184787. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkoxi-pirido-pirimidin-származékok előállítására
1 184 787 2 0,3 g klór vegyületet feloldottunk 200 ml, 0,2 g kálium-hidroxidot tartalmazó etanolban. Hozzáadtunk 02 g 5 %-os palládium/faszén katalizátort, majd megkezdtük a hidrogénezést. A redukció 48 óra alatt végbement, melynek eredményeképp 2,4-diamino-5-metil-6- -(2,5-dimetox-benzil)-pirido[2 3-d]pirimidint kaptunk. Olvadáspont: 252-254 °C. 2. példa 2,4-Diamino-6-(3,4-dimetoxi-benzil)-5-metil-pirido-[2,3-d]pirimidin 100 g 3,4-dimetoxi-benzaldehid, 78 g etil-aceto-acetát és 100 ml vízmentes benzol elegyét 3 órán át refluxáltattuk, és ezalatt azeotrop desztillációval elméleti mennyiségű vizet távolítottunk el a reakcióelegyből. Az oldószert csökkentett nyomáson lehajtottuk, a maradékot etil-acetát/pentán elegyből átkristályosítottuk, így 153 g etil-a-(3,4-dimetoxi-benzilidén)-aceto-acetátot kaptunk. Olvadáspont: 72 °C. (További, etanol/pentán elegyből végzett átkristályosítás utáni minta olvadáspontja: 85-86 °C). 50 g etil-a-(3,4-dimetoxi-benzilidén)-aceto-acetátot 150 ml etil-acetátban és 3 g 5 %-os palládium/faszén katalizátor jelenlétében katalitikusán redukáltunk egy Parr-féle csökkentett nyomású berendezésben. A katalizátort szűréssel eltávolítottuk, az oldószert csökkentett nyomáson lehajtottuk, majd a maradék olaj desztillálásával (fp.: 162-164 °C/0,4 Hgmm) 42 g etil-a-(3,4-dimetoxi-benzil)-aceto-acetátot kaptunk. 42 g etil-a-(3,4-dimetoxi-benzil)-aceto-acetát, 21 g 2,4,6-triamino-pirimidin és 120 ml difenil-éter elegyét 2 órán át tartottuk 190-230 °C-on, miközben a képződött etanolt és vizet azeotropikusan eltávolítottuk. A reakcióelegyet lehűtöttük, majd hozzáadtunk 250 ml metanolt és 50 ml etanolt. A képződött szilárd anyagot leszűrtük, 1 liter forrásban lévő vízzel kezeltük, így 26 g 2,4-diamino-5 -metil-6-(3,4-dimetoxi-benzil)-7-oxo-7,8 - -dihidropirido[23-d]pirimidint kaptunk. Olvadáspont- 346-348 OC. 17,5 g dimetil-formamid 75 ml kloroformmal készült oldatához 0-5 °C-on hozzáadtuk 14 g tionil-klorid 25 ml kloroformmal készült oldatát. A reakcióelegyet hagytuk felmelegedni 55-60 °C-ra, majd 5 perc után lehűtöttük 0 °C-ra. A reakcióelegyhez 0 °C-on 20 perc alatt hozzáadtunk 8,2 g 2,4-diamino-5-metil-6-(3,4-dimetoxi-benzil)-7-oxo-7,8-dihidropirido[2,3-d]pirimidint. 50 ml kloroform hozzáadása után az elegyet felmelegítettük, és 2,5 órán át refluxáltattuk. Lehűtés után hozzáadtunk 50 ml etanolos bázist. A képződő barna terméket leszűrjük, 2 n nátrium-hidroxiddal kezeltük, majd etanolból átkristályosítva 7,6 g nyersterméket kaptunk. Etanol/víz elegyből végzett további átkristályosítás után 2 g, 224-225 °C (bomlással) olvadáspontű 2,4-diamino-5-metil-6-(3,4-dimetoxi-benz.il)-7-klór-pirido[2,3-d]pirimidint kaptunk. Ezt hozzáadtuk 250 ml, 02 g kálium-hidroxidot tartalmazó etanolhoz. 