187046. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérjekészítmény előállítására élelmiszeripari célokra
t 2 187.046 ■ezubsztrát arány mellett 0,40 AU aktivitású Corolase PS (Rőhm) enzimet adunk hozzá. 40 percig kezeljük, majd koncentrált sósavval 4,0 pH-értékre állítjuk be. Savas közegben 3000 f/min mellett 30 percig centrifugáljuk. A kiülepített hemintől elválasztott globin-oldatot 65 °C-on 10 percig tartjuk az enzim inaktiválása céljából. Az inaktivált oldatot liofilezzük, 5,4 g világos színű port kapunk, melynek jellemzői: fehérjetartalom: 82% hamutartalom: 6% maradék hemin:0,78 mg/g világossági tényező Y = 29,5 szabad aminosav-tartalom: 15% 7. példa Az 1. példa szerint kinyert 25 cm3 sűrűvért 1:3 arányban vízzel hígítjuk, 5 N nátriumhidroxid oldattal 10,5 pH-értékre álltjuk be. Az oldatot 120 percig mágneses keverővei kevertetjük. Ezt követően 55 °C- ra felmelegítjük és 1:40 enzim-szubsztrát arány mellett 0,4 AU aktivitású Thermitase enzimet adunk hozzá 6,8 pH-értéken. 120 perces enzimatikus kezelés után koncentrált sósavval 4,0 pH-értéket állítunk be és a rendszert 3000 f/min mellett 30 percig centrifugáljuk. A kiülepedett heminről a felülúszó fehérjeoldatot le önjük és az enzimet 85 °C-on 15 percig inaktiváljuk. Az Ínaktivált oldatot liofilezzük, az így kapott 5 g termék jellemzői : fehérjetartalom: 80% hamutartalom: 10% maradék hemin: 0,88 mg/g világossági tényező Y = 28,8 szabad aminosav: 16%. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás élelmiszeripari célokra közvetlenül használható fehérjekészítmeny előállítására, étkezési minőségű vérből kiindulva hemolizis és enzimatikus bontás útján, azzal jellemezve, hogy az ismert 6 módon hemolizált vért lúgos közegben 10-11 pH-értéken denaturáljuk, a denaturált hemoglobint molekuláris oxigén jelenlétében parahematinné oxidáljuk, oxidáció után 1:100-1:2- enzim-szubsztrátum arány mellett lúgos vagy semleges közegben működő proteolitikus enzimmel bontjuk, az enzimatikus bontás '0 után a közeget 4,0-5,2 pH-értékre állítjuk be és a hemint a globintartalmú oldattól elkülönítjük, a globin-fehérje oldat enzimatikus aktivitását hőkezeléssel megszüntetjük, adott esetben pedig a fehérjeoldatot kíméletes körülmények mellett víztelenítjük.-e 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítás! * 'J módja, azzal jellemezve, hogy a denaturált és oxidációt egylépésben kevertetés közben 10-120 percig kívánt esetben pótlólagos levegő befúvatása mellett végezzük. 3. Az 1. és 2. igénypont szerinti eljárás foganatosl- 20 tási módja, azzal jellemezve, hogy a hemolizált anyag enzimatikus bontásához lúgos vagy semleges közegben működő proteolitikus enzimeket használunk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy olyan enzí-25 meket használunk, amelyeknek preferált hasítási helyei a hisztidin, leudn, glicin, fenialanin vagy alanin kötésnél vannak. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az enzimatikus bontás után a közeg proteoliti-3U kus aktivitását hőkezeléssel O Anson egységre állítjuk be. 6. Az 1: igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzaljellemezve, hogy a fehérjeoldatot fagyasztjuk, liofilezzük vagy porlasztó szárításig nak vetjük alá. rajz nélkül Kiadja:Országos Találmányi Hivatal Felelős kiadó: Himer Zoltán o.v. KÓDEX 4