186729. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív pentapeptid-származékok előállítására
1 186 729 2 lényege az, hogy a hatóanyagot összekeverjük az egy vagy több segédanyagot tartalmazó hordozóanyaggal. Ezt általában úgy hajtjuk végre, hogy a finoman és egyenletesen eloszlatott hatóanyagot összekeverjük egy folyékony hordozóval, egy finoman eloszlatott szilárd hordozóval, vagy ezek elegyével, majd, ha szükséges, a terméket a kívánt formájúra alakítjuk. A találmány szerinti vcgyületckből előállított gyógyszerkészítmények orális beadás céljára lehetnek azonos mennyiségű hatóanyagot tartalmazó egységek, például tabletták vagy kapszulák vagy ostyák, porok vagy granulátumok; ezenkívül lehetnek folyékony halmazállapotúnk is, például oldatok, vizes vagy nemvizes szuszpenziók, és olaj/víz vagy víz/olaj típusú emulziók. A hatóanyag adagolható nagyobb pirulák, szirupok vagy kenőcsök formájában is. A tabletták előnyösen préseléssel vagy sajtolással állíthatók elő, egy vagy több adalékanyag alkalmazásával. A préselt tabletták megfelelő gép segítségével állíthatók elő, melybe a hatóanyagot szabadon folyó formában, például porként vagy granulátumként adagoljuk be, előnyösen kötő-, kenő-, közömbös hígító-, síkosító-, felületaktív vagy diszpergálóanyagokkal összekeverve. A sajtolt tablettákat erre a célra szolgáló berendezés segítségével lehet előállítani úgy, hogy a porrá tört komponenseket megnedvesítjük egy közömbös, folyékony halmazállapotú hígítószerrel. Rektális beadás céljára szuppozitóríumokat állíthatunk elő az általában használt hordozóanyagok, úgymint kakaóvaj alkalmazásával, míg nazális beadás céljára az aktív anyagot vizes vagy olajos oldatban tartalmazó orrcsepp a legalkalmasabb. A szájban való helyi alkalmazás céljára legmegfelelőbbek a hatóanyagot valamilyen ízesített hordozóval, például szacharózai, akáciagumival vagy tragantgyantával keverten tartalmazó szögletes tabletták vagy a ható-’ anyagot és valamilyen közömbös hordozót, például zselatint tartalmazó, vagy glicerin-, szacharóz- vagy akáciagumi-tartalmú pasztillák. Vaginális beadás céljára pesszáriumok, krémek, paszták vagy spray-k formájában legalkalmasabb formulázni a hatóanyagot valamilyen, az irodalomban leírt hordozóanyaggal kombinálva. A parenterálisan beadható készítmények előnyösen a hatóanyag steril vízzel készített oldatai, melyek előnyösen a kezelt vérével ízotóniásak. Ezek az oldatok előállíthatok a szilárd hatóanyag vízben való feloldásával és a kapott oldat sterilizálásával és a kezelt vérével izotóniásra állításával. Legcélszerűbben egy vagy több adagot tarttalmazó formában szerelhetők ki, ampullák formájában. Nazális beadás céljára olyan készítmények is előállíthatok, melyekben a hordozó szilárd anyag; a kapott, 20-500 mikron részecskeméretű porokat a tubákhoz hasonló módon, azaz az orrhoz közel tartott dobozból való gyors felszippantással juttatják az orrüregbe. Az előbb felsorolt adalékanyagokon kívül a találmány szerinti vegyületeket hatóanyagként tartalmazó készítmények más adalékanyagokat is tartalmazhatnak, például hígítószereket, puffereket, ízesítőanyagokat, kötőanyagokat, sűrítőanyagokat, síkosítóanyagokat, konzerválóanyagokat (beleértve az antioxidánsokat is) és más hasonló adalékokat. Ha a formulázás, akár ember-, akár állatgyógyászati készítmény előállítására, egységadagok formájában történik, például a korábban leírt kiszerelési módok valamelyikében, minden egyes egységadag előnyösen 0,125 /rg-2 g, még célszerűbben 1,25 ;ug-200 mg, legelőnyösebben 12,5 jxg-20 mg hatóanyagot tartalmaz (peptid bázisra számítva). A találmány szerinti megoldást a következő példákkal kívánjuk szemléltetni, anélkül, hogy oltalmi körét a példákra kívánnánk korlátozni. Alkalmazott rövidítések és vizsgálati módszerek A példákban a következő rövidítéseket alkalmazzuk: HOBT 1-hidroxi-benzotriazol DDC1 diciklohexil-karbodiimid DCU diciklohexil-karbamid NMM N-metil-morfoIin DMF dimetil-formamid Pr i-propanol Pr20 di-izopropil-éter Pe petroléter EtOAc etil-acetát Z benzil-oxi-karbonil-csoport Bu terc-butil-csoport BOC tcrc-butil-oxi-karbonil-csoport Bzl benzilcsoport THF tetrahidrofurán DCHA diciklohexil-amin A nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárás jellemzői: Oszlop: Zorbax C-8, 4,6 mm x 25 cm Mozgó fázis: Acetonitril/0,1 Mammónium-acetát, pH 4,0 Átfolyási sebesség: 2 ml/perc Detektálás: 254 nm A peptideket vékonyréteg-kromatográfiásan mutatjuk ki, Merck szilikagél-lemezeken, a következő oldószenendszereket alkalmazva futtatószerként: 1 metil-etil-keton 2 n-butanol : ecetsav : víz = 3:1:1 3 kloroform : metanol : 32 %-os ecetsavoldat = = 120:90:40 4 kloroform : metanol : 32 %-os ammóniaoldat = = 120:90:40 5 n-butanol : ecetsav : etil-acetát : víz = 1:1:1:1 6 kloroform : metanol = 1:1 7 kloroform : metanol : 32 %-os ecetsavoldat = = 120:90:5 8 kloroform : metanol : 32 %-os ammóniaoldat = = 120:90:5 Az optikai forgatókepességet Bendix NPL típusú automata polariméteren mértük. A peptid hidrolizátumok aminosav-összetételét (hidrolízis 6n sósavoldattal, 110 °C-on, 24 órán keresztül, légtelenített lezárt csövekben) Beckman-Spinco Model 1200 aminosavanalizátorra! vagy Rank Chromostak aminosavanalizátorral határoztuk meg. A peptidek szintézise során a következő, általánosan ismert módszereket alkalmaztuk: a) A kondenzálást DMF-ben, DCC1 jelenlétében hajtottuk végre. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
