186155. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérjehidrolizátum és azok frakcióinak előállítására
186155 2 kalase 0,6 L (Fa. Novo) enzimet adunk hozzá, majd keverés közben 45 °C-on 15 percig inkubáljuk. Az enzim inaktiválása céljából az elegyet 5 percig 90 °C-ra hevítjük, pH-ját 7,0-ra állítjuk be, és a szuszpenziót megszárítjuk. 2. példa 100 g mikroba-eredetű proteinizoiátumot, amelynek nukleinsav- és zsírtartalmát a 2633 666. sz. NSZK közzétételi iratban ismertetett módon csökkentettük, 900 ml vízben szuszpendálunk, és pH-ját 4 n nátrium-hidroxid segítségével 8,0-ra állítjuk be. A szuszpenziót 45 °C-ra melegítjük, és 10Q mg Trypsin PTN 3,OS (Fa. Novo) enzimet adunk hozzá, majd konstans pH-értéken 4 óra hosszat 45 °C-on keverés közben extraháljuk. Az enzim inaktiválása céljából az elegyet 5 percig 80 °C-on tartjuk, pH-ját 7,0-ra állítjuk be, és a szuszpenziót megszárítjuk. 3. példa A 2. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a proteolízist 150 mg Trypsin- Chimotrypsin 2/1S (Fa. Novo) enzimeleggyel végezzük. 4. példa A 2. példa szerinti eljárással nyert hidrolizátumot a szárítás előtt Hollow-Fiber ultraszűrő berendezéssel (Fa. Amicon DC-2), amely 100000 Dalton (HIP 100) határértékű patronokkal van felszerelve, ultraszűrésnek vetjük alá. Az áteresztett részt és a maradékot elválasztjuk, összegyűjtjük és szárítjuk. 5. példa 1 kg mikroba-eredetű proteinizoiátumot, amelynek nukleinsav- és zsírtartalmát a 2633 666. sz. NSZK közzétételi iratban ismertetett módon csökkentettük, 91 vízben szuszpendálunk, és pH-ját 4 n nátrium-hidroxid segítségével 8,0-ra állítjuk be. A szuszpenziót enzimreaktorban 45 °C-ra melegítjük és 1 g Typsin PTN 3,0 s (Fa. Novo) enzimet adunk hozzá, majd konstans hőmérséklet és pH-érték mellett keverés közben inkubáljuk. 30 perc inkubálás után a reaktor külső keringető feltétét egy 5000 Dalton határértékű (H 10 P5) patronnal ellátott Hollow-Fiber ultraszűrőberendezéshez (Fa. Amicon DC—10) kapcsoljuk. A visszamaradó részt az enzimreaktorba visszavezetjük, a folyadéktérfogatot vízzel korrigáljuk. Az áteresztett részt összegyűjtjük és megszárítjuk. Az inkubálás végén az enzimreaktorban levő enzimet hevítéssel (5 perc/80 °C) inaktiváljuk és a visszamaradó részt megszárítjuk. 6. példa Az 1—5. példákban előállított mikroba-eredetű proteinhidrolizátumokat oldhatósági tulajdonságaik szempontjából vizsgáljuk: 100 ml 10%-os szuszpenzió pH-ját sósavval, illetve nátrium-hidroxiddal a kívánt értékre állítjuk, rövid ideig homogenizáljuk, és egy előre lemért centrifugacsőben 1500 g-nál centrifugáljuk. A felülúszót dekantáljuk, és a szedimentumot 100 °C- on súlyállandóságig szárítjuk. A centrifugacsövet a maradékkal lemérjük, és az oldhatóságot számoljuk. Példaszám Frakció Oldhatóság (°7o) pH = 3,0 pH = 5,0 pH = 7,0 1 — 81 85 97 2 — 77 90 91 3 — 85 94 98 4 áteresztett 100 100 100 visszamaradt 71 68 90 5 áteresztett 100 100 100 visszamaradt 73 70 91 7. példa Az 1—5 példákban előállított proteinhidrolizátumokat habosíthatósági szempontból vizsgáljuk : 25 ml %-os szuszpenzió pH-ját sósav, illetve nátrium-hidroxid segítségével a kívánt értékre állítjuk be, és 500 ml-es mérőhengerben labor-homogenizátorral („Ultraturrax” Fa. Jahnke és Kunkel, T45 típus) 1 percig habosítjuk. Meghatározzuk a habosítási számot és a felezési időt. habtérfogat (ml) Habosítást szám =-------------------kiindulási térfogat (ml) (Lin. M. J. Y.; Humbert, E. S.: J. Food Sei. 39, 368 /1974/). Felezési idő: az az idő, amely alatt a kiindulási folyadéknak 50%-a ismét kicsapódik a habból. (Satterlee, L. D.; Zachariah, vin, E.: J. Food Sei. 38, 268 /1973/). N. Y.; Le-Példaszám Frakció 3 Habosítási szám 4 5 6 7 8 pH 1 — 4,0 4,2 4,6 4,3 4,2 3,9 2 — 4,5 5,5 5,8 6,0 6,2 4,5 3 — 5,0 5,6 7,0 6,5 6,0 5,4 4 áteresztett 12,8 15,2 15,6 15,6 16,0 14,8 visszamaradt 2,1 1,9 1,5 2,4 2,4 2,4 5 áteresztett 11,9 14,8 15,2 15,8 15,3 14,5 visszamaradt 2,4 2,1 1,9 3,0 2,9 2,4 Példa-Felezési idő (perc) szám Frakció 3 4 5 6 7 8 pH 1 — 48 115 17 15 14 10 2 — 300 210 150 40 20 15 3 — 300 95 43 31 24 18 4 áteresztett 120 114 97 35 42 20 visszamaradt 1000 1000 1000 1000 5 2 5 áteresztett 123 118 105 37 40 23 visszamaradt 1000 1000 1000 915 7 4 8. példa Az 1—5. példákban előállitott proteinhidrolizátum emulgeálhatóságát vizsgáljuk: 20 ml oldat (10, 5, 1, 0,5%) pH-ját sósav, illetve nátrium-hidroxid segítségével a kívánt értékre állítjuk be, és 60—80 ml napraforgóolajjal labor-ho-5 13 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
