185229. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászatilag hatásos peptidek és acetátjaik előállítására

1

185 229

2

eleggyel eluáljuk. A főkomponenst a szilikagélről leoldva 2,0 g (62%) címben megnevezett vegyületet kapunk.

(a]«o ~ “38,44° (c = 0,5; metanol)

Elemi analízis a C32H43N507 (609,7) képlet alapján.

telenséget. A következő táblázat a fenti próbában kapott eredményeket tartalmazza:

Táblázat

^‘ TzubÄ8

1. példa 0,01

C

H

N

2. példa

0,012

számított

63,04%,

7,11%,

11,49%;

talált

61,92%,

6,89%

11,13%.

Aminosav-analízis: 1,02 Tyr; 0,99 Alá; 0,99 Gly; 10

1.01 NH3.

D. L-Tirozil-D-alanil-glicil-L-/N“-ciklopropilmetil)-fenil-alanin-amid acetátsó

A C. rész termékét (1,7 g; 2,8 millimól) 3 ml anizolt tartalmazó 15 ml trifluor-ecetsavban old- 15 juk. Az oldatot 0 °C-on 30 percig keverjük, majd gyorshűtéssel szárítjuk. A kapott szilárd anyagot annyi pufferben (1% piridin; 0,05% ecetsav) oldjuk, hogy 10 ml oldatot kapjunk. Ezt az oldatot

2,5 x 90 cm Sephadex DEAE A-25 (acetát) oszlop- 20 ra visszük fel, melyet előzőleg a fenti pufferrel egyensúlyba hoztunk. Az eluátumot 280 nm hullámhosszon ellenőrizzük, a megfelelő frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk. A kapott szilárd anyagot 10 ml 0,2 mólos ecetsavban oldjuk és az oldatot a 25 fenti pufferrel egyensúlyba hozott, 2,5 x 90 cm Sephadex G-10 oszlopra visszük fel. Az eluátumot 280 nm hullámhosszon ellenőrizzük és a megfelelő frakciókat egyesítve és liofilizálva 1,3 g (82%) címben megnevezett vegyületet kapunk. 30

[ap5D = —20,2° (c = 0,5, metanol)

Elemi analízis a C29H39N507 (569,7) képlet alapja C H " N

számított 61,15%, 6,90%, 12,29%;

talált 61,38%, 6,66%, 12,06%. 35

Aminosav-analízis: 1,00 Tyr, 1,00 Alá; 0,99 Gly;

1.02 NH3.

Az (I) általános képletü vegyületek fájdalomcsillapító hatását egéren mutatjuk ki a forró lemezes próba segítségével. E próbában az egeret függőle- 40 ges akrilhengerbe tesszük, amely alul 52 °C-on tartott fémlemezt tartalmaz. Az egérnek orálisan vagy szubkután injekcióval alkalmas hordozóanyagban oldott vagy szuszpendált, meghatározott mennyiségű vizsgálandó vegyületet adunk be, és a vegyület 45 beadása után 15 perc múlva az egeret a forró lemezfelületre helyezzük. Meghatározzuk a látens időt (másodpercekben), amely a forró lemezről való felugrásáig eltelik. Fájdalomcsillapító hatású anyagok növelik a látens időt, a csak hordozóanyagot 50 kapott kontrollegerekkel összehasonlítva. Ennek olyan dózistartományban kell bekövetkeznie, ami nem okoz mozgási koordinálatlanságot vagy képSzabadalmi igénypontok

1. Eljárás (I) általános képletű peptidek és acetátjaik előállítására, ahol a képletben

L és D a kiralitást jelzi,

R2 metilcsoportot jelent,

R3 ciklopropil-metil- vagy allilcsoportot és Z karbamoilcsoportot képvisel, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletü vegyület - ahol R2 és R3 jelentése a fenti,

Re hidrogénatomot vagy a peptidkémiában ismert aminovédőcsoportot jelent,

R8 hidrogénatomot vagy a peptidkémiában ismert hidroxilvédőcsoportot jelent,

Z' azonos Z fent megadott jelentésével vagy a Z szubsztituens valamely prekurzora, vagy valamely a peptidkémiában ismert hordozógyanta, azzal a kikötéssel, hogy az R6, R8 vagy Z' szubsztituenseknek legalább egyike védett csoport, valamely peptidkémiában ismert lehasító reagenssel reagálhatunk, és kivánt esetben ioncserélő gyantával kezelünk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy védőcsoportot lehasító reagensként trifluor-ecetsavat használunk.

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan (II) általános képletű vegyületet alkalmazunk, ahol Z' jelentése valamely, a peptidkémiában ismert hordozógyanta, és hogy a reakciót, lehasító reagensként hidrogén-fluoridot használva, — 10 °C és + 10 °C közötti hőmérsékleten végezzük.

4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja L-tirozil-D-alanil-glicil-L-/Na-allil)-fenilalanin-amid acetátsó előállítására, azzal jellemezve, hogy Na-tcrc-butil-oxi-karbonil-L-tirozil-D-alanilgSicil-L-/Nu-a|lil)-fenil-alanin-amidot trifluor-ecetsavval reagál tatunk.

5. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja L-tirozil-D-alanil-gliciÍ-L-/N“-ciklopropilmetil)-fenil-alanin-amid acetátsó előállítására, azzal jellemezve, hogy N^-Zerc-butil-oxi-karbonil-L-tirozil-D-alanil-glicil-L-/N°-ciklopropil-metil)fenil-alanin-amidot trifluor-ecetsawal reagáltatunk.

2 oldal rajz

7