185323. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptid-karbonsav-hidrazidok előállítására
1 185 323 2 ból az 1. példa (I) eljárása szerint álb'tjuk elő a kívánt vegyületet. Termelés 2,5 g (olaj), Rf1 (II) = 0,65. (II) BOC-ryr-(D)-Met-Gly-EtPhe-NHNHCOCH2CH3 előállítása 5 2,4 g Z-EtPhe-NHNHCOCH2CH3 és 2,4 g BOC-Tyr(D)-Met-Gly-OH felhasználásával az 1. példa (II) eljárása szerint állítjuk elő a kívánt terméket. Termelés: 2,9 g, op.: 95-100 °C, (a)p -8,5° (c = 1,00, DMF), Rf1 = = 0,45. 10 Elemi analízis a C35HSo08N6S összegképlet alapján: számított (%): C 58,80, H 7,05, N 11,76. S 4,49; mért (%):C 58,43, H 6,97, N 11,55, S 4,70. (III) BOC-Tyr-(D)-Gly-EtPhe-NHNHCOCH2CH3 15 előállítása 1,0 g BOC-Tyr-(D)-Met-Gly-EtPhe-NHNHCOCH2 C H 3 - ból kiindulva az 1. példa (III) eljárása szerint állítjuk elő a kívánt vegyületet. Hozam: 0,93 g, op.: 104-109 °C, (a)p -10,46 (c = 0,95, DMF), Rf1 = 0,22. 20 Elemi analízis a C35H5o09N6S H20 összegképlet alapján: számított (%): C 56,13, H 7,00, N 11,22, S 4,28; mért (%):C 55,85, H6,95, N 11,03, S 4,05. 25 (IV) H-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHC0CH2CH3 előállítása 0,50 g BOC-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHCOCHx CH3-hoz 0,5 ml anizolt és 5 ml TFA-t adunk és az ele- 00 gyet 10 percig rázzuk. Az oldószert ledesztilláljuk, majd étert adunk a maradékhoz, így a terméket szűréssel por formájában kapjuk. A terméket Amberlite IRA 410 (az ioncserélőgyanta jellege gyenge savas, funkciós csoport: —CHjCOOH) ioncserélőn ioncserének vetjük alá, majd 05 Sephadex LH-20 oszlopon (2,2X120 cm) tisztítjuk. Az eluálást 0,1 n ecetsavval végezzük és a 300-350 ml-es frakciókat összegyűjtjük, majd liofilezzük. Kitermelés: 0,35 g (a)p +18,5 (c = 0,49, MeOH), Rf2 = 0,24. Aminosav analízis (4% tioglikolsav) 6 n sósavas hidro- ^ lízis: Gly 1,00(1), Met 1,05 (1), Tyr 0,97 (1). 3. példa 4b — H-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe- NHNHCOCH2CH2CH3 előállítása -(I) Z-EtPhe-NHNHCOCH2CH2CH3 előállítása 50 A 2. példa (I) eljárása szerint 2,3 g Z-EtPheOH és 0,84 g NH2NHCOCH2CH2CH3 kiindulási anyag felhasználásával állítjuk elő a kívánt vegyületet. Kitermelés: 2,4 g (olaj), Rf1 = 0,67. 55 (II) BOC-Tyr-(D)-Met-Gly-EtPhe- NHNHCOCH2CH2CH, előállítása 1,5 g Z-EtPhe-NHNHCOCH2CH2CH3 és 1,4 g BOCTyr-(D)-Met-Gly-OH kiindulási anyag felhasználásával a 2. példa (ll) eljárása szerint állítjuk elő a kívánt vegyü- 50 letet. Kitermelés: 1,8 g, op.: 89-94 °C, (a)^ -7,7° (c= 1,00, DMF), Rf1 = 0,48. Elemi analízis a C36H5208N6S összegképlet alapján: számított: (%):C 59,32, H 7,19, N 11,53, S 4,40; mért (%):C 59,58, H 7,07, N 11,41, S4,18. 65 (III) BOC-Tyr-(D)-Met (O)-Gly-EtPhe- NHNHCOCH2CH2CH3 előállítása 1.0 g BOC-Tyr-(D)-Met-Gly-EtPhe-NHNHCOCH2- CH2CH3-ból kiindulva a 2. példa (III) eljárása szerint állítjuk elő a kívánt vegyületet. Kitermelés: 0,97 g, op.: 106-110 °C, (a)p -11,3, (c = 0,93, DMF). E’emi analízis a C36H5209N6S • H20 összegképlet alapján: számított (%): C 56,67, H 7,13, N 11,02, S 4,20; mért (%): C 56,35, H 6,97, N 10,86, S 3,92. (IV) H-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe- NHNHCOCH2CH2CH3 előállítása 0,50 g BOC-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe- NHNFlCOCH2CH2CH3-ból kiindulva a 2. példa (IV) eljárása szerint állítjuk elő a kívánt anyagot. Kitermelés: 0,29 g, (a)p f 17,6° (c = 0,52 metanol), Rf2 = 0,26. Aminosav analízis (4% tioglikolsav) 6 n sásavas hidrolízis Gly 1,00 (1), Met 1,03 (1), Tyr 0,98 (1). 4. példa H-Ty r-(D)-Met (O)-Gly-EtPhe-N HNHCOCH3. 1/2 szulfát előállítása A 2. példa szerint előállított H-Tyr-(D)-Met(0)-Gly- EtPhe-NHNHCOCH3 70 mg-ját 2 ml metanolban oldunk és az oldathoz 1 ml 0,1 n kénsavat adunk. A metanolt ledesztilláljuk, majd a terméket liofilezzük. Kitermelés: 73 ug. Ugyanezt az eljárást elvégezzük az 1., 3. és 4. példák vegyületeivel és a megfelelő szulfátokat kapjuk. 5. példa Tabletták készítése Peptid (az 1. példa szerint előállított termék) 10 mg Kukoricakeményítő 20 mg l.aktóz 80 mg Zselatin 2 mg Magnézium-sztearát 2 mg A peptidet, kukoricakeményítőt és a laktózt összekeverjük, a keveréket vizes zselatin-oldat segítségével granuláljuk és szárítjuk. A granulátumhoz ezután hozzáadjuk a magnéziunr-sztearátot és tablettává préseljük. 6. példa Injekciók előállítása Peptid (az 1. példa szerint előállított termék) 0,5 mg Szorbit 100 mg A szorbitot és a peptidet összekeverjük és a keveréket ampullába helyezzük majd lezárjuk. A felhasználás előtt 2 ml ionmentesített vízzel elegyítjük és injekció oldatként használjuk. 7. példa Kúpok előállítása Peptid (a 2. példa szerint előállított termék) 3 mg Witepsol 2 g 5
