185362. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-(alfa-amino-fenil-acetamido)- ill 6[alfa-amino-(p-hidroxi-fenil) acetamido]-2,2-dimetilenam-3-karbonsav előállításáraa 6-trimetilszilil-oxi-karbonilamino-1,1-dimetil-penam-3-karbonsav-származékokon keresztül
1 185 362 2 összetételt mutat, mint a két reagens kis mennyiségének hozzáadása előtt, Ezután 75 percen át szobahőmérsékleten vízmentes szén-dioxid-gázt vezetünk az elegybe. Ekkor az NMR-spektrum szerint az elegyben nincs hexametiJ-diszilazán, és több mint 92% 6-(trimetil-szililoxikarbonil-amino)-penicillánsav-trimetil-szilil-észtert tartalmaz. Utána az elegyhez hozzáadunk 4,45 ml N,N-dimetil-anilint (0,035 mól), és -3 °C hőmérsékletre hűtjük. Ezen a hőmérsékleten, az alábbi ütemben beadagolunk 5,65 g (0,026 mól) 95 %-os tisztaságú D-(-)-2-fenilglicil-kloridot: Idő (perc) Hőm-'rséklet (°C) Hozzáadott savklorid súlya (g) 0-3 1,05 20 0 1,30 40 0 1,30 50 0 1,00 60 0 1,00 A reakciót NMR-spektroszkópiai vizsgálattal követjük, ez 5 órával a reakció beindítása után csak igen kismértékű átalakulást mutat. Ekkor az elegy hőmérséklete 3 °C. A következő 16 órán át az elegyet jégbe hűtve tartjuk, majd 3,5 órán át szobahőmérsékleten körülbelül 20—24 °C-on kevertetjük. Ekkor az elegy még nagy mennyiségű szilárd anyagot tartalmaz. További, körülbelül 63 órán át szobahőmérsékleten (22-24 °C) kevertetjük, ezután már csak enyhe zavarosság észlelhető. Az elegy egy mintáját deutérium-oxiddal kirázva, az NMR-spektrum ampicillin és 6-amino-penicillánsav jelenlétét igazolja. A reakcióelegyet körülbelül 0 °C hőmérsékletre hűtjük, hozzáadunk 35 ml jeges vizet, és 5 percig hidegen kevertetjük. Az oldatlan részeket kiszűrjük, hideg vízzel ás diklór-rnetánnal mossuk. Elválasztjuk a vizes fázist, ennek vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálata 6-aminopenicillánsavat és egy, az ampicillinnél lassabban mozgó anyag, az új köztitermék széles sávját jelzi. A vizes fázis pH-ját ammónium-hidroxiddal 3,0-ra állítjuk be, és beoltjuk ampicillinnél. Hozzáadunk 35 ml metil-izobutil-ketont, összekeverjük, további ammóniumhidroxid hozzáadásával pH-ját 5,2-re állítjuk be, egy órán át 20 °C hőmérsékleten, utána egy órán át jeges fürdőben kevertetjük, majd éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. A kivált ampicillint kiszűrjük, 25 ml Irideg vízzel, utána 40 ml metil-izobutil-ketonnal, és végül 34 ml izopropil-alkohol és 6 ml víz elegyével mossuk, 50 °C hőmérsékleten megszárítjuk. Ily módon 4,5 g ampicillint nyerünk, amelyet vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálattal azonosítunk. 3. példa 5,4 g 6-amino-penicillánsav, 6,2 ml 93 %-os tisztaságú hexametil-diszilazán, 0,06 g ímidazol és 50 ml diklórmetán elegyét nitrogén atmoszférában 18 órán át forraljuk. Utána hozzáadunk 0,1 ml trimctil-klór-szilánt, ekkor az oldat megzavarosodik. További 2 óra forralás után tiszta oldatot nyerünk, és a hűtőben ammóniumklorid jelenik meg. Utána megint hozzáadunk 0,1 ml trimetil-klór-szilánt, ennek hatására az oldat már csak igen kismértékben zavarosodik meg. Nitrogén bevezetés 4 nélkül forraljuk az elegyet további 65 órán át. Ezután körülbelül 22 °C hőmérsékletre hűtjük, és 75 percen át vízmentes szén-dioxid-gázt vezetünk bele. A reakcióelegy NMR-vizsgálata több, mint 90% 6-(trimetil-szilil- 5 oxi-karbonil-amino)-penicillánsav-trimetil-szilil-észtert jelez. Hozzáadunk 4,45 ml N,N-dimetil-anilint, majd az alábbi ütemben 5,6 g 97 %-os tisztaságú D-(-)-2-fenilglicil-klorid-hidrokloridot : 10 15 Idő (perc) Hőmérséklet (°C) Hozzáadott mennyiség (g) 0 20 1,35 20 20 1,30 32 20 1,00 48 20 1,00 75 20 1,00 Ezután további 17 órán át kevertetjük az elegyet, 20 és a reakciót az elegyből vett minták, valamint hígított minták (1 ml reakcióelegyet 2 ml diklór-rnetánnal hígítunk) vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatával követjük. A kromatogramokon kevés ampicillint és nagy mennyiségű új köztiterméket lehet észlelni. 25 A reakcióelegyet 0 °C-ra hűtjük, hozzáadunk 40 ml jeges vizet, az oldatlan részeket kiszűrjük, vízzel és diklór-metánnal mossuk. A vizes fázist elválasztjuk, 10%-át mintaként félretesszük, a többi pH-ját ammóniumhidroxiddal 3,0-ra állítjuk be, ampicillinnél beoltjuk és 20 kevertetjük. 40 ml metil-izobutil-keton hozzáadása után tovább kevertetjük, és további ammónium-hidroxiddal pH-ját 5,2-re állítjuk be. Az elegyet egy órán át szobahőmérsékleten, majd egy órán át jeges fürdőben kevertetjük, ennek során megindul a kristályosodás. Éjszakán 20 át hűtőszekrényben tartjuk, majd a kristályos terméket kiszűrjük, metil-izobutil-ketonnal, utána vízzel és metilizobutil-ketonnal, majd 34 ml izopropanol és 6 ml víz elegyével mossuk, és 45 °C hőmérsékleten megszárítjuk. Ily módon 6,25 g ampicillint nyerünk (a kivett mintával 40 korrigálva: 6,8 g, hozam: 68%). 4. példa 1,0 g 6-amino-penicillánsav, 1,13 ml trimetil-klórszilán 45 és 10 ml diklór-metán elegy éhez fél óra alatt hozzácsepegtetünk 1,23 ml trietil-amint, majd az elegyet 2 órán át kevertetjük. Utána 4 órán át vízmentes széndioxid-gázt vezetünk bele. Az elegy NMR-vizsgálata körülbelül 55-60%-os karboxi-szililezést mutat. Az 50 elegyet éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk, másnap hozzáadunk 0,77 ml N.N-dimetil-anilint, -8 °C hőmérsékletre hűtjük, és kevertetés közben, az alábbi ütemben hozzáadunk 1,2 g D-(-)-2-(p-hidroxi-fenii)-glicil-kloridhidrokloridot: Idő (perc) Hőmérséklet (°C) Hozzáadott mennyiség (g) 0-8 0,30 20-4 0,30 40-4 0,30 60-4 0,30 120 8 220 15 310 20
