185321. lajstromszámú szabadalom • Eljárás farmakológiailag hatásos enkefalin analógok előállítására
1 185 321 2 A találmány tárgya az I általános képletű vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is vonatkozik, a gyógyszerkészítmények az I általános képletű vegyületet egyedül vagy a gyógyszertechnológiában szokásosan alkalmazott segédanyagokkal összekeverve tartalmazzák. Az utóbbi esetben a segédanyagok mennyiségét a hatóanyagként használt vegyület oldhatósága és kémiai tulajdonságai, a gyógyszerbeadás módja és a szokásos gyógyszerészeti gyakorlat fogja meghatározni. Előnyösek a parenterálisan alkalmazható gyógyszerkészítmények, vagyis melyeket intramuszkulárisan, szubkután vagy intravénásán adunk be. Ilyenek a steril, injiciálható oldatok vagy szuszpenziók, továbbá a steril, injiciálható depot-készítmények vagy a hatóanyag lassú felszabadulását biztosító egyéb készítmények. Különösen alkalmasak az izotóniás sóoldattal vagy izotóniás dextróz-oldattal készített steril, injiciálható oldatok. Ezeket a steril, injiciálható gyógyszerkészítményeket előállíthatjuk és tárolhatjuk az előbbi alakban, de előállíthatunk olyan készítményeket is, melyeket közvetlenül a felhasználás előtt, valamilyen steril oldószer, mint például víz hozzáadásával lehet injekció útján történő beadásra alkalmassá tenni. Ez utóbbiak a steril hatóanyag ismert mennyiségét tartalmazzák például gumidugóval lezárt üvegben vagy leforrasztott ampullában és így a hatóanyag sterilitása biztosítva van. Az ismert mennyiségű steril hatóanyagon kívül ezek a készítmények még az izotóniás oldatok vagy szuszpenziók előállításához szükséges mennyiségű steril dextrózt vagy nátrium-kloridot is tartalmazhatnak és így a steril oldószer hozzáadása után a már izotóniás oldathoz jutunk. Ugyancsak előnyösek az orális beadásra készült gyógyszerkészítmények. Ezeket előállíthatjuk egyszeri alkalmazásra szánt készítmények, mint például kapszulák, tabletták vagy ezekhez hasonlók alakjában; az egyszeri adagok a hatóanyagból előre meghatározott mennyiséget tartalmaznak. Ezen túlmenően előállíthatunk még port, granulátumot, valamint vizes vagy nem-vizes oldatokat, szuszpenziókat vagy emulziókat. A tablettákat sajtolással készíthetjük, amihez általában egy vagy több segédanyagot is használunk. A tablettákat elő lehet állítani oly módon, hogy a hatóanyagot egymagában, például por vagy szemcsék alakjában sajtoljuk, de a hatóanyagot általában egy- vagy többféle más anyaggal is összekeverjük. Ilyenek például a kötőanyagok, a kenőanyagok, az inert töltőanyagok, a csúsztatószerek, a felületaktív anyagok, a pufferek, az ízesítő és illatosító szerek, hígítószerek, a konzerválószerek, a diszpergálószerek és az ezekhez hasonlók. Az I általános képletű vegyületek alkalmas dózisát a kezelőorvos határozza meg, Az említett dózis — az alkalmazás módjától, az alkalmazni kívánt vegyülettől, a kezelendő betegtől és a kezelés módjától függően — változó. Általában véve azonban a dózis körülbelül 10 fig- 2 mg/testsúly kg, előnyösen körülbelül 100 jrg-500 /ug/testsúly kg intramuszkuláris vagy szubkután alkalmazás esetén és körülbelül-1 /tg-200 jug/testsúly kg, előnyösen körülbelül 3 /jg—50 /ug/testsúly kg intravénás alkalmazásnál. Orális alkalmazás esetén a dózis általában körülbelül 1 mg- 500 mg/testsúly kg, előnyösen körülbelül 50 mg 200 mg/testsúly kg, és még előnyösebben körülbelül 50 mg 100 mg/testsúly kg. A következő példákban az I általános képletű vegyületek eiőálh'tását és farmakológiai aktivitását kívánjuk bemutatni anélkül, hogy ezzel a találmányt ezen példákra korlátoznánk. A következő példákban szereplő rövidítések jelentését a korábbiakban már megadtuk. 5 1. példa L-Tirozil-D-alanil-glicil-L-m-bróm-fenil-alanilj0 L-(N“-metil)-metionin-amid-acetát előállítása A. L-Tirozil-D-alanil-glicil-DL-m-bróm-fenil-alanil- L-(Ntt-metil)-metionil-benzhidril-amin-gyanta trifluorecetsavas sója 15 A gyantához kötött peptidet automatizált szilárd fázisú szintézissel egy „Beckman 990 Peptide Synthetizer”-ben állítjuk elő és 3,5 g úgynevezett benzhidrilamin-gyantát (Beckman, 0,47 mmól-N/g) használunk. 2(- A gyantát metilén-dikloridos oldatban lévő 4% diizopropil-etil-aminnal (DIEA) semlegesítjük, majd ugyancsak metilén-dikloridban lévő Boc-(N-Me)Met-OH-nal, DCC jelenlétében kapcsoljuk. Ily módon Boc-(N-Me)Met-nal helyettesített gyantát kapunk. A Boc-DL-(m-Br)- 2^ Phe-OH-t, a Boc-Gly-OH-t, a Boc-D-Ala-OH-t és a Boc- Tyr-OH-t egymás után kapcsoljuk a gyantán kötött pepiidre előbb az 1. kapcsolási program szerinti műveletsorozattal és ezt követően ugyanazt az aminosavat újból kapcsoljuk, de a 2. kapcsolási program Szerint. 2Q A 2. programot mindegyik aminosav vonatkozásában egyszer végezzük el, kivéve a DL(m-Br)-Phe-OH-t, melyet három ízben kapcsolunk. A kapott Boc-pentapeptid-gyantáról a védőcsoportokat az 1. program 1-8. lépései szerint távolítjuk el és így 4,04 g cím 2Ç-J szerinti vegyületet kapunk. Az 1. és 2. programban szereplő mosásokat 1 g gyantára számítva 8 ml térfogatú oldószerrel, illetve oldószereleggyel végezzük. 40 1- program 1. Háromszori mosás metilén-dikloriddal. 2. 5 perces kezelés térfogat szerint 30:5:65 arányú TFA : Et3SiH : metilén-diklorid eleggyel. 45 3. A 2. lépés szerinti kezelés, ezúttal 30 percig. 4. Kétszeri mosás metilén-dikloriddal. 5. Mosás metanol : metilén-diklorid (1:1) eleggyel. 6. Kétszeri mosás metanollal. 7. Mosás metanol : metilén-diklorid (1:1) eleggyel. 8. Kétszeri mosás metilén-dikloriddal. 9. Négyszeri, alkalmanként 2 percig tartó kezelés metilén-dikloridos oldatban lévő 4% DIEA-nal. 10. A 4—8. lépéssorozat megismétlése. 11. 120 perces kezelés a kívánt aminosavszármazék 2,5 ekvivalens mennyiségét tartalmazó metiléndikloridos oldattal és 1,25 ekvivalens DCC-et tartalmazó metilén-dikloridos oldattal. 12. Négyszeri mosás metilén-dikloriddal. 13. Az 5—7. lépések megismétlése. 14. Háromszori mosás metilén-dikloriddal. ou 2. program 1. Négyszeri, alkalmanként 2 percig tartó kezelés 65 metilén-dikloridos oldatban lévő 4% DIEA-nal. 6
