187090. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált dipeptidek előállítására
1 i 87 090 2 az oldathoz egy óra alatt egyidejűleg hozzácsepegtetünk 204,5 g (1,2 mól) klór-hangyasav-benzilésztert és 250 ml 4 n nátrium-hidroxid oldatot. A reakcióelegyet éjszakán át keverjük (0 °C-ról szobahőmérsékletre felmelegedve), és 2x500 ml etilacetáttal mossuk. A vizes részt 6 n sósavoldattal pH 2,0-ig savanyítjuk, és 3 x 600 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített etil-acetátos extraktumokat nátrium-szulfáton szárítjuk, rotációs bepárlón bepároljuk, és a szilárd maradékot petroléterrel eldörzsölve 194,0 g N-(benziloxi-karboni!)-L-alanint kapunk fehér, szilárd anyagként. b) N-(Benziloxi-karbonil)-N-meti!-alanin. 22,3 g (0,1 mól) N-(benziloxi-karbonil)-L-alanin és 50 ml (0,8 mól) metil-jodid 250 ml tetrahidrofuránnal készült 0 °C-os oldatához élénk keverés közben óvatosan 14,25 g (0,3 mól) nátrium-hidrid diszperziót adunk. A szuszpenziót éjszakán keresztül nitrogénatmoszférában keverjük, közben hagyjuk 0 °C-ról szobahőmérsékletre felmelegedni. Lassan beleöntjük 200 ml telített vizes nátrium-hidrogénkarbonát oldatba, 300 ml etil-acetáttal hígítjuk, és a rétegeket elválasztjuk. A szerves réteget mégegyszer extraháljuk telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal. Az egyesített vizes rétegeket 10 %-os kálilum-hidrogén-szulfát oldattal pH 2,0-re savanyítjuk, és etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített etil-acetátos extraktumokat nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. így 23,0 g sötétszínű olajos maradékot Kapunk. Ezt a nyers savat 150 ml dietii-éterben 20 ml diciklohexil-aminnal elegyítjük. A kapott nyers diciklohexil-ammóniumsót kiszűrjük, a 37,0 g anyag kloroform/dietil-éter elegyből végzett átkristályosításával kapott 35,0 g anyagot 1 n sósavoldattal és etil-acetáttal rázva visszaalakítjuk a savvá. A bepárlás után kapott 17,4 g halványsárga olaj állás közben megkristályosodik. 11,2 g-ot etil-acetát/peíroléter elegyből átkristályosítva 4,0 g N - (benziloxi - karbonil) - N - melil- L - alanint kapunk fehér, kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 65-66,5 °C. [a]o = -31,1° (c = 2; ecetsav). c) 1 - [N - (Benziloxi - karbonil) - N - metil - L - alanil] - L - prolin - tere - butíl - észter. 4,74 g (20 mmól) N - (benziloxi - karbonil) - N - metil - L - alanin 50 ml desztillált tetrahidrofuránnal készített oldatához 3,42 g (20 mmól) L - prolin- tere - butil - észtert, 3,06 g (20 mmól) hidroxibenztriazol-hidrátot és 4,12 g (20 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk. A reakcióelegyet éjszakán keresztül keverjük, a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szürletet bepároljuk. A maradékot 50 ml etil-acetátban oldjuk, és telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal kétszer, 10 %-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal kétszer és vízzel kétszer mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepárolva 6,4 g 1 - [N - (benziloxi - karbonil) - N - metil - L - alanil] - L - prolin - tere - butil - észtert kapunk olajos maradékként. d) 1 - (N - Metil - L - alanil) - L - prolin - tere- butil - észter. A c) pontban előállított 6,4 g (16,4 mmól) észtertermék és 0,8 g 10 %-os palládiumosszén 150 ml 95 %-os etanollal készített elegyét éjszakán keresztül hidrogénezzük atmoszferikus nyomáson. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szürletet bepároljuk. A kapott olajos maradék nagyvákuumban szárítva 3,8 g olajos szilárd maradékká dermed át. Dietil-éterrel eldörzsölve 1,5 g 1 - (N - metil - L - alanil) - L - prolin - tere - butil - észter - monohidrokloridot kapunk fehér, szilárd anyagként. Rf = 0,44; szilikagél; metanol/kloroform (2 : 8). Md = - 102,1° (c = 2; ecetsav). Az éteres szűrletből 2,3 g 1 - (N - metil - L - alanil) - L - prolin - tere - butil - észtert kapunk olajként. Rf = 0,44; szilikagél; metanol/kloroform (2 : 8). [u]p = — 101,6° (c = 2; ecetsav). e) (S) - 1 - {N - [3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - butil] - N - metil - L - alanil} - L - prolin - tere - butil - észter. 2,1 g (8,19 mmól) 1 - (N - metil - L - alanil) - L - prolin - tere - butil - észter, 2,46 g (8,19 mmól) (S)- N - (1 - benzil - 3 - klór - 2 - oxo - propil) - benzamid (a 63. b) példából), fölös mennyiségű nálrium-hidrogén-karbonát és 1,22 g (8,10 mmól) nátrium-jodid 15 ml dimetil-formamiddal készített elegyét szobahőmérsékleten éjszakán keresztül keverjük nitrogénatmoszférában. A reakcióelegyet bepároljuk, a maradékot vízzel és etil-acetáttal rázzuk össze, a rétegeket elválasztjuk, és a vizes réteget mégegyszer extraháljuk etil-acetáttal. Az egyesített szerves extraktumokat telített nátrium-hidrogénkarbonát oldattal és vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 3,5 g olajos maradékot kapunk. Ezt 200 g szilikagélle! töltött oszlopon 1 % metanolt tartalmazó etil-acetáttal eluálva krematografáljuk, így 2,8 g (S) - 1 - {N - [3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - N - metil - L - alanil} - L - prolin - tere - butil - észtert kapunk sárga olajként. f) (S) - 1 - {N - [3 - (Benzoil - amino) - 4 - fenil- 2 - oxo - butil] - N - metil - L - alanil} - L - prolin - monohidroklorid. 1,4 g (2,7 mmól) e) pontban kapott észter-terméket 20 ml 2 n ecetsavas sósavoldattal elegyítünk. Szobahőmérsékleten 2 óra hosszáig keverjük, utána a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a kapott olajos maradékot dietil-éterrel négyszer eldörzsöljük, igy 1,05 g (S) - 1 - N - {[3 - (benzoil - amino) - 4 - fenil - 2 - oxo - butil] - N - melil - L - alanil} - L - prolin - monohidrokloridot kapunk csaknem fehér, szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja 125- 135 °C. A vékonyrétegkromatográfia adatai : szilikagél; butanol : ecetsav : víz = 4 : 1 : 1; Rf = 0,24. Md = -87° (c = 1; metanol). Az elemanalízis eredményei a C,6H?lN305 • HC1 • 0,7 H20 összegképletre: számított: C % 60,68; H % 6,41; N % 8,16; Cl % 6,88; mén: C% 60,68; H %6,36; N % 7,95; Cl % 6,48. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
