186734. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek enzimatikus előállítására

734

h) A-OR1 általános képletű - mely képletben A jelentése azonos a fentiekben megadottakkal, R1 jelentése 1-4 szénatomos alkii- vagy feníI-( I —4 szénatomos a!kii)-csoport vagy egy aminosav alfa-dezamino fragmense — aminosav-észter peptid-észter, depszi- 5 peptid,

b) ANH2 képletű - mely képletben A jelentése a már megadott — aminosav-amid és peptid-amid,

c) A-X általános képletű - mely képletben A jelentése azonos a fentiekben megadottakkal és X jelentése 1 0 egy aminosav, adott esetben N-terminálisan védett peptid,

az alábbi vegyületek valamelyikével mint amin-komponenssel '5

a) H-B-OH általános képletű L-aminosav- amelyben B jelentése a tárgyi körben megadott,

b) adott esetben N-szubsztituált, H-B-NR3R3’ általános képletű - mely képletben B jelentése aminosav- 20 maradék és R3 és R3’ jelentése hidrogénatom, hídroxi-, amino-csoport - L-aminosavamid,

c) H-B-OR4 általános képletű — mely képletben B

jelentése aminosavmaradék és R4 jelentése 1-4 szénatomos alkil-csoport - aminosav-észter, 25

L-specifikus szerin- vagy tiol-karboxipeptidáz enzim jelenlétében, 5 és 10,5 közötti pH-jú vizes oldatban vagy diszperzióban, előnyösen 20 °C és 50 °C közötti hőmérsékleten reagáltatunk cs kívánt esetben a keletkezett 30 pepiidről az R4 vagy N-terminális védőcsoportot lehasítjuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja,

azzal jellemezve, hogy karboxipeptidáz enzimként élesztőből származó karboxipeptidáz-Y-t alkalmazunk. 35

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja.

azzal jellemezre, hogy csírázó árpából származó karboxi-. pcp:idáz-Y-t alkalmazunk.

4. Az !. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy karboxipeptidáz enzimként egy immobilizált karboxipeptidáz enzimet alkalmazunk.

! Az i. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az oldat pH-ját 8 és 10,5 között tartjuk.

Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót 8,0 és 10,5 közötti pH-jú ptiífer-oídalban, kívánt esetben pH 8,0 és 10,5 közötti pH-tartományban végezzük, és a pH-értéket a reakcióelegy pH-jának mérésével, sav vagy bázis hozzáadásával konstans értéken tartjuk.

7. Az I. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy reakcióközegként 0-50 % szerves oldószert tartalmazó vizes oldatot használunk.

8. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy szerves oldószerként 1—4 szénák mos alkanolokat vagy policíilcn-gükolt alkalmazunk,

9. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót a szubsztrátkomponens (),( 1 — I mól és az amin-komponens 0,05-3 mó! kezdeti koncentrációjával végezzük.

'0. A 9. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót 10'6-I0"4 mól karboxipeplidáz koncentrációval végezzük.

11. Az Î. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy szubsztrát-komponensként olyan aminosav- vagy peptidésztert alkalmazunk, ahol az észter-képző metil- vagy etilcsoport.

12. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy amin-komponensként H-B-OR4 általános képletű - mely képletben R4 jelentése metil-. etil-, propil- vagy izopropil-csoport - észtert alkalmazunk.

5 db ábra