185969. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5,6-O-izoalkilidén- aszkorbinsav-származékok előállítására
1 185 969 2 adunk az elegyhez, megkeverjük, majd ülepedni hagyjuk. A folyadékot dekantáljuk. a szilárd anyagot 100— —100 ml 4:7 térfogatarányú aceton. hexán eleggyel ismételten addig mossuk, míg a hidrogén-kloridot teljesen el nem távolítottuk. 91%-os hozammal 11,3 g terméket nye- g rünk, melynek olvadáspontja 220 °C (az irodalmi érték 222 °C), a termék szekezetét infravörös és magmágneses rezonancia spektrumokkal ellenőriztük. b) Scorbethán — a 2-klór-etil-izocianát és 5,6-0-izopro- iq pilidén-aszkorbinsav reakcióterméke — előállítása. 2,16 g (0,01 mól), az a) eljárás szerint előállított 5,6-0-izopropilidén-aszkorbinsavat 10 ml vízmentes acetonban szuszpendálunk, majd a reaktort nitrogéngázzal átöblítjük. Az elegyhez 4,4 g (0,04 mól) 2-klór-etil-izocianátot adunk és visszafolyatás mellett 65 órán át forraljuk. Ezután az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a visszamaradt vegyület kálium-hidroxjdon 48 órán át szárítjuk. A magmágneses rezonancia spektrumban szingulettet (6H) észleltünk 1,3 ppm-nál, multiplettet (9H) 20 3,7 ppm-nél és (4H) 4,1 ppm-nél. Az infravörös spektrum 3250 cm 1 (N-H), 1790 era'1 (C=0), 1680 cnrl (amid II sáv) és 1540 cm-’ (N—C=0) értékeknél mutatott csúcsokat, melyek láthatólag a visszamaradt vagy részben felszabadult izocianátból származnak. A tumorellenes hatás vizsgálata A tumorellenes hatás vizsgálata a National Cancer Institute-ben (NCI) [Drug Evaluation Branch. National Institutes of Health (NIH), Bethesda, Maryland, USA] történt, az NIH-ban szokásosan alkalmazott, előírt vizsgálati módszerekkel. A vizsgálatokat CDF, törzsből származó hím vagy nőstény egereken végeztük. Minden egérbe 105 L-1210 limfoíd leukémia tumorsejtet ültettünk be intraperitoneálisan — az NIH előírásoknak megfelelően. A beültetés után egy nappal a vizsgálandó vegyületet, a scarbethánt 10 térf. % etanolt, 10 térf. % Emulphor emulgeálószert (TAS Corporation, New York, USA) és 80 térf. % sóoldatot tartalmazó elegyben szuszpendálva a vizsgálati állatokba — a kontroll állatok kivételével — intraperitoneálisan injektáltuk. Az eredményeket az NCI értékelte az átlagos túlélési idő alapján. Az értékelés módját a későbbiekben, a táblázatokhoz kapcsolt megjegyzésekben részletesebben ismertetjük. Az eredményeket az 1.—4. táblázatokban ismertetjük. 1. táblázat Kísérlet sorszáma Nem Dózis/injekció (mg/kg) Túlélés (1. Megj.) Pusztulás (2. Megj.) 1. N 100,00 2/6 Toxikus 2. N 50,00 5/5 >5,94 3. N 25,00 6/6 >5,94 4. N 12,50 6/6 >5,94 5. N 6,25 6/6 4,05 1. kontroll N 0 30/30-6. H 100,00 0/6 Toxikus 7. H 50,00 5/6 >5,94 8. H 25,00 6/6 >5,94 9. H 12,50 6/6 >5,94 10. H 6,25 6/6 4,89 2. kontroli H 0 24/24 < 3
