184706. lajstromszámú szabadalom • Eljárás jelzett gibberelinek előállítására
1 2 mentes abszolút tetrahidroftfránban oldjuk, és szobahőmérsékleten 44 mg (1,1 mmól) kálium-hidridet adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten egy óra hosszat keverjük, majd az enoláthoz 0,1 ml (5,55 mmól) 3H20-t (fajlagos radioaktivitás 3 mCi/mmól) adunk. A keverést még három percig folytatjuk, azután 1 ml jégecetet adunk a reakcióelegyhez. A' reakcióelegyet vákuumban többször bepároljuk, miközben többször metanolt adunk hozzá, hogy eltávolítsuk a labilis tríciumot. A szililcsoport eltávolítására a maradékot 8 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és hozzáadunk 2 ml vizet és 1 ml jégecetet. Egy éjszakán át állni hagyjuk. Ezután vákuumban bepároljuk, majd telített nátrium-hidrogén-karbonát oldatot adunk hozzá, és etil-acetáttal egyszer kirázzuk. A szerves fázist nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. 1:9 tf-arányú n-hexán/ /kloroform eleggyel eluálva 101 mg (32 %) [6-3H]-gjbberellin-A5-7-a]dehidet kapunk, kloroformos eluálással pedig 153 mg (49%) [6-3H]-6-epigibberellin-As-7-aldehidet. A [6-3H]-gjbberellin-A5-7-aIdehid fajlagos radioaktivitása 1,39 mCi/mmól), a termék amorf anyag. MS: m/e 314 (M+, ill. M'). A [6-3H]-6-epigjbberellin-A5-7-aldelüd amorf anyag, fajlagos radioaktivitása 1,5 mCi/mmól. MS: m/e 314 (M+, ill. M'). 314.4 mg (1 mmól) [6-3H]-gibberellin A5-7- -aldehidet (amelynek fajlagos radioaktivitása 1,39 mCi/mmól) 8 ml vízmentes piridinben oldunk, és keverés közben hozzáadunk 200 mg (2 mmól) króm-trioxidot. Két órás keverés után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, etil-acetátot adunk hozzá, és 2s%-os sósavval többször kirázzuk. A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. Az 1:9 tf-arányú n-hexán/kloroform eleggyel végzett eluálás után 42,1 mg átalakulatlan [6- Hj-gibberellin-As -7- -aldehidet kapunk. Növekvő etil-acetát tartalmú kloroform/etil-acetát gradienssel eluálva a ,8:2 tf-arányú frakciókból 229,3 mg (80%) (6-3 II]-gibberellin-As-öt kapunk, amely 260—261 C-on olvad, és amelynek fajlagos radioaktivitása 1,31 mCi/mmól. [a]?)5 = —76,2 (c= 0,58 — metanol), MS: m/e 330 (M+, ill. M’), ÍR (Nujol): wnax 3430 (széles, OH), 1765 (y-lakton-CO) és 1660 cm’1 (=CH2). 314.4 mg (1 mmól) [6-3H]-6-epigibberellin-As-7- -aidehidet (amelynek fajlagos radioaktivitása 1,5 mCi/mmól), 8 ml vízmentes piridinben oldunk. Az oldathoz 300 mg (3 mmól) króm-trioxidot adunk. 18 órás keverés után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk és etil-acetátot adunk hozzá. Ezután 2 s%-os sósavval többször kirázzuk. A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. Kloroformos aluálással 26,3 mg átalakulatlan [6-3H]-6-epigibberellin-A5- -7-aldehidet kapunk. Az eluálást növekvő etil-acetát tartalmú kloroform/ctil-acetát gradienssel folytatva a 7:3 tf-arányú frakciókból 166,8 mg (55%) [6-3 H]-6-epigibberellin-As-öt kapunk. Ez amorf anyag, amelynek fajlagos radioaktivitása 1,38 mCi/mmól. [q]fy = -112,r (c= 0,48 — etanol). MS: m/e 330 (M\ ill. M). 