185379. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új luteotróp releasing faktor monapeptid és dekapeptid származékainak előállítására

1

185 3 79

2

Ismeretes, hogy a luteinizáló hormon (LH) és a follículus-stimuláló hormon (FSH) a hipofízis elülső lebenyének hormonjai, és elválasztásukat a hipotalamusz luteinizáló hormon releasing faktora (LH-RH) szabályozza. Az .LH és FSH a nemi mirigyekre hatva fokozzák a szteroid hormonok szintézisét, és az ivarsejtek érését. Az LH-RH — és ily módon az LH és FSH - váltakozó elválasztása szabályozza a háziállatok és emlősök szaporodási ciklusát. Ugyanakkor az LH—RII a placentára, a HCG elválasztásra, valamint közvetlenül a nemi mirigyekre is hat. Az LH—RH agonista analógjai - két mechanizmus útján — a termékenység szabályozásában hasznosíthatók. Az LH-RH analógokat kis dózisokban az ovuláció fokozására és a hipotalamusz, valamint peteérési eredetű meddőség kezelésére alkalmazhatjuk. Felhasználhatók továbbá az ivarmirigyek csökkent működése esetén, impotenciában, a spermatogenézis és androgén-termelés fokozására.

Paradox módon, a nagy és tartós hatású LH-RH analógok ellentétes hatásúak, azaz nőnemű egyedekben az ovulációt, hímnenuíekben pedig a spermatogenézist gátolják. E hatásoknak megfelelően az ivarmirigyek által termelt nemi szteroidok normális keringési szintjét, és a járulékos szerv súlyát csökkentik. A háziállatokban e paradox hatás súlyvesztést követően a súlyvisszanyerést elősegíti, valamint terhes állatokban abortuszt stimuláló hatásként és általában mint sterilitást előidéző kemikália hatásaként nyilvánul meg.

A természetes luteinizáló hormon releasing faktor (LH-RH) természetben előforduló aminosavakból (amelyek az akirális glicint kivéve L-konfigurációjúak) felépülő dekapeptid, amelyben az aminosav szekvencia a következő:

(piro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.

E természetes hormon számos analógját megvizsgálták, de nagy részűik a klinikai alkalmazhatóságot tekintve nem eléggé Itatásos, bizonyos szelektív módosítások azonban a biológiai hatást előnyösen befolyásolják. Így a legjelentősebb módosítást a 6-os helyzetű glicin csoport D-aminosav csoportra való cseréje jelentette, pl. amennyiben a Gly csoportot a 6-os helyzetben D-Ala, D-Leu, D-Phe vagy DTrp aminosav csoportra cserélték, úgy az LH—RH-nál hatásosabb LH-RH analógokat kaptak. Ilyen módosításokat M. Monahan, és tsai, Biochem., 12, 4616 (1973) ([D-Ala6]-LHRH), J. A. Vilchcz- Martinez és társai (Biochem. Biophys. Res. Comm., 59, 1226 (1974) ([D-Leu6]LHRH és dezGly10 [D-Leu6, Pro NHEt9]LHRH); D. H. Coy és társai J. Med. Chem., 19, 423 (1976) ([D-Phe] LHRH); és W. Vale és társai Clinical Endocrinology, 5th Supp., Blackwell Scientific Publications. Oxford, England (1976), 2615 o. valamint D^ H, Coy és társai, Biochem. Biophys. Res. Comm., 67, 576 (1979) ([D-Trp6]LHRH) ismertetnek.

E lényeges hatásnövekedést — melyet a fentiekben körvonalazott 6-os helyzetben végzett változtatásokkal értek el - tovább lehetett fokozni a 10-helyzetű Gly-NHj eliminálásával kapott alkil-, cikloalkil- vagy fluoralkil-nonapeptid vagy a Gly-NHj csoport a-azaglicin-amid csoporttal való helyettesítésével kapott pepiid révén. Ilyen származékokat M, Fujino és társai, Biochem. Biophys. Rés. Comm., 49, 863 (1972), D. H. Coy, és társai, Biochem. 14. 1848 (1975) és A. S. Dutta és társai (J. Chem. Soc. Perkin I., 1979, 379. ismertetnek.

