185320. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív enkefalin-származékok előállítására
1 185 320 2 A találmány tárgya eljárás egy új, fájdalomcsillapító hatást mutató vegyületcsalád előállítására. A közelmúltban emlősök agyából és agy-gerincvelői folyadékából morfinszerű tulajdonságokkal rendelkező endogén anyagokat vontak ki. E vegyületeket enkefalinoknak nevezik, szerkezetüket Hughes és munkatársai [Nature 258, 577 (1975)] derítették fel; e szerint az enkefalinok az alábbi összetételű pentapeptidek: H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH. E két vegyületet metionin-enkefalinnak, illetve leucin-enkefalinnak nevezik. Habár kimutatták, hogy a metionin-enkefalin és a leucin-enkefalin fájdalomcsillapító hatást mutat, ha egerek agykamrájába adjuk be őket [Duscher és munkatársai, Nature 261, 423 (1976)], gyakorlatilag mégis használhatatlanok, mivel parenterálisan (a gyomor- és bélrendszer megkerülésével) adagolva nincs fájdalomcsillapító hatásuk. Ezért az enkefalinok felfedezése óta sok új enkefalinanalógot állítottak elő, abban a reményben, hogy hatásuk nagyobb lesz és, hogy parenterális vagy orális (szájon át) adagolás esetén biológiai hozzáférhetőségük (biovailability) révén a gyakorlatban is alkalmazhatók lesznek. Dutta és munkatársai, Jife Sciences 21, 559—562 (1977) leírtak bizonyos szerkezeti változtatásokat, amelyek szerintük megerősítik az új származékok biológiai hatását. Szerintük az enkefalin-származékok hatását az alábbi szerkezeti változtatások egyikének vagy összességének bevezetésével lehet felerősíteni: a) A 2-iielyzetben lévő glicin helyettesítése bizonyos D- vagy a-aza-aminosavakkal; b) a terminális karboxilcsoport átalakítása metilészterré vagy amiddá; c) a 4 helyzetben lévő fenil-alanin módosítása a-aza helyettesítéssel, N-metilezéssel vagy az aromás gyűrű hidrogénezésével. Felfedeztük az enkefalin-analógoknak egy olyan családját, amelynek tagjai erős fájdalomcsillapító hatást mutatnak, és ugyanakkor kicsi a fizikai dependenciát (hozzászokást) okozó hatásuk (más néven fizikai dependencia kapacitásuk). Ezek az analógok egy gyűrűben helyettesített fenil-alanint tartalmazó tetrapeptidek, E vegyületek nagymértékben specifikusak a helyettesítőnek mind anyagi minősége, mind helyzete tekintetében. Különösen hatékonyak az olyan tetrapeptidek, amelyek 4-helyzetű aniinosavja egy meta-helyzetben helyettesített L-fenil-a!anin. Az irodalom ismertet más, gyűrűben helyettesített 4-fenil-alanil-enkefaiín-analógokat is; ezek azonban nem meta-helyzetben helyettesített 4-fenil-alanil-enkefalinanalógok. A. R. Day és munkatársai [Res. Comm. in Chem. Path, and Pharmacol. 14 (4), 597 -603 (1976)] leírják a H-Tyr-Gly-Gly-pCIPhe-Nle-OH-t. R. J. Miller és munkatársai [Vitamins and Hormones 36, 297—382, Academic Press (1978)] megemlítik az alábbi vegyületeket: H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-D-Leu-OH; H-Tyr-DAla-Gly-pCIPhe-D-Leu-OMe; és H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe- D-Leu-NHEt. Pless és munkatársai a 15. Európai Pepiidszimpóziumon tartott előadásukban („Enkcfalin-analógok ópiumszerü hatása”, 1978. szeptember 4-9., Gdansk, Lengyelország) beszámoltak a H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe- Met(O)-OI) összetételű vegyületükről. D. H. Coy és 2 munkatársai [BBRC 83 (3), 977-983 (1978)] említik a H-Tyr-D-Ala-Gly-FsPhe-Met-NH2-t. A 77/0579. számú dél-afrikai szabadalmi leírás általánosan ismertet olyan, az enkefalinokkal analóg pentapeptideket, amelyek 5 fenil-alanin csoportjának gyűrűjén különböző helyettesítők vannak. A 886.679. számú belga szabadalmi leírás leír és igényel p-fluor-helyettesített fenil-alanint tartalmazó tetrapeptid-enkefalin-analógokat. A 870.819. számú belga szabadalmi leírás, a 77/4479. számú dél-afrikai 10 szabadalmi leírás, továbbá McGregor és munkatársai [Life Sciences 23, 1371—1378 (1978)] leírnak tetrapeptid-enkefalin-analógokat, de ezek közül egyik sem tartalmaz a peptidlánc 4-es helyzetében gyűrűben helyettesített fenil-alanint. R. Miller az Amerikai Kémiai 1:5 Társaság 176. országos kongresszusán (Miami Beach, Florida, 1978. szeptember 11-14.) tartott, „Enkefalin- és endorfin-származékok szerkezeti farmakológiája és neurobiológiája” című előadásában ismertetett egyes olyan enkefalin-analógokat, amelyek a peptidlánc 4-es 20 helyzetében p-helyettesített fenil-alanint tartalmaznak, és különösen a p-klór- és p-bróm-helyettesített származékokról beszélt. Meitzer és munkatársai [Life Sciences 22, 1931 — 1938 (1978)] leírtak több enkefalin-analógot, és különösen két p-klór-helyettesített és egy p-metoxi- 25 helyettesített fenil-alanin-analógot. A fenti irodalmi források egyike sem ír le az alábbiakban meghatározott I általános képletű vegyületeket. Azt találtuk, hogy az L-fenil-alanin helyettesítőjének mind anyagi minősége, mind pedig helyzete lényeges 30 szerepet játszik az adott enkefalin-analógnak mind a fájdalomcsillapító hatása, mind pedig a fizikai dependencia kapacitása tekintetében. Ennek megfelelően a találmány tárgya eljárás az I általános képletű, ahol 35 R jelentése hidrogénatom, metil- vagy etilcsoport; Rí jelentése 1- 3 szénatomot tartalmazó primer alkilcsoport vagy ciklopropil-metil-csoport; és X jelentése bróm-, jód- vagy klóratom vagy metilcsoport, 40 vegyületek, és ezek gyógyászatilag elfogadható, nemtoxikus savaddíciós sói előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően védett I általános képletű vegyületekrol valamely peptidkémiában ismert reagens segítségével lehasítjuk a védőcsoportokat, és kívánt esetben 45 egy keletkezett szabad bázist savaddíciós sójává alakítunk. A védett pepiidben jelenlévő védőcsoportok a peptidszintézisben az aminosavak védésére szokásosan alkalmazott védőcsoportok lehetnek, továbbá a szilárd fázisú 50 szintézisek során alkalmazott gyantahordozó is lehet. A találmány szerinti gyógyászati készítmények valamely hígítószert és hatóanyagként valamely, a fenti I általános képletű vegyületet tartalmaznak. A találmány oltalmi körébe tartozik az I általános 55 képletű vegyületek gyógyászatilag elfogadható, nemtoxikus savaddíciós sói előállítása is. A gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sók lehetnek szerves vagy szervetlen savakkal képzett sók; ilyen savak például a sósav, kénsav, szulfonsav, borkősav, fumársav, brómhidrogén- 60 sav, glikolsav, citromsav, maleinsav, foszforsav, borostyánkősav, ecetsav, salétromsav, benzoesav, aszkorbinsav, p-toluol-szulfonsav, bcnzol-szulfonsav, naftalinszulfonsav, propionsav és más hasonlók. A savaddíciós sókat előnyösen sósavval, ecetsavval vagy borostyánkő- 65 savval képezzük. A találmány szerinti vegyületek sóit
