184623. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 4-dazacetoxi-4-szubsztituált-indol-dihidroindol-származékok előállítására
2 1 I. Táblázat Vizes fázis pH-ja Extrahált termék mg súlya 2,35 205,8 (elöntjük) 3,0 167,1 3,5 270,6 4,0 671 4 . 4,5 740,1 (e§yesitJük) 5,0 257,7 5,5 123,0 6,0 66,7 6,5 26,7 7,0 23,8 (elöntjük) 7,5 12,8 8,0 22,7 9,0 17,8 sav pufferben oldjuk. A második pH grádiens-extrakciós eljárást az előbbi módon folytatjuk le azzal a különbséggel, hogy némely esetben 400 ml benzollal egynél több extrakciót végzünk. A 2. táblázat az extrakciós eljárás eredményeit mutatja. Az első oszlop a vizes fázis pH értékét, a második oszlop a 400 ml benzollal végzett extrakciók számát, és a harmadik oszlop az oldat bepárlása után kapott extrahált termék mg súlyát mutatja. 2. Táblázat Vizes fázis Extrakciók Extrahált termék pH értéke száma mg 2,35 3 252,4 (elöntjük) 2,75 2 97,1 3,15 1 114,2 3,55 1 276,1 4,00 3 1154,2 4,5 1 213,2 5,0 1 89,7 5,5 1 32,2 6,0 1 18,7 8,0 1 13,5 A pH 4,0 frakció 1,1542 g, melyet metanol-víz elegyből kristályosítunk. Ezzel 854,3 mg kristályos 4-dezacetoxi-4-oxo-vinblasztint kapunk. Az IR- és NMR-spekírumok a megadott kémiai szerkezettel megegyeznek. PMR-spektrum: (60 MHz): (CDCI3, delta): 10,2 (széles s, 1, C3-OH); 8,04 (széles s, 1, indol N-H); 7,43-7,65 (m, 1, Cu, -H), 7,0- 7,22 (ni, 3, C12'-,4'-H): 6,68 (s, 1, C14-H); 6,15 (s, 1, Cn-H); 5,63-5,83 (m, 2, C6)7-H); 3,88 (s, 3, Cj5-OCH3); 3,75 (s, 3, C3-C02CH3); 3,59 (s, 3, C18'~C02CH3); 2,73 (s, 3, N,-CH3); 0,088 (2t, 6, C4V-H). IR-spektrum: (CHCI3): 3436 (gyenge), 2985 (közepes), 2924 (közepes), 1721 (erős), 1616 (közepes), 1497 (közepes), 1453 (közepes),i 1427 (közepes), 1221 (nagyon erős, 4 széles), 1126 (gyenge), 1088 (gyenge), 920 (közepes), 786 (közepes, nagyon széles), 711 (közepes, széles), 660 (gyenge) cm-1. 6 2. Példa 4-Dezacetoxi-4-oxo-vinblasztin előállítása 10 2,47 g 4-dezacetil-vinblasztint, 37 ml toluolt és 7,4 ml inetilén-dikloridot tartalmazó oldatot készítünk. 30 ml loluolban 1,29 g N-klór-szukcinimidet szuszpendálunk, és a szuszpenziót nitrogénáramban hűtés közben keverjük. Ehhez a szuszpenzióhoz 1,06 ml (0,9 g) dimetil- 15 szulfidot csepegtetünk, és az elegyet 15 percig tovább keverjük. Ezután az N-klór-szukcinimid és dimetil-szulfid toluolos elegyhez 5 perc alatt, 0 °C hőmérsékleten, a 4-dezacetil-vinbiasztin oldatát hozzácsepegtetjük. (Oldószerből a következő térfogatokat használjuk: a kiindulási 20 anyag súlyának 15-szörösét toluolbó! súly/térfogat, a kiindulási anyag súlyának háromszorosát N-klór-szukcinimidből súly/térfogat és a dimetil-szulfid feleslegére). A reakcióelegyhez 0 °C hőmérsékleten, 5-6 óra keverés után 2,02 ml (1,47 g) trietil-amint adunk, és az elegyet 25 további 0,5 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjjelre hűtőszekrénybe tesszük. A vékonyrétegkromatográfia azt mutatja, hogy a kiindulási anyag, a 4-dezacetíl-vinblasztin elfogyott, és a reakcióelegy lényegében egy foltot mutató anyagot tartalmaz. A reakció- 30 elegyet éter és metilén-diklorid elegyével hígítjuk, majd a szerves fázist háromszor vízzel mossuk és szárítjuk. Az oldószert vákuumban eltávolítva 2,39 g sárga szilárd 4-dezacetoxi-4-oxo-vinblasztint kapunk. Ezt az anyagot 240 g I aktivitású szilikagélen kromatografáljuk. Az 35 oszlopot 400 ml részletekben 1 :1 metilén-diklorid :etilacetáí eieggyel eluáljuk, melyekhez 9, 13,5, 20, 30 és 45% metanolt adunk. 700 ml eluátum levétele után 20 m!-es frakciókat veszünk. A 21-45 frakciókat egyesítve, és az oldószert bepárolva 1,28 g sárgásbarna szilárd 40 4-dezacetoxi-4-oxo-vinblasztiní kapunk. 14 623 3. Példa 45 4-Dezacetoxi-4a~hidroxi-vinhIasztin 76,6 mg 4-dezacetoxi-4-oxo-vinblasztinból és 0,90 ml vízmentes tetrahidrofuránból oldatot készítünk. Az oldat készítéséhez és a reakció levezetéséhez hasz- 50 nált minden felszerelést szárítószekrényben szárítunk. Az előbbi oldathoz 76,2 mg LiAlH(terc-BuO)3-at adunk, és a reakcióelegyet zárt lombikban, szobahőmérsékleten és nitrogénatmoszférában 22 óra hosszat keverjük. A reakcióelegyhez 0,11 g ammónium-szulfát 55 és 0,17 ml víz oldatát és diatómaföldet adunk, majd az elegyet diatómaföldön szüljük. A nuccspasztát tetrahidrofuránnal mossuk. A tiszta színtelen szűrletet vákuumban betöményítjük, és a 4-dezacetoxi-4ahidroxi-vinblasztint tartalmazó maradékot metilén-di- 00 kloridban oldjuk. A metilén-diklorid ledesztiilálásával 78,6 mg fehér szilárd anyagot kapunk, mely vékonyrétegkromatográfiával főképp egy foltot mutat. A maradékot 20 g Woelm szilikagélen, 30 ml-ként 6, 9, 13,5, 20, 30 és 45% metanolt tartalmazó 2:1 arányú 05 benzol : kloroform eluálóelegy alkalmazásával kromato-