2

Amikor a 7-es helyzetű leucin-részletet N-metil-leucinnal helyettesítették, az enzimes lebontással szemben ellenállóbb vegyületet kaptak [N. Ling és társai, Biochem. Biophys. Rés. Comm., 63, 801 (1975)].

5 A 3-as helyzetű triptofán 3-(l-naftil)-L alaninnal történő helyettesítése biológiailag hatásosabb vegyületet eredményezett. Ilyen módosítást pl. K. U. Prasad és társai, J. Med. Chem., 19, 492 (1976) és Y. Yabe, Chem. Pharm. Bull., 24, (12) 3149 (1976) ismertetnek.

1C A biológiai hatás jelentős mértékű megtartásával az 5-ös helyzetű tirozin csoport fenil-alaninnal vagy

3-(lpentafluor-fenil)-L-alaninnal helyettesíthető, pl.

N. Yanaihara és társai, Biochem. Biophys. Rés. Comm.,

52, 64 (1973), és D. Coy, és társai J. Med. Chem. 16,

15 877 (1973) ismertetnek ilyen módosításokat.

Kísérleteket folytattunk az állat- és embergyógyászatban alkalmazható, a fenti szánnazékoknál hatásosabb LH-RH analógok előállítására.

A találmány egyrészt olyan új nona- és dekapeptid 20 LH-RH származékok előállítási eljárására vonatkozik, amelyek a 6-os helyzetben bizonyos lipofil D-aminosavakat tartalmaznak, másrészt olyan gyógyászati kompozíciók előállítására, melyek e vegyületet tartalmazzák. E származékok 6-os helyzetében egy külön- 25 leges, nem természetes eredetű D-aminosav maradék van.

A találmány tárgya az (I) általános képletű nonapeptidek és dekapeptidek, gyógyászatilag elfogadható sóik előállítási eljárása, ahol a képletben:

Y triptofil-, fenil-alanil- vagy 3-(l-naftil)-L-alaniJ- *

30 csoportot;'

W tirozilcsoportot;

X (1) általános képletű D-aminosav maradékot, mely utóbbi képletében

R naftil-, antril-, fluorenil-, fenantril-, bifenilil-,

35 benzhidril- vagy három vagy több egyenes

láncú, kis szénatomszámú alkü-szubsztituenssel helyettesített fenil-csoportot jelent;

Y leucil-, vagy N-metil-leucil-csoportot jelent;

Z glicinamidot vagy -NH-R1 képletű csoportot

40 jelent, mely utóbbi képletében

R, kis szénatomszámú alkilcsoport, vagy -NH-CO-NH2 képletű csoport, és a V, W, Z, és

Y jelentésében szereplő aminosavak L-konfigurációjúak, kivéve a glicilcsoportot.

45 A leírásban a IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature által javasolt [Biochemistry, 11, 1726 (1972)], a peptidkémiában általánosan elfogadott aminosav-röviditéseket használjuk, melyek az akirális glicint és az X-szel jelölt 6-os helyzetű aminosavat, kivéve 50 L-arninosavakat jelentenek. Valamennyi pepiid szekvenciáját ezzel az általánosan elfogadott írásmóddal írjuk le úgy, hogy az N-terminális aminosav a bal, a C-terminális aminosav pedig a jobb oldalon van.

A gyógyászatilag elfogadható sók kifejezés alatt olyan 55 sókat értünk, amelyek az alapvegyület biológiai hatását megtartják és semmiféle toxikus hatást nem okoznak. Ilyen sókként pl.

a) szervetlen savakkal, pl. hidrogén-kloriddal, hidrogénbromiddal, kénsavval, foszforsawal, salétromsavval 60 és ezekhez hasonlókkal képzett sav-addíciós sókat; szerves savakkal, pl. ecetsawal, oxálsawal, borkősavval, borostyánkősawal, maleinsawal, fumársawal, glükonsavval, citromsawal, almasavval, aszkorbinsav-, val, benzoesawal, csersawal, pamoinsawal (más 65 néven embonsawal), alginsawal, poliglutaminsawal,