186749. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, biológiailag aktív peptidek előállítására
1 186 749 2 A találmány tárgya eljárás új, biológiailag aktív peptidek és azok fiziológiailag elfogadható sóinak az előállítására. Az új peptidek az (1) általános képletnek Y I X-Tyr-A-Phe-B-C-W (I) felelnek meg. Az (I) általános képletben X jelentése hidrogénatom vagy terc-butoxi-karbonílcsoport, Y jelentése hidrogénatom vagy benzilcsoport, A jelentése D-Ala vagy' — amennyiben B = Gly és C vegyi kötés vagy Tyr-Pro-Ser tripeptid A jelentése D-Met: vagy D-Mct(o) is lehet, B jelentése Gly vagy — amennyiben C jelentése vegyi kötés, Tyr, Tyr(Bzl)-Pro-Ser vagy Tyr-Pro-Ser tripeptid B jelentése Sár, Phe, Pro, MePhe is lehet, C jelentése vegyi kötés vagy Tyr-Pro-Ser vagy Tyr, D-Tyr, Ser, Pro, Leu, Met (Met(o), Tyr-Ser, Tyr-' Pro, Trp-Pro-Ser, Gly-Pro-Ser- Phe-Hyp-Ser, Phe (NOíj-Pro-Ser, Phe(F)-Pro-Ser, Phe-Pro-Ser, Tyr- Gly-Ser, Pha-Pro-Ser, Tyr-Val-Ser, Tyr-liyp-Ser, Tyr-Ppa-Ser, Tyr-D-APr-Ser, Tyr-Tia-Scr, Tyr-APr- Ser, Tyr-Pro-Abu, Tyr-Pro-Gly, Cha-Pro-Ser, Pro- Ser vagy Nva is lehet, adott esetben a Tyr vagy Ser csoport hidroxilcsoportja benzilcsoporttal védett, W hidroxilcsoportot, aminocsoportot, hidrazinocsoportot vagy --NHR, illetve —NHNHR' általános képletű csoportot jelent, ahol R jelentése 1—4 szénatomos alkilcsoport, adamantilcsoport vagy 2,2,2-trifiuorcíücsoporí és R' jelentése benzoxikarbonil-, adamantíl-oxikarbonil-, terc-butiloxikarbonil-, 2-5 szénatomos alkaitoü-, lauvoil-, benzoil-, D-tiroz.il-, D-(N-terc-butiloxikarbonií)-tiroz.il vagy fenilcsoport. Az alábbiakban az L-aminosavakat nagy kezdőbetűvel, a D-aminosavakat kis kezdőbetűvel jelöltük. A találmány az (i) általános képletű vegyilletek farmakológiailag elfogadható sóira, így trifluorecetsavval, hidrogénfiuoriddal, ecetsavval, sósavval, hidrogénbromiddal képezett sóira is kiterjed. Az (I) általános képletű peptideket vagy a peptidkémiában szokásos módszerek segítségével, vagy szilárd fázison, így polimerhordozón történő szintézissel állíthatjuk elő. Mindkét módszerre kiviteli példákat adunk. A klasszikus megoldás iényegében védett aminosavak vagy peptidek rendre történő kondenzálásából áll. A kondenzációt úgy vezetjük, hogy a kapott peptidekben a kívánt 4-7 aminosav-csoport a kívánt sorrendben kapcsolódjék. A polipcptid-kémiában szokásos módon kondenzált aminosavakat és peptideket a peptid-kötés kialakulásában részt nem vevő amino- és karboxil-csoportjaíkban alkalmas védőcsoportokkal védjük. A hidroxilezett aminosavak hidroxi-csoportjai az egész szintézis alatt vagy csak néhány szintézis-lépésben alkalmas védőcsoportokkal védve lehetnek. A védöcsoportokat acidolízis, elszappanosítás vagy hidrogenolízis segítségével távolítjuk el. Az aminocsoport megvédésére például az alábbi csoportok alkalmasak: bcnziloxikarbonil- (Z), terc-butiíoxikarbonii- (Boc). tritil-, forrni!