0,1 g 5 %-os palládium/faszén katalizátor hozzáadása után megkezdtük a hidrogénezést. A redukció 4 óra alatt végbement (kb. 0,07 kp/cm2 nyomáson egy Parr-féle csökkentett nyomású berendezésben) és 0,1 g 2,4-diamino-6-(3,4-dimetoxi-benzil)-5-metil-pirido[2,3-d]pirimidint kaptunk. Olvadáspont- 265-268 °C (bomlással). .7. példa 2,4 - diamino-6-(2,5-dimetoxi-benzil)-5-metil-pÿido-[2,3-d]pirimidin-2-hidroxi-etánszulfonát 13 g (87,8 mmól) 2-hidroxi-etánszulfonsav-nátriumsót 10 ml ionmentes vízben oldottunk és 2,5 . 30 cm-es, 120 g Dowex HCRW-2(IT+) ioncserélő gyantával töltött oszlopon engedjük át. Az oszlopról lejövő 2-hidroxi-etánszulfonsav koncentrációját 0,25 n nátrium-hidroxiddal fenolftalein indikátor jelenlétében titrálva határoztuk meg. A kapott 69 ml 2-hidroxi-etánszulfonsavat 1,22 n-nek találtuk. 21,6 g (66,3 mmól) 2,4-diamino-6-(2,5-dimetoxi-benzil)-5-metil-pirido[2,3-d]pirimidint 250 ml metanolban szuszpendáltunk és 68 ml 1,22 n 2-hidroxi-etánszulfonsavat adtunk hozzá. Az oldószereket vákuumban ledesztilláltuk, a visszamaradó szilárd anyagot 250 ml acetonlal eldörzsöltük. A kapott terméket leszűrtük, a csapadékot 50 mlacetonnai mostuk, majd vákuumban szárítottuk. így 24,1 g 2,4-diamino-6-(2,5-dirnetoxi-benzil)-5-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-2-hidroxi-etánszulfonátot nyertünk. Olvadáspont: 217,5-219 °C. A terméket etanol-víz elegyből átkristályosítva 70 %-os hozammal 221-223 °C olvadáspontú anyagot kapunk. 4. példa Emlősök dihidrofolát reduktázának (DHFR) gátlása 2,4-diamino-6-benzil-pirido[2,3-d]pirimidinekkel Meghatároztuk a vizsgált vegyítetek inhibitor hatását patkány májából származó, részlegesen tisztított DHFR- zal szemben. Az eredményeket az alábbi 1. táblázatban közöljük. Az 5xl0'8 vagy annál kisebb IC50 értéket jó hatékonyságnak, az lxlO'8 vagy annál kisebb IC50 értékeket pedig különösen jó hatékonyságnak tekintjük. 1. táblázat A VIZSGÁLT I ÁLTALÁNOS KÉPLETŰ VEGYÜLET IC5 o/xl0‘8 M R1 R2 metil benzil 4 metil o-klór-benzil 1,6 metil p-metil-benzil 2,7 metil o-metoxi-benzil 5,0 metil p-metoxi-benzil 5,3 metil p-etil-benzil 9 hidrogén benzil 25 metil 2,5 -dimetoxi -benzil 0,15 metil 3,4-dimetoxi-benzil 0,78 5. példa Meghatároztuk a 3. példában vizsgált vegyületek hatását a HMT-zal szemben. Az eredményeket a 2. táblázatban foglaltuk össze. A 20%-nál kisebb mértékű gátlást még elfogadhatónak tartjuk, de a legkívánatosabb, ha a vegyület semmiféle hatással nincs az enzimmel szemben, minthogy a hisztamin-anyagcserével kapcsolatos mindennemű kölcsönhatás kerülendő. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