9. példa 127 mg (0,4 mmól) gibberellin-A9 (XVIII. számú vegyidet) 2 ml abszolút tetrahidrofurán és 2 ml abszolút dioxán elegyévei készített oldatához -15 °C-on hozzáadunk 41,3 mg (0,2 mmól) diciklohexil-karbodiimidet. Az elegyet 5 °C-on 12 órán át állni hagyjuk, azután kiszűrjük belőle a diciklohexil-karbamidot, majd 45,4 mg (1,2 mmól) nátrium-bór-hidridet adunk hozzá. Két óra reakcióidő eltelte után 1 ml jégecetet adunk a reakcióelegyhez, és vákuumban bepároljuk. A maradékhoz étert adunk és telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal tízszer kirázzuk. Az éteres fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk, bepároljuk, a maradékot kromatografáljuk. 6:4 tf-arányú n-hexán/kloroform eleggyel eluálva 41,2 mg (68%) 6/3-(hidroxi-metil)-7-nor-gibberellin-A9-et kapunk. A megsavanyított vizes fázisokat éterrel extraháljuk, az extraktumot a fentiek szerint feldolgozzuk. 2:8 tf-arányú n-hexán/kloroform eleggyel eluálva 52,2 mg (82%) gibberellin-A9-et kapunk. 56 mg (0,26 mmól) piridinium-klór-kromát, 50 mg nátrium-acetát és 1 ml vízmentes diklór-metán keverékéhez argonatmoszférában, szobahőmérsékleten, keverés közben hozzácsepegtetjük 39,3 mg (0,13 mmól) 67-(hidroxi-metil>7-nor-gibberellin-A9 1 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatát. Két óra reakcióidő után a reakcióelegyhez 20 ml étert adunk. Az éteres fázist elválasztjuk, a visszamaradó részt éténél többször extraháljuk. Az egyesített extraktumokat vízzel többször átmossuk, majd nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. 8:2 tf-arányú n-hexán/kloroform eleggyel eluálva 30 mg (77%) gibberellin-A9-7-aldehidet kapunk. A termék amorf anyag. MS: m/e 300 (M+, ill. M’). IR (CHCI3): wnax 2725 és 1725 (aldehid) és 1775 cm’1 (7-lakton-CO). 30,0 mg (0,1 mmól) gibberellin-A9-7-aldehid 1 ml abszolút tetrahidrofuránnal készített oldatához szobahőmérsékleten, argonatmoszférában hozzáadunk 8 mg (0,2 mmól) kálium-hidridet. Egy órán át keverjük a reakcióelegyet, azután az enoláthoz 0,01 ml (0,56 mól) 3H20-t (fajlagos radioaktivitása: 3 mCi/mmól) adunk. Három perces keverés után 0,1 ml jégecetet adunk a reakcióelegyhez. Ezután a reakcióelegyet vákuumban többször betöményítjük, miközben többször adunk hozzá metanolt, ílyinódon eltávolítva a labilis tríciumot. Ezután a maradékhoz vizet adunk, és éterrel alaposan extraháljuk. Az éteres fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. 1:1 tf-arányú n-hexán/kloroform eleggyel eluálva 9,9 mg (33%) [6-3H]-gibberellin-A9-7-aldehidet, majd 4:6 tf-arányú n/hexán/kloroform elegy - gyel eluálva 13,8 mg (47%) [6-3H]-6-epigibberellin-A9-7-aldehidet kapunk. A [6-3H]-gibberellin-A9- -7-aldehid amorf anyag, fajlagos radioaktivitása 1,42 mCi/mmól. MS: m/e 300 (M+, ill. M’). IR (CDCU) rrnax 2725 és 1725 (aldehid és 1775 cm’1 (y-lakton-CO). A [6-3 H]-6-epigibberellin- A9 -7 -aldehidet 184.706 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