-, triíluoracetil-, o-niirofeníl-szulfenii-csoport. A karboxilcsoportok megvédésére például metil-, etil-, terc-butil-, benzil-, p-nitrobenzil-csoporíot alkalma- 5 zunk. A hidroxi-csoportok megvédésére alkalmas védőcsoportok az alábbiak: acetii-, terc-butiloxikarbonil-, benziloxikarbonií-, 2-brómbenziloxikarbonil-, tetrahidropiranil-, terc-butil-, 10 tritil-, benzil-, 2,4-diklórbenzil-csoport. A pcptid-köiésl eredményező kondenzáció közben az egyik molekula aminocsoportja reagál egy másik molekula karboxil-csoportjával. Az aminosavaí vagy pepiidet aktív acil-származék, így' például vegyes anhidrid, 15 azid vagy aktív észter alakjában vihetjük reakcióba, de lehetséges szabad aminosav és szabad karboxilcsoport kondenzáló szer, így dicikiohexil-karbodiimid jelenlé tőben végzett kondenzálása is, amikoris valamilyen, a racemát-képzcídést gátló anyagot, például N-hidroxiszuk- 20 cinimid vagy 1-hidroxibenzotriazolt is adhatunk az elegyhez. A kondenzálást oldószeres közegben, ig>4 dimetilformamidban, piridinben, acetonitrilben, tetrahidrofuránban végezhetjük. 25 A reakcióhőmérséklet -30 °C cs szobahőmérséklet közötti érték. A reakcióidő Î és 120 óra között ingadozik. A reakció módját, a vcdőcsoportokat és a kondenzáló szert úgy választjuk meg, hogy racemát ne képződjék. 30 a vcdőcsoportokat a pclipeptíd-kémiábsn szokásos módszerek segítségével távolítjuk cl, W szuhsztitucns helyen -OR csoportot hordozó peptidek előállításához például a megfelelő alkohollal észteredet! C-terminális amincsavtól indulunk ki, W csoport- 35 ként h.idroxicsoportot hordozó peptideket, például a W csoportként -OR csoportot hordozó peptidek hidrolízisével állíthatunk elő. Az olyan peptidek, amelyekben W jelentése -NH2, -NHR vagy -NR2, a megfelelő észterek ammor.olízisével nyerhetők. 40 a sziiárdíázisú szintézisben polimer hordozót alkalmazunk, Polimerként előnyösen sziirol és i -2 sú!y% dhinil benzol ko polimer] ét alkalmazunk; a diviniibenzol hatására a polisztirol a legtöbb szerves oldószerben teljesen oldhatatlanná válik. 45 a szintézist a pepiid terminális C-atomjánál kezdjük úgy, hogy a kívánt aminosavaí valamilyen klórmctilezett gyanlához. hidroximetilgyantáboz vagy benzhidrilamlngyantához kapcsoljuk. Az aminocsoportok és oldalláncok védőcsoportjai a 50 klasszikus eljárás ismertetése során felsoroltak. Az (I) általános képletű vegyületek előállításálroz az aminocsoportjában védett aniinosavat például ceziumbikavhonát-kaializátor segítségével a klórmetilezett gyantához, vagy kondenzáló szer, így dicikiohexil-karbodiimid 55 jelenlétében a hidroximetil- vagy benzhidrilamin-gyantához kapcsoljuk. Utána az aminocsoport védőcsopcrtját alkalmas vegyszerekkel (trifiuorecetsav vagy sósav szerves oldószeres oldatával) szobahőmérsékleten eltávolítjuk. l:zt kővetően a védett aminosavakat lépésenként, a 60 kívánt sorrendben kondenzáljuk, így a kívánt pepiid keletkezik. A védett aminosavakat általában háromszoros feleslegben. alkalmas karboxilcsoport-aktiváló katalizátor, így diciHohexil-karbodiimid jelenlétében, oldószeres kezeg- 55 2
