184704. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív enkefalin analógok előállítására

J

1

184.704

2

X7

Rf

Md

Analízis

Aminosav

analízis

Gly

(HC1)

só

amorf (liofilizált)

0,823

0,634

0,6Ö*

+27,9°

• (c=0,18 MeOH-ban)

C23H29NS07HC1.H20 Gly (3,02), számított%: C: 50,97, Tyr (1,0), H: 5,91, N: 12,93 Phe (0,99), talált%: C: 51,09,

H. 6,19, N: 12,54

Alá

(HC1)

SÓ

amorf (liofilizált)

0,503

0,584

0,67*

♦22,3°

(c=0,2

MeOH-ban)

C2 4 H3 ! Ns 07 .HCl.Hj számítottá: C: 51,85, H: 6,12, N: 12,6Q ' talált%: C: 52,14,

H: 6,20, N: 12,10

O

Gly (1,95), Alá (1,01), Tyr (1,00), Phe (0,98).

Val

(HC1)

só

amorf (liofilizált)

0,802

0,674

0,795

*31,7°

(c=0,l,

MeOH-ban)

C27H35N507 HC1.2H20 számított%: C: 52,80, Gly (2,1), H: 6,52, N: 11,40 Val (1,02), talált%: C: 52,89, Tyr (1,00),

H: 6,45, N: 11,26. Phe (1,05).

A következő peptideket állítottuk elő a fenti példák és referencia készítmények előállításának analógiájára a peptidkémiában elfogadott módszerek 25 szerint, a jellemző adatok is alább következnek. A C-terminális származékokat a következőképpen jelezzük:-OMe: metilészter-NH2 : amid-NHEt: etilamid .

A 10. példában a BOC.Tyr.Gly.Gly.Tyr.Leu.OBu-képletű vegyületet néhány csepp bórtrifluorid-éterátot tartalmazó metanol/metiléndikloridban oldjuk. Diazometán éteres oldatának feleslegét adjuk hozzá és az oldatot hagyjuk állni szobahőmér- gg sékleten, amíg a Pauly-féle reagenssel adott reakció ’ negatív nem lesz. Az oldatot bepároljuk és a BOC és Bu védőcsoportokat n sósav ecetsav oldatával anizol jelenlétében szokásos úton eltávolítjuk a viszszamaradó szilárd anyagból.

A peptid-hídrokloridot színtelen amorf por for- 40 májában izoláljuk vizes oldatból történő liofilizálás után.

A 21. példában a peptid terméket kromatográfiásan tisztítjuk szilikagél (Merck) oszlopon és n-butanol:ecetsav:víz = 3:1:1 arányú elegyével eluáljuk. A Pauly-pozitív frakciókat (Rp 0,442 ) egyesítjük, vákuumban bepároljuk és a maradékot vizes oldatból liofilizáljuk. A 107. példából származó peptid bázist H.Tyr.Gly.Gly.Phe.Leu.Ome képletű vegyület redukálásával állítjuk elő, a redukálószer lítium-alumíniumhidrid vagy más ismert ekvivalens szer.

A 113. és 114. példákból származó peptid bázisokat úgy állítjuk elő, hogy

a) védett aminocsoportból állítjuk elő a Z-leucinamidot,

b) az amidot nitrillé alakítjuk (foszforoxikloriddal),

c) a nitrilt hidrogénaziddal reagáltatjuk és így védett leucintetrazolt kapunk,

b) a leucilaminocsoportot 10% palládiumot tartalmazó csontszén jelenlétében végzett hidrogenolízissel lehasítjuk,

e) a pentapeptidet a szokásos módon összegyűjtjük.

Példa

száma

Vegyidet

Rf

(metanolban)

4.

H.Tyr.D-Ala.Gly.Phe.Leu.OH HC1

0.632,

♦19,3° (c=0,5;

5(a).

H.Tyr.D-Ala.Gly.Phe.Met.OH HC1

0.622,0,603

+17,2° (c=0,5

5(b).

H.Tyr.D-Ala.Gly.Phe.Met.OMe

0.672,0.703

+10,4° (c=0,5;

6.

H.Tyr.D-Ala.Ala.Phe.Leu.OH HC1

0.652,0,564

+1,68° (c=0,5.

7.

H.Tyr.Gly.Gly.Tyr.Leu.OH HC1 .

0.472,0.503

♦24,4° (c=0,54

)

8.

HÍHe.Gly.Gly.Tyr.Leu.OH HCL Me

H.Tyr.Gly.Gly.phe.Leu.OH HQ Me Mg

0.552,0.574

» 26,45° (c=0,54)

9.

0.582,0,624-21.77° (c=0,5)

10.

H.Tyr.Gly.Gly.fyr Leu.OH

0,642,0.923-21,0° (c=0,51)

11.

H.Tyr.Gly.D-Ala.Phe.Leu.OH HC1

0.602,0.903. 0.634 0.602 ,-0,09430.554-36,67° (c=l)

12.

H.Tyr. Ala.D-Alá.Phe.Leu.OH HC1-6,43° (c=l)

13.

H .Ty r .Gly .Gly .Phe .Me t .Thr .OH HC1

O^.O^.O.óO^.óO5

14.

H.Tyr.D.Ala.Gly.Phe.Met.Thr.OH HC1

o.io\o.492,o,684

,+12,46 (c=0,52)

9