185151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-karboxi-alkanoil-indolin.2-karbonsav-származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 185 151 2 csökkenése utal az angiotenzint átalakító enzim gátlására. Ez a csökkenés 10 mg/kg i.v., vagy 50 rng/kg p.o. dózis után 80 %-ig terjedhet és 60 percig fenntartható. Az angiotenzint átalakító enzim in vitro gátlása a találmányunk szerinti vegyületek esetében a Biochim. Biophys. Acta 293, 451 (1973) közleményében leírtakkal analóg módon igazolható. E módszer szerint az említett vegyületeket körülbelül 1 mmól koncentrációban, kívülről jéggel hütött foszfát-pufferben oldjuk. Ezekhez az oldatokhoz először különböző /il-mennyiségű 1 rnmólos hisztidil-leucint adunk foszfát-pufferben, majd 100 pl 5 rnmólos hippuril-hisztidil-leucint foszfát-pufferben és 50 Ml angiotenzint átalakító enzimet adagolunk. Ezt az enzimet frissen állítjuk elő felnőtt hím nyulak tüdejéből, kálium- vagy magnézium-kloridot és szacharózt tartalmazó trisz-pufferben. Az említett oldatokat 30 percig 37°-on inkubáijukés a további reakciót 0,75 ml 0,6 n vizes nátrium-hidroxid-oldat hozzáadásával megállítjuk. Ezt követően szobahőmérsékleten lOOMlo-ftalaldehidet, majd 10 perc múlva 100 pl 6n hidrogén-klorid-oldatot adunk hozzá. A mintákat spektrométerben 360 nm-nél vízzel összehasonlítjuk és meghatározzuk optikai sűrűségüket. Ezeket az értékeket konverziós faktorral standard görbéhez viszonyítjuk, ekkor az említett 30 perces inkubálás alatt képződött hisztidil-leucin mennyiségét nanomólokban kapjuk. Az eredményeket - az IC50 -érték meghatározására — a hatóanyag-koncentrációk függvényében, grafikusan görbeként szemléltetjük. Ez az érték az a hatóanyag-koncentráció, amely hatóanyagot nem tartalmazó kontroil-minta aktivitásának felét adja. Az említett, találmányunk szerinti reprezentatív vegyületek ebben az in vitro vizsgálati rendszerben is, nanomól ICS0 -értékig és ez alatt is, igen hatékonyak. Ennek megfelelően a találmány szerinti vegyületek értékes antihipertenzív szerek, különösen magas vérnyomás csökkentésére (tekintet nélkül az etiológiára) és/vagy szívbetegségek, így szívelégtelenség és/vagy egyéb, ödémával vagy ascites-szel kapcsolatos állapotok, például máj zsugorodás esetében. A találmány szerinti vegyületek közbenső termékként is alkalmazhatók egyéb értékes termékek, különösen farmakológiailag hatásos készítmények előállítására. Különösen kiemelendők a II általános képletű vegyületek, kiváltképpen ezek indolin-2S-királis epimerjei, ahol a képletben R jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos alkilcsoport vagy legfeljebb 4 szénatornos alkoxicsoport vagy halogénatom, m jelentése 0 vagy 1, p és q jelentése 0, 1 vagy 2 és R' jelentése hidrogénatom vagy feníl-csoport; ezek mono- vagy bisz-amidjai, mono- vagy bisz(rövidszénláncú alkil)-észterei és sói, különösen az említett savak gyógyászatilag alkalmazható alkálifém- vagy ammónium-sói. Különösen előnyösek azok a II általános képletű vegyületek, amelyek képletében R jelentése hidrogénatom, metilcsoport, metoxicsoport, fluoratom vagy m és p jelentése 1, q jelentése 1 vagy 2 és R' jelentése hidrogénatom vagy fenilcsoport; ezek mono- vagy bisz-amidjai, a mono- vagy bisz(rövidszénláncú alkil)-észterei és sói, különösen az említett savak gyógyászatilag alkalmazható alkálifém- vagy ammóiiium-sóí. A találmány szerinti vegyületeket önmagukban ismert módszerekkel, előnyösen úgy állítjuk elő, hogy a) valamely III általános képletű vegyületet, vagy ennek említett savszármazékát egy IV általános képletű vegyület valamely reakcióképes funkcionális származékával kondenzáljuk, vagy b) valamely V általános képletű vegyületet - ahol az X és Y szubszlituens legalább egyikének jelentése cianocsoport és a másik az említett szabad, amidált vagy észterezett karboxilcsoport - hidrolizálunk vagy alkoholizálunk, vagy c) valamely VI általános képletű vegyületben vagy ennek említett savszármazékában az indol-részt indolinrésszé hidrogénezzük és kívánt esetben a kapott savakat vagy észtereket sókká, észterekké, illetve savakká vagy amidokká alakítjuk át. A IV általános képletű vegyületek reakcióképes funkcionális származékai előnyösen észter-halogenidek, egyszerű vagy vegyes anhidridek, például az említett savkloridok rövidszénláncú alkil-félészterei, a ciklusos anhidrid, vagy vegyes ecetsav- vagy ciano-ecetsav-anhidridek. A III és IV általános képletű vegyületek említett kondenzációja vagy spontán, vagy kondenzálószerek, például szerves vagy szervetlen bázisok, így sóképző aminok vagy fém-karbonátok, vagy diszubsztituált karbodiimidek jelenlétében megy végbe. Az V általános képletű nitrileket a megfelelő savakká vagy amidokká önmagában ismert módon, előnyösen szervetlen savakkal, így hidrogén-kloriddal vagy kénsavval hidrolizáijuk. Az említett alkoholízist analóg módon, az említett savak és a megfelelő helyettesítetlen vagy szubsztituált rövidszénláncú alkanolok jelenlétében végezzük. Végül a VI általános képletű indolok I általános képletű indolinokká való, említett hidrogénezését is az 1-acil-indolok szokásos hidrogénezése szerint végezzük, például katalitikusán aktivált vagy naszcensz hidrogénnel, így hidrogénnel, platina-, palládium-, ródium- vagy nikkel-katalizátorok jelenlétében, vagy elektrolitikusan előállított hidrogénnel, vagy fémeknek savakra vagy alkoholokra történő behatásával. Alkalmazhatók redukálószerek is, például egyszerű vagy komplex könnyűfém-hidridek, így boránok, vagy előnyösen alkálifém-bór-hidridek vagy -ciano-bór-hidridek. Előnyös az indolin-2S-karbonsavakká vagy ezek említett származékaivá való asszimmetriás hidrogénezés. Ennek során királis katalizátorokat alkalmazunk, például olyanokat, amelyeket ródiumsóból (R)-l ,2-bisz(difenil-foszfino)-propánnal vagy (R)-1,2-bisz(o-anizii-feni!-foszfino)-etánnaI és 1,5- -ciklooktadiénnel állítottunk elő. A találmány szerint előállított vegyületek önmagukban ismert módon átalakíthatok más találmány szerinti vegyületté. így például a kapott amidok vagy észterek tovább hidrolizáihatók vagy alkoholizálhatok (átészterezhetők) Ez a b) eljárás szerint, vagy vizes alkáliákkal, például alkálifém-karbonátokkal, illetve -hidroxidokkal végezhető. A kapott szabad savak önmagában ismert módot észterezhetők az említett helyettesítetlen vagy szubsztituált rövidszénláncú alkanolokkal vagy diazo-akánokkal, vagy átalakíthatok az említett fém-, vagy an móniumsókká, savaddíciós sókká. így például valamely kapott szabad sav megfelelő 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
