184041. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glükopiranozil-peptidek előállítására
184 041 21 22 b) A fenti terméket az alábbi megoldás szerint is előállíthatjuk 4,925 mg (1 mmól) Mur-NAc-L-Ala-D-Gln-t oldunk fel 15 ml tetrahidrofurán és 5 ml víz elegyében, majd ezt a vegyületet céziumkarbonát (1 mmól) 20 %-os vizes oldatának hozzáadásával céziumsóvá alakítjuk át. Az elegyet beszárítjuk, majd dimetil-formamiddal több ízben újra bepároljuk, ezt követően szárítjuk, a maradékot 30 ml dimetilformamid 0,13 ml (1,1 mmól) 1-bróm-n-dekán elegyében oldjuk. 20 óra eltelte után a reakcióelegyet szárazra pároljuk. A terméket szilikagél oszlopon kromatografáljuk, az eluáláshoz kloroform és metán 50:15 arányú elegyét alkalmazzuk. A terméket metanol-éter-eleggyel lecsapjuk. A forgatóképesség [odjj = + 29° (jégecetben). E vegyület analízisének eredménye C29H52N4On-0,25 CHCf, képletre: (MS: 661,9) C H N Számított: 53,08% 7,96% 8,47% Talált: 53,2% 8,0% 8,50% 4. N-acetil-muramil-L-alanil-D-ghitamin-n-propilészter szintézise A terméket az N-acetil-muramil-L-alanil-D-glutamin-n-butilészter előállításánál leírtak szerint eljárva állítjuk elő. Forgatóképessége [o<]q = + 32,3° (jégecet). E vegyület analízisének eredménye C22H3gN4On képletre. 5. N-acetil-muramil-L-alanil-D-glutamin-n-hexil-észterének szintézise Az előállítást a 4. pont alatt hivatkozott eljárással végezzük. Forgatóképesség [orjp = 29,5° (ecetsavban). E vegyület analízisének eredménye C25H44N4Ou képletre. 6. N-acetil-muramil-glicil-D-glutamin-n-butil-észter szintézise A 2. példában leírtak szerint járunk el, a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet. E vegyület forgatóképessége [ö<]p = +42,5 (c = = 0,56, vízben). A kapott vegyület pirogenitási vizsgálatát elvégezve annak eredménye 0,13 °C-nak mutatkozott 10 mg termék vizsgálata esetén. Az előállított vegyület pirogén anyagoktól mentes. A cím szerinti vegyület biológiai vizsgálatát a farmakológiái vizsgálatoknál leírtak szerint végeztük el. A kapott eredményeket az 1. táblázat foglalja össze. 5 10 15 20 25 Primér válasz Szekunder válasz BSA kontrol 1,64 3,57 + 1,78 BSA +Mur-Nac-L-Alc-D-izoGlu (MDP) 3,64(100;ug) 8,32 + 1,34 (100jug) BSA +Mur-Nac-Gly-D-Glu-0-nBu 2,64 (500yUg) 8,27 + 1,19 (100/ig) BSA +Mur-Nac-L-Ala-D-Glu-0-nBu 4,2 (lOOjug) 8,43 + 1,52 ( 1 OOyUg) 7. 6-O-szukciniI-MDPG-butil-észter előállítása (MDPG = N-acetil-muramil-D-glutamin) a) Eljárás Íc^-benzil-N-acetil-muramil-L-alanil-D-glutamin-n-butil-észter előállítására 3,634 g o< -benzil-4,6-0-benziliden-N-acetil-muramil-L-alanil-D-glutamin-n-butil-észter (5 mmól) szuszpendálunk 250 ml 60 %-os ecetsavban, majd forró vízfürdőn melegítve teljesen feloldjuk,' Az oldhatatlan maradékot leszűrjük, és a reakcióelegyet szárazra pároljuk. A kapott anyagot szilikaoszlopon (240 g) tisztítjuk, az eluáláshoz kloroform-éter 6:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Vékonyréteg kromatográfia (szilikogél) segítségével kiválasztjuk a megfelelő frakciókat, ezeket egyesítjük, betöményítjük, liofilizáljuk; 1,95 g (61 % hozam) anyagot kapunk. [«Ij0 = + 107,9°J(c = 1DMF) talált értékek: C % 55,3 - H % 7,0 - N % 7,6.. C37H50N4On, 0,1 CHC13 képletre számítva, 0% 7,6. b) Eljárás f<X -benzil-6-O-szukcinil-N-acetil-muramil-L-alanil-D-glutamin-n-butil-észter előállítására 638,7 mg o<-benzil-N-acetil-muranil-L-alamil-D-glutamin-n-butil-észtert (1 mmól) 5 ml vízmentes piridinben feloldjuk, ehhez 150,1 mg borostyánkősavanhidridet (1,5 mmól) adunk. Az elegyet 24 óra hosszat 40 °C hőmérsékleten keverjük, majd a hőmérsékletet 0 °C-ra állítjuk és vízmentes étert adunk hozzá. A keletkező csapadékot ecetsav jelenlétében, matenolban oldjuk, majd az oldatot betöményítjük. Szirupszerű, kristályokat tartalmazó terméket kapunk. A kapott anyagot dimetilformamid-víz 1:1 arányú elegyében oldjuk, majd AGI-X-2 oszlopon tisztítjuk (a dimetilformamid ecetsav tartalma legfeljebb 1 n 45 50 55 60 12
