majd a reakcióelegyet szárazra pároljuk, kloroformmal oldjuk, és vízzel mossuk. A 42 g nyersterméket szilikagélen etilacetát : hexán (2 : 1) eleggyei eluálva kromatografáljuk, így 27,4 g N - ciklohexil - glicin - tere - buti!- észtert kapunk. b) N - [N - (Benziloxi - karbonil) - L - alanil] - N - ciklohexil - glicin - tere - butil - észter. 4,46 g N-(benziloxi-karbonil)-L-alanint, 4,26 g N - ciklohexil - glicin - tere - butil - észtert, 3,06 g hidroxi-benztriazolt, 4,12 g diciklohexil-karbodiimidet és 2,8 ml tríetil-aminl 40 ml dimetil-formamidban szobahőmérsékleten 20 óra hosszáig keverünk. A reakcióelegyet utána vákuumban bepároljuk, etil-acetáttal oldjuk, a diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szürletet 10 %-os kálium-hidrogénszuifát oldattal és telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal semlegesre mossuk, így 5,9 g nyersterméket kapunk. Ezt dietil-éter : hexán elegyből átkristályosítva 3,97 g N - [N - (benziloxi - karbonil)- L - alanil] - N - ciklohexil - glicin - tere - butil - észterhez jutunk, amelynek olvadáspontja 104- 105 “C. c) N - (L - Alanil) - N - ciklohexil - glicin - tere- butil - észter. 3,9 g b) pontban kapott észter-terméket metanolban oldunk, hozzáadunk 700 mg 10 %-os paüádiumosszén katalizátort, és hidrogénatmoszférában 4 óra hosszáig keverjük. A reakcióelegyet megszűrjük. és szárazra párolva 2,65 g nyers N - (L - alanil)- N - ciklohexil - glicin - tere - butil - észtert kapunk. d) N - {N - [(S) - 3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - butil] - L - alanil} - N - ciklohexil - glicin- tere - butil - észter. 2,6 g c) pontban előállitott észter nyersterméket, 764 mg nátrium-hidrogén-karbonátot és 2,75 g (S)- N - (l - benzil - 3 - klór - 2 - oxo - propil) - benzamidot (a 63. b) példából) 20 óra hosszáig keverünk 25 ml dimetil-formamidban. A reakcióelegyet szárazra pároljuk, etil-acetáttal oldjuk, és telített nátrium-karbonát oldattal mosva 4,7 g nyersterméket kapunk. Szilikagéliel töltött oszlopon etil-acetát : metanol (99 : 1) eleggyei eluálva tisztítjuk, igy 1,5 g N - {N - [(S) - 3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - L - alanil} - N - ciklohexil - glicin - tere - butilésztert kapunk. e) N - {N - [(S) - 3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - butil] - L - alanil} - N - ciklohexil - glicin - monohidroklorid. 500 mg d) pontban előállított észter-terméket 30 pe cig keverünk 5 ml 1,5 n ecetsavas sósavoldattal, és utána szobahőmérsékleten szárazra pároljuk. A nyersterméket metanolban oldjuk, és LH-20 osz-8. példa 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 80 65 9
